阳离子脂质/DNA复合物气雾剂的制备及其体外细胞转染研究

目的:制备阳离子脂质DOTAP和DNA的复合物(DOTAP/DNA)气雾剂并研究其细胞转染效率。方法:采用改良的Bligh and Dyer萃取法,制备能够在乙醚中均匀分散的不同氮-磷比的DOTAP/DNA复合物,采用定磷法测定载药率、激光粒度分布仪测定粒径分布等参数;进一步灌装DOTAP/DNA复合物气雾剂,以人肺腺癌细胞H1299为模型,检测气雾剂的细胞毒性(细胞相对存活率)和DNA转染效率(荧光强度)。结果:最佳氮-磷比(2∶1)的DOTAP/DNA复合物的载药率可达到(72±1.580)%,粒径为(188.700±42.770)nm;气雾剂的细胞相对存活率可达(91.643±6.970)%,荧光强度可达1.080×105RLU·mg-1。结论:研制的新型DOTAP/DNA复合物气雾剂,其毒性较低,细胞转染效率较高,具有被进一步开发研究成为呼吸道基因输送制剂的潜力。     

利用小动物活体成像技术快速评价呼吸道给药效果

目的:通过小动物活体成像观察荧光物质在动物呼吸道的分布,以快速评价呼吸道给药效果。方法:昆明种小鼠鼻腔吸入给予Cy5.5荧光标记的脂质基因复合物气雾剂设为实验组,同时设立阳性对照组,采用气道插管方式注入与实验组等量复合物无水乙醚溶液,阴性对照组吸入给予等量不含Cy5.5标记的气雾剂,观察气雾颗粒在各组小鼠呼吸道的荧光分布。结果:与阴性对照组比较,实验组和阳性对照组小鼠的呼吸道内均有强烈的荧光显示。结论:小动物活体成像技术可能成为呼吸道给药效果的快速、有效的评价方法。