星点设计-效应面法优化白鲜皮多糖硫酸酯化工艺及抗氧化活性

目的 利用星点设计-效应面法优化白鲜皮多糖（Dictamnus dasycarpus polysaccharide,DDP）硫酸酯化工艺,考察DDP修饰前后结构特征及抗氧化活性。方法 采用氯磺酸-吡啶法,以酯化试剂比例、酯化试剂与多糖溶液比例、反应温度、反应时间为自变量,硫酸根取代度（degree of substitution,DS）为因变量,对自变量各水平进行多元回归拟合,利用效应面法筛选最佳工艺并进行预测分析;采用红外光谱及扫描电镜观察其结构特点。测定硫酸酯化白鲜皮多糖（sulfated polysaccharides from Dictamnus dasycarpus,SDDP）对DPPH、OH·、O₂^-·清除能力,考察其抗氧化活性。结果 最佳工艺条件为酯化试剂比例1：4,酯化试剂与多糖溶液比例1：1,反应温度73℃,反应时间5 h。红外光谱显示SDDP在820 cm^-1和1 254 cm^-1附近出现C-O-S和S=O硫酸基特征吸收峰,表明DDP修饰成功;扫描电镜显示SDDP表面粗糙,排列紧密,且块状体积明显小于DDP;DDP和SDDP都有清除DPPH、OH·和O₂^-·能力,且SDDP对DPPH、OH·和O₂^-·清除率强于DDP。结论 星点设计-效应面法优化DDP硫酸酯化工艺方法简便且预测性良好,DDP经硫酸酯化后,抗氧化活性有所提高。     

基于GEO数据库挖掘与网络药理学探讨刺五加治疗阿尔茨海默病的机制

目的 基于生物信息学和网络药理学方法筛选刺五加治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)的潜在药物靶点和信号通路,初步验证其药效。方法 文献检索获取刺五加成分,利用Swiss ADME对成分进行筛选,通过Swiss Target Prediction预测潜在靶点;由GSE28146数据集筛选AD差异表达基因;对刺五加靶点和AD靶点进行映射,构建“药物-成分-潜在靶点-疾病”网络及蛋白质互作网络;利用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析;采用Autodock软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接验证。采用D-半乳糖联合氯化铝诱导AD小鼠模型,Morris水迷宫试验检测各组小鼠学习记忆能力,并观察小鼠海马体的病理学变化。结果 筛选获得刺五加治疗AD活性成分24个,潜在靶点74个;“药物-成分-潜在靶点-疾病”网络提示槲皮素、山奈酚等为刺五加治疗AD的主要成分,蛋白质互作网络提示STAT3、MAPK1、PIK3CA等为关键靶点;得到GO富集条目(P<0.01)366条,KEGG富集通路(P<0.01)109条;主要涉及PI3K-AKT、AGE-RAGE和TNF等通路。分子对接结果显示,刺五加主要活性成分与主要靶点具有较好的结合活性。体内药理实验结果表明,刺五加可显著提高小鼠学习记忆能力,减轻海马组织损伤,降低海马组织中TNF-α、IL-6、IL-1β含量。结论 刺五加可能通过抑制炎症因子表达和减少炎症损伤发挥抗AD作用。     

车前子多糖对膜性肾病大鼠肾损伤和肠道菌群的影响

目的 研究车前子多糖（PSP）对膜性肾病（MN）大鼠肾损伤的保护作用及对肠道菌群的影响，为PSP治疗MN的深入研究提供理论基础。方法 采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA，3.5 g·L^-1）诱导MN大鼠模型，造模周期为7周。于造模第4周，将造模成功大鼠按照随机数字法分为模型组，阳性药物组（盐酸贝那普利，10 mg·kg^-1·d^-1），PSP高剂量组（PSP-H，800 mg·kg^-1·d^-1），PSP中剂量组（PSP-M，400 mg·kg^-1·d^-1），PSP低剂量组（PSP-L，200 mg·kg^-1·d^-1），每组10只；另取10只未造模的大鼠为正常组。正常组和模型组大鼠灌服等体积生理盐水，各给药组大鼠灌服相应药物，每日1次，连续4周。实验结束后，采用光镜法分别观察大鼠肾脏及结肠组织病理变化，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清及结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β）含量，免疫组织化学法检测大鼠肾组织中TNF-α，IL-1β蛋白表达情况，运用16S rRNA测序法研究PSP对MN大鼠肠道菌群调节作用。结果 与正常组比较，模型组大鼠肾小球增大、基底膜增厚，结肠组织腺体萎缩，血清及结肠组织中TNF-α，IL-1β含量明显上升（P<0.05），TNF-α，IL-1β蛋白表达显著增加（P<0.01）；与模型组比较，盐酸贝那普利组和PSP-H组大鼠肾小球囊腔减小、基膜增厚程度减轻、结肠组织中黏膜排列较整齐，但PSP-M，PSP-L组对肾组织及结肠组织改善效果不佳；PSP-H，PSP-M组大鼠血清及结肠组织中TNF-α，IL-1β含量明显下降（P<0.05），肾组织中TNF-α，IL-1β蛋白表达显著降低（P<0.01），PSP-L组差异无统计学意义；模型组大鼠肠道菌群中有害菌厚壁菌门丰度升高、有益菌拟杆菌门丰度降低；给予PSP后有害菌厚壁菌门丰度降低、有益菌拟杆菌门丰度升高，以PSP-H变化最为显著。结论 PSP可有效缓解MN大鼠的肾损伤、降低炎症因子表达，并可调节MN大鼠肠道菌群结构、改善受损的肠道屏障。     

黄芪-百合-沙棘联用治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学分析

目的基于网络药理学方法探讨黄芪-百合-沙棘（ALH）联用治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）的可能作用机制。方法利用TCMSP 数据库筛选ALH 的活性成分及作用靶点,通过GeneCards、OMIM 数据库收集AD 相关靶点,将药物活性成分靶点与AD 疾病相关靶点取交集,获得药物-疾病共同靶点;采用 Cytoscape 3.7.2 软件构建药物-活性成分-靶点-疾病网络,并采用STRING 平台构建蛋白互作（PPI）网络,筛选 关键活性成分和靶点;采用Autodock 软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接;采用Clue GO 插件进行 KEGG 通路富集分析。采用D-半乳糖联合氯化铝诱导AD 小鼠模型,通过Morris 水迷宫实验、海马组织病理 学观察（HE 染色法）及ELISA 法检测海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量,对ALH 治疗AD 的作用机制进行 初步验证。结果经筛选共获得ALH 活性成分39 个,如槲皮素、山柰酚、7-O-甲基异丙醇胺、芒柄花黄 素、异鼠李素等,主要作用于ATK1、MAPK1、JUN、TP53、TNF 等靶点,涉及PI3K-Akt、MAPK、AGERAGE 、IL-17、TNF 等信号通路,共同发挥治疗AD 的作用。药理学实验结果显示,ALH 可显著提高小鼠学 习记忆能力（P＜0.05,P＜0.01）,减轻海马组织损伤,降低海马组织中TNF-α、IL-6、IL-17 含量（P＜0.05, P＜0.01）。结论ALH 治疗AD 是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果,其机制与抑制炎性因子表达,减 轻炎症损伤有关。     

基于网络药理学和分子对接技术及动物实验探究巴亚格七味散对酒精性肝病的作用机制

目的采用网络药理学和分子对接方法探究巴亚格七味散治疗酒精性肝病可能的作用机制,并通过实验 进行初步验证。方法利用中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）、Swiss ADME、Swiss Target Prediction 和 文献获得巴亚格七味散有效成分及其作用靶点;通过GeneCards、DisGeNet 和OMIM 数据库获取酒精性肝病的 疾病靶点;以STRING 数据库构建靶点相互作用网络;通过DAVID 6.8 数据库对关键靶点进行基因本体（GO） 富集分析、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。采用Cytoscape 3.7.1 软件构建巴亚格七味散治 疗酒精性肝病的“药物-有效成分-潜在靶点”网络和“成分-靶点-通路”网络,并筛选关键靶点进行分子对 接。基于网络药理学和分子对接结果,通过动物实验初步验证预测结果。结果去重后共获得81 个化学成分 及906 个潜在作用靶点。GO 富集分析共得到GO 条目510 条,其中生物过程365 条,细胞组成47 条,分子功 能98 条。KEGG 富集共得到106 条信号通路,主要涉及神经活性配体-受体相互作用、趋化因子信号通路、 Fc RI 信号通路等通路。分子对接结果显示,MAP2K1、MAPK1 和PIK3CA 等靶点可能为巴亚格七味散治疗酒 精性肝病的关键靶点。体内动物实验结果表明,巴亚格七味散可以有效减少酒精性肝病小鼠干细胞坏死和脂滴 堆积的程度,从而缓解肝组织的病变,同时可以降低MAPK1 和PIK3R1 的表达,与网络模拟结果基本一致。 结论初步揭示巴亚格七味散可能是通过影响MAPK1 和PIK3R1 的表达,减轻炎性细胞浸润和肝细胞坏死程 度,从而起到治疗酒精性肝病的作用,可为深入阐明巴亚格七味散治疗酒精性肝病分子机制提供理论依据。