促黄体生成素基因免疫对前列腺增生模型鼠生殖内分泌的影响

目的 探讨LH基因免疫对前列腺增生模型鼠生殖内分泌的影响。方法 RT－PCR法从雌性大鼠垂体细胞中RNA扩增大鼠的促黄体素基因（LH）cDNA片段约（461bp）并克隆至T载体，获得重组质粒T－LH，限制酶酶切，酶连接，构建PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH，经脂质体转染纯化的重组质粒至COS细胞中，通过肌肉注射构建的PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH与前列腺增生大鼠，2个月内给药两次。结果 体外培养COS细胞，发现HBsAg与LH连接物表达较好，肌肉注射前列腺增生模型鼠重组质粒后，模型鼠LH与T的含量明显低于对照组。结论 PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH可参与前列腺增生模型鼠生殖内分泌腺的调节。     

人心肌肌钙蛋白IcDNA的克隆及分泌表达

克隆人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因全序列，并进行分泌表达。从人心肌组织提取总RNA，经逆转录得到cDNA第一链，以此为模板，PCR扩增目的条带，重新设计上游引物，用相同PCR程序完成点突变；突变后PCR产物克隆入Pfd5载体，并用PCR、SpeI XhoI双酶切、载体测序等方法鉴定；用ITPG诱导cTnI的表达。PCR扩增出630bp左右条带，Pfd5—cTnI融合表达载体用PCR、SpeI Xho1双酶切均可见630bp左右条带，测序结果与预期序列一致；诱导后培养基及细胞周质均检测到cTnI蛋白免疫原活性。人心肌肌钙蛋白I得到成功表达。     

何首乌等对脂肪肝模型大血液指标的影响

目的:探讨何首乌山楂、丹参、绿茶等对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血液指标的影响.方法:大鼠饲喂高脂饲料复制脂肪肝模型,第21天组开始饲喂何首乌等中药水煎液,连续26 d,第46天取血测定总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油的血浆浓度,并进行肝脏病理切片,观察脂肪病变浸润情况,结果:给药各组总胆固醇、三酰甘油与模型组相比,差异均有显著性(P＜0.01);给药各组肝脏脂肪浸润明显低于模型组,其中以何首乌组肝脏脂肪浸润最少.结论:何首乌、山楂、丹参、绿茶对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠脂肪肝形成有一定的抑制作用.     

何首乌等对脂肪肝模型大鼠血液指标的影响

目的:探讨何首乌山楂、丹参、绿茶等对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血液指标的影响。方法:大鼠饲喂高脂饲料复制脂肪肝模型,第21天组开始饲喂何首乌等中药水煎液,连续26 d,第46天取血测定总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油的血浆浓度,并进行肝脏病理切片,观察脂肪病变浸润情况。结果:给药各组总胆固醇、三酰甘油与模型组相比,差异均有显著性(P<0.01);给药各组肝脏脂肪浸润明显低于模型组,其中以何首乌组肝脏脂肪浸润最少。结论:何首乌、山楂、丹参、绿茶对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠脂肪肝形成有一定的抑制作用。     

hSRD5A2体外药物筛选新模型的建立及在筛选药物上的应用

目的:建立人类类固醇5αlphaⅡ型还原酶(hSRD5A2)体外药物筛选新模型,并用于中药提取物的筛选。方法:在体外建立hSRD5A2抑制剂模型,hSRD5A2、睾酮(T)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)一起组成了一个微量反应系统,对底物浓度、NADPH、hSRD5A2、温度和时间进行优化,并利用建立的模型筛选中药提取物。结果:当固定底物、NADPH、hSRD5A2的浓度分别为0.02μmol·L-1、0.8mmol·L-1、0.05u·mL-1时,在37℃反应60min,hSRD5A2达到了最大活性;芒果苷有显著抑制hSRD5A2活性的作用。结论:本研究建立的模型是一种简单可靠的筛选hSRD5A2抑制剂的方法;芒果苷可能成为一种治疗良性前列腺增生的药物。     

重组高频干扰素的生物合成及其活性鉴定

验证通过分子信息理论预测获得的高频干扰素(HFINF)抗病毒活性.以软件Insight和CEN测获得高频干扰素基因序列,通过分子克隆技术,将高频干扰素基因克隆到p6EX-4T-2载体中,构建高效表达质粒pGEX-4T-2-HFIFN,转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中,构建高效表达菌株,通过优化培养条件,...     

靶向基因转移系统的研究进展

基因治疗已在治疗多种人类重大疾病如遗传病、肿瘤等方面显示出良好的应用前景,但也面临着巨大的挑战,主要是如何选择安全、高效、靶向的载体系统。基因治疗的靶向性研究近年来取得了许多新的进展,如应用重组病毒载体,借助抗体或配体将治疗基因定向导入靶细胞。纳米生物材料由于其良好的生物安全性,可方便有效地实现基因的靶向性及高效表达,成为制备高效、靶向的基因治疗载体系统的良好介质,在基因治疗载体系统中日益受到广泛重视。本文综述了目前国内外在靶向基因转移系统中的最新研究进展。     

褪黑素主动免疫对雄兔睾丸发育的影响

目的:研究褪黑素(melatonin,Mel)与雄兔睾丸发育之间的关系.方法:30只未达初情期的雄性新西兰大耳兔,随机分成2组,每组15只.实验组采用皮内多点多次注射Mel与牛血清白蛋白偶联制备的完全抗原进行主动免疫,对照组相应注射等量的蒸馏水.实验期间,用RIA法检测兔血清睾酮及促黄体生成激素含量,并在实验结束时测定兔睾丸、附睾质量及精子数.结果:进入发情期后,实验组兔血清睾酮及促黄体生成激素含量均明显低于对照组(P<0.01),睾丸、附睾质量及精子数亦显著低于对照组(P<0.01).结论:通过Mel主动免疫可以延缓兔睾丸发育.     

褪黑素被动免疫对前列腺增生模型鼠生殖内分泌的影响

目的：探讨褪黑素（Mlt)与前列腺增生模型鼠生殖内分泌的关系。方法：按照一定的浓度梯度静脉注射Mlt抗血清，60d后采集模型鼠血清，用放射免疫测定法测定模型鼠的睾酮（T）含量与促黄体素（LH）含量。结果：前列腺增生模型鼠组LH与T含量均低于对照组。结论：Mlt与前列腺增生可能相关。     

生长抑素DNA疫苗在COS细胞中的瞬时表达

构建了生长抑素DNA疫苗制裁粒pCHSS(pCDNA/HBsAg/SS)，并在COS细胞中的获得较高水平的瞬时表达，用HBsAgElisa检测试剂盒跟踪发现，约有27%的融合蛋白分泌到细胞外，说明SS的插入没有影响HBsAg的免疫反应性和分泌表达，免疫电镜观察，HBsAg可以组装成22nm-30nm的颗粒，说明SS的插入没有影响HBsAg的组装，该实验为动物实验打下基础。