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荚膜是新生隐球菌的主要毒性因子 ,目前Chang等已克隆了 4种荚膜基因 :CAP5 9、CAP6 4、CAP6 0及CAP10。已知这 4种基因对新生隐球菌的荚膜形成都是必须的 ,缺失任何一个基因都会使新生隐球菌变成无荚膜表型。搞清荚膜形成的任何一个生理、生化机制都将在新生隐球菌的临床诊断和治疗上带来突破性的进展。我们建立荧光蛋白作为标记与荚膜基因CAP6 0融合表达 ,为进一步的研究创造条件。根据已知的CAP6 0基因序列设计PCR引物 ,上游为 5′ ATTGCTAGCTTCGA CAGACATTGAGCCCT 3′ ,下游引… 相似文献
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患者,女,49岁。因反复头痛、呕吐2月入院。既往于1998年患自身免疫性溶血性贫血,长期口服泼尼松15mg/d治疗。入院后查体:颈稍有抵抗,血常规正常,尿蛋白2 。脑脊液查到隐球菌,涂片计数54个/mm3,隐球菌乳胶凝集抗原滴度1∶640。真菌培养鉴定为新生隐球菌。测脑压>400mmH2O。诊断: 相似文献
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目的:探索并建立高效的新生隐球菌转化方法。方法:采用化学转化法进行新生隐球菌的转化,利用特定试剂使隐球菌在一定环境中能摄取外源DNA,并与电转化法进行比较;利用酵母质粒稳定性测定鉴定该化学转化方法的实用性。结果:用化学转化的酵母每μg 质粒DNA转化效率>1000个转化子,其转化效率远高于传统所用的电转化方法(每μg质粒DNA20-30个转化子)。结论:在新生隐球菌的转化寻找到一个合适的化学转化条件,为后续研究奠定了实验基础。 相似文献
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新生隐球菌是一种具有荚膜、能在免疫功能低下人群中引起致命的系统性疾病的酵母真菌。要研究新生隐球菌致病的分子生物学机制 ,必须有一个相应的遗传学操作系统 ,而稳定的转化载体是其中的一个重要组成部分。该载体除了有用以识别的选择性标记外 [1 ] ,必须有较高的转化效率 ,并且有自身的稳定性。我们曾用带有 URA 5基因的质粒 p Cntell作为新生隐球菌转化系统中的载体 ,但该质粒没有自主复制序列 (autonomously replicating sequence,ARS) [2 ] ,转化效率及稳定性较低 ,不利于筛选新基因及对基因的功能进行研究。因此 ,我们尝试构建了… 相似文献