苦荞内生真菌产物EE-2抑制HepG2生长及诱导其细胞凋亡

目的研究苦荞内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2对人肝癌细胞的抑制作用及其作用机制。方法采用MTT法考察EE-2对人肝癌细胞HepG2体外增殖的抑制作用,显微镜观察EE-2对HepG2细胞形态的影响,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA完整性,并利用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡及细胞周期变化情况。结果用EE-2处理过的HepG2细胞,显微镜观察可见细胞脱壁圆缩,出现凋亡小体;细胞核降解。流式细胞仪检测发现,处理组的DNA直方图上有比对照组加强的SubG1峰,且可将HepG2细胞阻滞于G0/G1期。结论苦荞内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2可诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,且具有细胞周期阻滞作用。     

斑蝥素间接竞争性ELISA检测方法的建立

目的通过获得的斑蝥抗血清,建立快速、简便、有效的斑蝥素间接竞争ELISA检测方法。方法以合成的斑蝥素完全抗原免疫家兔,获得高效价的抗血清,通过优化条件,建立斑蝥素间接竞争ELISA检测方法的标准曲线,并设定浓度梯度,测定检测灵敏度、检测稳定性和可靠性。结果建立的标准曲线方程为y=-13.421x+102.45,R2=0.988,检测范围为:0.1～24μg/ml。其最低检测下限为0.01μg/ml,批内和批间变异系数分别为4.27%和4.56%。结论本方法具有良好的灵敏性和可重复性,可为进一步开发斑蝥素检测试剂盒提供基础。     

小卷蛾斯氏线虫不同品系RAPD分析及亲缘关系研究

本文运用PCR RAPD技术对小卷蛾斯氏线虫 (Steinernemacarpocapsae)A2 4、ALL、Beijing、BW、CB 16、CB 19、DD 136、ED、Mex、Mex Kapow、NC 116品系基因组的DNA多态性进行了分析。利用优化的RAPD反应体系和筛选的 6个引物对 11个线虫品系的DNA进行随机扩增 ,6个引物共扩增获得 4 2个RAPD标记 ,其中多态性标记为 2 9个 ,占 6 9 1%。DNA多态性分析表明 :小卷蛾斯氏线虫 11个品系可分为 6组 ,在组内 ,品系间的不相似性系数大多低于 0 15 ;而组间的不相似性系数则较大 ,表明小卷蛾斯氏线虫不同品系间具有丰富的遗传多样性 ;同时 ,同一地区采到的同一种线虫可能不属于同一类群 ;而不同地区采到的同一种线虫可能具有相似的遗传背景     

小卷蛾斯氏线虫不同品系RAPD分析及亲缘关系研究

本文运用PCR-RAPD技术对小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocapsae)A24、ALL、Beijing、BW、CB-16、CB-19、DD-136、ED、Mex、Mex-Kapow、NC-116品系基因组的DNA多态性进行了分析.利用优化的RAPD反应体系和筛选的6个引物对11个线虫品系的DNA进行随机扩增,6个引物共扩增获得42个RAPD标记,其中多态性标记为29个,占69.1%.DNA多态性分析表明小卷蛾斯氏线虫11个品系可分为6组,在组内,品系间的不相似性系数大多低于0.15;而组间的不相似性系数则较大,表明小卷蛾斯氏线虫不同品系间具有丰富的遗传多样性;同时,同一地区采到的同一种线虫可能不属于同一类群;而不同地区采到的同一种线虫可能具有相似的遗传背景.     

贡嘎蝠蛾幼虫肠道菌群的分析

贡嘎蝠蛾(Hepialus gonggaensis)幼虫是名贵中药材冬虫夏草(Cordyceps sinensis)的优势寄主。研究贡嘎蝠蛾幼虫肠道菌群,对研究蝠蛾的营养生理,提高幼虫成活率,进而人工培殖冬虫夏草具有重要意义。实验以四川康定采集的贡嘎蝠蛾为实验材料,对贡嘎蝠蛾幼虫的肠道细菌进行了分离和鉴定。实验结果表明,贡嘎蝠蛾肠道细菌都属低温菌,最适生长温度15℃,在15℃培养2d后才长出典型菌落。从肠道中分离纯化出12个不同菌群,其中优势菌群为葡萄球菌,菌群数量为2.05×109mL-1,检出率100%,应为幼虫肠道中的常住菌群,其它菌群检出率均低于50%,可能为肠道…