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目的 :检测蛋白酪氨酸磷酸酶SHP - 2在IL - 1所促发的细胞移动中的作用。方法 :首先构建重组质粒SHP - 2 -GFP以及SHP - 2C >S -GFP ,并分别转入MCF - 7乳腺癌细胞中 ,建立两种细胞株 ,即 :SHP - 2 -GFP -MCF - 7和SHP - 2C >S -MCF -7。利用细胞移动实验、细胞粘附实验、免疫沉淀、蛋白印迹等生物学实验方法 ,从形态学、蛋白表达量、磷酸化水平等方面分析细胞形态变化、E -钙粘蛋白和基质金属蛋白酶MMP - 1、9在 3种细胞株中的表达情况和细胞因子IL - 1刺激后 3种细胞株中的表达情况 ,进而分析SHP - 2蛋白酪氨酸磷酸酶… 相似文献
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目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在IL-1β所促发的细胞移动中的作用。方法 构建重组质粒SHP-2-GFP以及SHP-2C>S-GFP 并分别转入MCF-7乳腺癌细胞中,建立SHP-2-GFP- MCF-7和SHP-2C>S-MCF-7细胞株。采用荧光显微镜技术观察细胞移动情况;RT-PCR、免疫印迹法检测钙黏蛋白和金属蛋白酶的变化情况,确定蛋白磷酸酶SHP-2在细胞移动中的作用。结果 E-钙黏蛋白在IL-1β刺激的SHP-2转染的乳腺癌细胞株中的表达量是最低的,而金属蛋白酶MMP-9的表达量最高。结论 SHP-2参与IL-1β促发的细胞移动,并且通过减少E-钙黏蛋白的表达以及增强金属蛋白酶MMP-9的分泌来发挥作用的。 相似文献
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细胞对各种胞外诱因的应答反应是由胞内的信号传导通路调节的。大量事实表明 ,这种胞外因子所启动的信号传导通路的异常将导致靶细胞产生功能障碍并最终死亡。许多重要的细胞生命活动如细胞增殖、分化 ,以及死亡均与细胞信号传导密切相关。在信号转导过程中 ,蛋白质中酪氨酸的磷酸化以及去磷酸化都是其中心环节[1 3] 。目前 ,关于由蛋白酪氨酸激酶及蛋白酪氨酸磷酸酶所实现的生物学过程已经很清楚了 ,它与信号蛋白分子的活性密切相关 ,直接参与调节蛋白———蛋白间的相互作用。由此 ,蛋白酪氨酸磷酸酶PTPS即将磷酸化的信号分子的酪氨酸去… 相似文献
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目的:探讨骨形态发生蛋白-1(BMP-1)在盆底器官脱垂患者阴道组织的表达情况及其在盆底器官脱垂发生中的作用。方法:选择南京军区福州总医院收治的绝经前盆底器官脱垂患者15例为研究组,同期选取因妇科良性疾病行全子宫切除8例患者为对照组。于术中取患者阴道前壁组织,采用RT-PCR检测BMP-1mRNA的表达,采用免疫印迹方法检测BMP-1两个主要表型(BMP-1-1、BMP-1-3)蛋白表达。结果:盆底器官脱垂患者阴道前壁组织中BMP-1mRNA以及BMP-1-3蛋白的表达与对照组比较明显减低,差异有高度统计学意义及统计学意义(P<0.01,P<0.05);而BMP-1-1蛋白的表达在两组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:盆底器官脱垂患者BMP-1表达降低,从而使成熟胶原释放减少,胶原蛋白含量降低,这可能是盆底器官脱垂的发生机制之一。 相似文献
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氧是机体新陈代谢和维持生存的必要因素,在某些生理或病理生理条件下,整体或局部缺氧能引起机体出现一系列适应性反应,如红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelium growth factor, VEGF)合成分泌增加,糖酵解途径酶的合成等。这些反应同缺氧诱导细胞产生的一种蛋白质—缺氧诱导因子-1 (hypoxia2inducible actor-1,HIF-1)有关,它可调节一系列基因的转录和表达,以维持机体的正常代谢和功能。 相似文献
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目的 探讨基因表达谱芯片筛选宫颈癌放疗残留癌组织与放疗前宫颈癌组织的差异表达基因。方法 收集接受根治性放疗的宫颈癌患者3例,分别获取放疗至50 Gy残留癌组织和放疗前癌组织,通过基因表达谱芯片筛选出放疗前后的差异表达基因,应用荧光定量PCR对部分基因进行验证。结果 基因表达谱芯片检测显示,放疗后残留癌组织表达上调3倍以上的基因有111个,表达下调3倍以上基因有127个。这些基因主要涉及DNA损伤修复、细胞周期调控、细胞粘附、细胞凋亡及自噬、细胞能量代谢、血管生成以及细胞信号转导等功能。荧光定量PCR证实CXCL12、CD74、FGF7、COL14A1、ATM和CD44基因在放疗后表达明显上调(P<0.05),而PRC1、RAD54L基因在放疗后表达明显下调(P<0.05)。结论 基因表达谱芯片能筛选出宫颈癌放疗抵抗差异表达基因,为放疗敏感性的研究提供参考。 相似文献
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盆腔器官脱垂是由于盆底支持结构薄弱导致的盆腔器官移位而引发的一系列临床症状。同样的脱垂症状可能是不同盆底组织结构缺陷的结果,只有诊断明确才能选择正确的术式,制定个体化的临床方案,提高治愈率,降低并发症和复发率。 相似文献
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目的回顾性评估由外向内经闭孔无张力尿道悬吊术(‘outside-in’ transobturator tape,TOT)与由内向外经闭孔无张力尿道悬吊术(‘inside—out’ transobturator tape,TVT-O)治疗压力性尿失禁的安全性和有效性。方法选择2004年4月~2007年1月本院压力性尿失禁患者79例,其中,行TOT患者41例,行TVT-O患者38例。TOT组和TVT-O组患有混合性尿失禁者分别为17例和13例;伴有盆腔脏器脱垂者9例和7例。对比两种手术方式的治愈率和术后并发症,评估两者的安全性和有效性。结果单纯性尿失禁患者平均手术时间为11min(TOT)和15min(TVT-O)。TVT—O组发生膀胱穿孔1例。TOT组平均随访时间为26个月,TVT-O组为14个月。TVT-O组和TOT组的1年总治愈率分别为92%和90%(P〉0.05)。结论TOT和TVT-O均能有效的治疗伴有或不伴有盆腔器官脱垂的压力性尿失禁。 相似文献
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目的:探讨缺氧条件下,电离辐射对肝癌细胞HepG2中缺氧诱导因子HIF-1α及血管生成因子VEGF表达的影响。方法:将HepG2肝癌细胞分为对照组、缺氧组、单纯照射组和缺氧加照射组。缺氧组:氯化钴处理细胞模拟缺氧条件;单纯照射组:按照射率4Gy/min、总共8Gy的剂量,用x线射线照射细胞;缺氧加照射组:氯化钴处理细胞一定时间后,按照与单纯照射组相同的剂量照射细胞。利用荧光显微镜观察各组肝癌细胞的凋亡情况,MTT法分析细胞存活分数,RT-PCR技术检验各组肝癌细胞中的HIF-1α和VEGF表达情况。结果:细胞凋亡情况:对照组未观察到细胞凋亡的情况,缺氧组中少部分肝癌细胞出现凋亡,单纯照射组中大量肝癌细胞出现凋亡,但缺氧加照射组肝癌细胞凋亡情况较单纯照射组明显减少(P〈0.05);MTT检测细胞存活分数排列顺序为:对照组〉缺氧组〉缺氧加照射组〉单纯照射组。HIF-1α表达情况:缺氧加照射组〉缺氧组〉对照组(P〈0.05),单纯照射组与正常组无明显差异。VEGF表达变化情况:缺氧加照射组〉缺氧组〉单纯照射组〉对照组(P〈0.05)。结论:本研究提示HIF-1α可能通过VEGF发挥重要的保护作用,从而降低实体瘤中内部癌细胞对辐射的敏感性。 相似文献
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