人Prohibitin 2哺乳动物细胞株的转染表达与定位的初步研究

目的 构建带FLAG标签的人类野生phb2 (prohibitin 2)表达载体,将其转染至HEK 293T细胞检测其表达,转染至COS7细胞观察phb2蛋白在细胞内的定位.方法 以含有人phb2全长cDNA序列的质粒为模板,通过带有FLAG标签上游引物,用PCR方法扩增phb2全长序列,然后插入真核表达载体pCDNA3中构建pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位.结果 成功构建了pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,转染表明此表达载体在HEK 293T细胞中能够有效表达,在COS7细胞中phb2呈斑点状主要在胞质内分布,细胞核中未见到明显的表达.结论 实验结果为进一步了解phb2的功能提供了一定的基础.     

昂丹司琼预防急诊剖宫产术后硬膜外吗啡镇痛瘙痒的效果和安全性研究

目的:评价昂丹司琼用于预防急诊剖宫产术后硬膜外吗啡镇痛瘙痒的有效性和安全性。方法:急诊在腰硬联合麻醉下行剖宫产手术患者60例,ASAⅠ~Ⅱ级,18~35岁,进入本项研究,接受术后硬膜外吗啡镇痛,采用随机数字表法分为2组,分别为昂丹司琼组(O组)和生理盐水组(P组),每组各30例。O组断脐后静脉给予昂丹司琼8mg(4ml),P组断脐后静脉给予生理盐水4ml。术后镇痛方案:断脐后,硬膜外腔给予吗啡4mg。术后随访至48h,记录生命体征、瘙痒评分、镇静评分以及恶心呕吐等不良反应发生情况。结果:2组患者一般情况比较差异无统计学意义,术后48h内生命体征基本平稳。术后4、8、24、48h,O组的瘙痒评分显著低于P组(P<0.05);O组的瘙痒发生率显著低于P组(P<0.05)。不良反应方面,O组患者恶心呕吐的发生率显著低于P组(P<0.05);而2组患者嗜睡、头晕的发生率比较差异无统计学意义。结论:预防性使用昂丹司琼能安全有效地减少急诊剖宫产术后硬膜外吗啡镇痛瘙痒的发生率和显著减轻瘙痒的程度。     

他汀类药物的非降脂作用

在过去的十几年中，他汀类药物（ＨＭＧ—ＣＯＡ还原酶抑制剂）以其疗效确切，不良反应少，耐受性好，为广大高脂血症患者带来了福音。同时，广大医务工作者还发现了他汀类药物存在非降脂作用的其他益处。１ 稳定斑块 动脉粥样硬化斑块由脂质核和纤维帽组成，前者中所含的Ｔ－淋巴细胞所释放的γ－干扰素和其他细胞因子可抑制平滑肌细胞（纤维帽内）合成胶原和弹性纤维，巨噬细胞吞噬脂质后形成泡沫细胞能释放蛋白酶，以分解胶原和弹性纤维。由此可见，平滑肌细胞受抑制易使斑块不稳定．普伐他汀稳定斑块作用表现在：（１）不抑制平滑肌细胞…     

西沙必利的药物不良反应

西沙必利 (Ｃｉｓａｐｒｉｄｅ ,商品名普瑞博思 )是一种新型的胃肠动力药 ,临床广泛用于治疗返流性食管炎、非溃疡性消化不良等胃肠运动障碍性疾病。本药副作用少而轻微 ,主要有腹痛、腹泻、肠鸣 ,偶见头晕、头痛、恶心等。近年来随着临床应用的日益广泛 ,其不良反应国内外时有报道。现介绍如下。1.锥体外系反应袁捷等〔1〕 报告 1例 2 5岁女性患者 ,因顽固性便秘服用西沙必利 10ｍｇ ,1小时后行走不稳 ,多次跌倒 ,神志清 ,双眼球无震颤 ,四肢肌无力 ,肌张力基本对称 ,闭眼难立征、跟膝胫试验阳性。停药后症状消失 ,再次服用西沙必利 10ｍ…     

Sedlin突变体S124A对其与PAM14相互作用的影响

目的 构建Sedlin的点突变体,研究其与PAM14在酵母中的相互作用,寻找其相互作用的位点.方法 用蛋白质在线序列分析软件CPHmodels预测Sedlin蛋白的磷酸化位点,可能的磷酸化位点主要有S2、S30、S119、S124、Y115,针对其中一个磷酸化位点(S124)设计定点突变引物;以pAS-Sedlin为模板,以两条含有突变位点的互补序列为引物进行PCR扩增,将得到的PCR产物用Dpn Ⅰ酶切除去模板,消化产物转化大肠杆菌感受态DH5α,对得到的阳性克隆进行测序;将构建的定点突变质粒pAS-sedIins与pACT2-PAM14共转化至酵母Y190中,并对生长至合适大小的克隆进行B-半乳糖苷酶活性分析.结果 构建了pAS-Sedlin的定点突变质粒pAS-SedlinS,其与pACT2-PAM14共转克隆的β-半乳糖苷酶活性反应呈阳性,并且Sedlin S124A蛋白与PAM14蛋白的相互作用比野生型Sedlin蛋白与PAM14蛋白相互作用强.结论 成功构建了Sedlin S124A,Sedlin蛋白的S124并不是其与PAM14在酵母中相互作用的特异性结合位点.     

国产罗红霉素治疗肺炎支原体感染160例

本文于1995年12月至1997年2月采用国产罗红霉素治疗小儿肺炎交原体（MP）感染160例，并就其疗效及安全性与红霉素进行比较，报道如下。资料与方法一、临床资料240例确诊为MP感染的患儿，随机分为罗红霉素、红霉素两组，各16b，80例：男104，50例；女56，30例：年龄4mo～13a．5mo～12a。平均年龄4．12±2．30a，4.12±2。31a。病种：咽炎46、22例；急性扁桃体炎21、11例；毛细支气管炎3、2例：喘息性支气管炎35、16例：支气管炎30、16例；肺炎25、13例。对引大与体征：有发热、频繁剧咳、气喘、胸痛、呼吸音明显粗糙或降低、肺部有干湿罗音…     

灯盏细辛注射液治疗脑梗死38例临床观察

目的：探讨灯盏细辛注射液治疗脑梗死的疗效。方法：治疗组用灯盏细辛注射法20ml加入0．9％氯化钠注射液250ml，对照组用复方丹参注射液16ml加入低分子右旋糖酐注射法560ml；两组均静滴，每日1次，15天为1个疗程，间隔5--7天，一般为1—3个疗程，比较两种方法疗效。结果：灯盏细辛组与对照组的总有效率分别为97．3％和84．1％，P＜0．01，差异有显著性意义。结论：灯盏细辛注射液治疗脑梗死安全有效。     

甘露醇引起急性肾功能衰竭2例分析

甘露醇是已六醇 ,属渗透性脱水剂 ,是目前降颅压的首选药物。作者对本院用甘露醇引起急性肾衰病史较完整者２例 ,作一分析 ,现报告如下。１病例报告例１,男 ,５１岁 ,因突然头痛昏迷４小时入院 ,入院诊断自发性蛛网膜下腔出血 ,当天查血ＢＵＮ１７．８ｍｇ% ,Ｃｒ１．４７ｍｇ%     

盐酸右美托咪定用于老年患者膝关节镜手术腰麻联合硬膜外麻醉的临床观察

目的 探讨盐酸右美托咪定在膝关节镜手术腰硬联合麻醉中的应用效果及安全性。方法 80例膝关节镜手术患者按随机双盲对照法分为对照组和观察组,每组40例。两组均采取腰硬联合麻醉。对照组在术中静脉泵注生理盐水,观察组术中静脉泵注盐酸右美托咪定。结果 观察组手术开始前5 min(T1)、手术开始时(T2)、手术开始后5 min(T3)、手术开始后30 min(T4)、手术结束时(T5)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)、心率(HR)均显著低于对照组(P<0.05)。观察组术后的皮质醇、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)水平,VAS(疼痛视觉模拟评分法)评分、麻醉不良反应发生率均显著低于对照组,Ramsay评分显著高于对照组,神经阻滞时间及术后恢复时间明显比对照组更长(P<0.05)。结论 在膝关节镜手术腰硬联合麻醉中应用盐酸右美托咪定能有效增强局麻药的镇痛、镇静作用,维持血流动力学稳定,减少麻醉相关并发症的发生。     

人phb1基因在哺乳动物细胞株中的转染定位和表达

目的 构建带Flag标签的phb1真核表达载体,将其转染至COS7细胞中观察phb1蛋白在细胞内的定位,并转染至HEK293T细胞检测其表达.方法 以含人phb1全长cDNA序列的质粒pLenti6-phb1为模板,用PCR方法扩增phb1全长序列,连接至T载体,构建pUCm-T-phb1,Kpn Ⅰ和EcoR I双酶切后插入真核表达载体pCDNA3中,将重组表达质粒pCDNA3-Flag-phb1转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位.转染至HEK2931、细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测.结果 经测序鉴定,成功构建了真核表达载体pCDNA3-Flag-phb1,转染后荧光显微镜观察phb1在COS7细胞中主要定位于胞质;经Western blot检测phb1基因在HEK293T细胞中能够有效表达.结论 实验结果为进一步了解phb1的功能打下了基础.