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1.
<正> 血栓性疾病,尤其是急性心肌梗塞严重威胁着人类的生命与健康,目前国内外临床应用的溶血栓药物主要有链激酶(Streptokinase,SK)、尿激酶(Urokinase, UK)以及近年来开始广泛研究和初步应用的纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,PA)。SK和UK具有类似PA的作用,在治疗血栓性疾病中起了积极作用,但它们存在各自的缺点,如SK是一种细菌蛋白,重复使用有时引起过敏反应,UK主要来源于尿液,其制备受外部因素的影 相似文献
2.
CPB-ST融合基因的构建及表达研究 总被引:6,自引:0,他引:6
用限制性核酸内切酶EcoRI和SalⅠ双酶切含有大肠杆菌耐热性肠毒素ST1前体蛋白基因的质粒pXST1,回收325bp的ST基因片段,然后,通过T4DNA连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的带有产气荚膜梭菌β-毒素基因(CPB)的重组质粒pECB2中CPB基因的下降,转化受体菌BL21(DE3)中,经BamHI和EcoRI酶切反应鉴定重组质粒,得到了理想重组质粒pECB-ST1。重组菌株Bl21(DE3)(pECB-ST1)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE、Western-bloting及ELISA检测,结果表明重组菌株可以表达CPB-ST融合蛋白,而且该融合蛋白无天然β-毒素和ST1的生物毒性。 相似文献
3.
目前,生产转基因动物主要的方法仍是受精卵显微注射法,所需设备复杂,技术难度大,成功率低。为此,人们都在寻找一种新的方法。利用精子携带外源DNA进入卵母细胞的精子载体法是设想之一。九十年代初,Mare和Rottmann等分别报导了电击法和脂质体转染法让精子在体外携带上外源DNA,再行体外受精的方法,引起了学者们的广泛关注,但其结果不稳定,阳性率极低。我们采用脂质体包裹外源DNA,直接注入输精管内,数天后与雌鼠交配的方法,得到了较为满意的结果,现简报如下。1材料和方法将构建好的WAP-t-PA质粒与脂质体混合制备成转染… 相似文献
4.
<正> 目前建立转基因动物最常用的方法仍然是经典的受精卵显微注射法.但这一方法存在诸多的不足之外:所需的仪器设备价格昂贵;技术要求高;成功率低.电穿孔导入法,是通过高压电场使细胞膜通透性发生暂时性的可逆变化,从而使DNA分子进入细胞内的一种物理方法.目前已有一些穿孔导入法促使外源基因转染精子的报道,但由于各处实验室所使用的电击仪器不同,电击缓冲液及电击条件也不相同,因此,各实验结果的报道并不一致.我们用假阴道法采集家兔精子,经电击缓冲液洗涤3次,调整精子浓度至10~6个/ml.电击悬液总体积100ml,加入环状重组质粒pV-WAP-tPA(浓度20μg/ml).使用BAERON600型基因转移仪,设电击条件:周期10;脉冲数1000;脉冲宽度100;距离2.0mm;电压2000,4000,6000;脉冲时间500,1000,1500ms.另设电击悬液中不加质粒作 相似文献
5.
为深入研究人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV—1)衣壳蛋白p24的结构与功能,制备抗P24单克隆抗体及其诊断抗原,将编码HIV-1p24蛋白的p24gag基因片段,克隆到原核表达载体pET-17b的T7噬菌体启动子下游,构建成了重组表达质粒pET24,并使p24gag基因片段在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,其产物为30kDa的s10-p24融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的38.4%。重组P24蛋白均抗p24单克隆抗体及HIV—1阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原性,对研究开发AIDS诊断试剂和基因工程疫苗具有重要意义。 相似文献
6.
7.
本实验以 HIV- 1env与 h IL - 6基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的 ,将痘苗病毒复制非必需区血凝素(HA )基因作为侧翼 ,把编码人白细胞介素 6 (h IL - 6 )的基因片段克隆到真核表达质粒 p J38env的下游 ,构建成含有 HIV- 1env与 h IL - 6两种外源基因的重组表达质粒 PJ38E- IL 6 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选 ,获得了重组痘苗病毒 v J38E- IL 6。经间接免疫荧光试验、Dot- EL ISA和 Western bolt等检测证明 ,重组病毒能同时表达 env蛋白和 IL - 6蛋白 ,表达产物的分子量分别为 98k Da、2 6 k Da 相似文献
8.
9.
Fowlpox Virus (FPV), a member of the Avipoxvirusgenus, has the potential advantages of a large genome and good immunogenicity. The virus only infects avian species in nature, but it abortively infect mammalian cells and effectively presents encoded foreign genes to the host immune system[1]. So, recombinant FPV is used as not only a live attenuated vaccine to control the diseases in poultry, but also effective and safe vectors for delivery of heterologous vaccine antigen in non-avian[2,3]. … 相似文献
10.
殷震惠 《中国城乡企业卫生》2000,(3):41-41,46
子宫内膜异位症是生育期妇女的常见病,发生率呈逐年上升趋势,在妇科腹部手术病例资料中,内膜异位症病例约占8%~30%。内膜异位症虽然是良性病变,但有恶性行为,具有增生、侵润、扩散等特点。目前关于内膜异位症的基础研究已进入分子水平,而临床诊断仍以症状体征为主。 一、临床资料方法 1994年5月~1997年10月我院内膜异位症 相似文献