金黄色葡萄球菌对16种抗菌药物的耐药性分析

目的探讨临床感染标本金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法调查统计2006年1月至2008年11月实验室分离的金黄色葡萄球菌,采用纸片扩散法（K-B法）测定16种抗菌药物的药物敏感试验数据,用WHONET5软件进行统计分析。结果239株金黄色葡萄球菌,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为133株,占55．6％;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌为106株,占44．4％;金黄色葡萄球菌对16种抗菌药物的耐药率最高的是青霉素G为224株（93．8％）、万古霉素耐药率为0。结论甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌对大部分抗菌药物仍保持良好的敏感性,而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌表现为多重耐药性,但万古霉素例外,所以对耐万古霉素金黄色葡萄球菌的连续监测、了解葡萄球菌属的耐药机制具有重要的临床意义。     

亚抑菌浓度亚胺培南对MRSA体外增殖及毒力相关基因mRNA表达水平的影响

目的：探讨亚抑菌浓度亚胺培南对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）生物学活性的影响,阐明碳青霉烯类抗生素对MRSA活性的抑制作用及其机制,为临床应用碳青霉烯类抗生素治疗MRSA感染提供依据。方法：选取5株ST239型MRSA临床分离株,采用1/10和1/2最小抑菌浓度（MIC）亚胺培南与其体外共培养1.5、6.0和12.0h,分为对照组（培养液中不加亚胺培南）、1/10MIC组（培养液中添加1/10MIC浓度亚胺培南）和1/2MIC组（培养液中添加1/2MIC浓度亚胺培南）。采用荧光定量PCR方法检测各组MRSA株毒力相关基因纤维黏连蛋白A（fnbA）、葡萄球菌蛋白A（spa）、α溶血素（hla）、白细胞毒素D（lek-D）和E（lek-E）、肠毒素A（sea）mRNA相对表达水平,分光光度法检测各组MRSA株体外增殖活性。结果：与对照组比较,体外共培养6.0和12.0h时,1/2MIC组MRSA株增殖活性明显降低（P<0.01）;培养1.5和6.0h时,6个MRSA毒力相关基因mRNA相对表达水平均明显低于对照组（P<0.01）;培养12h时,1/10MIC和1/2MIC浓度组MRSA株各毒力相关基因mRNA表达未能检测到。结论：亚抑菌浓度亚胺培南对ST239型MRSA多种毒力相关基因mRNA表达具有明显抑制效应,高浓度亚胺培南可抑制MRSA的体外增殖,提示亚胺培南对于重症MRSA感染患者具有潜在的应用价值。     

XE-2100五分类血液分析仪性能评价报告分析

SysmexXE～2100血液分析仪是一台五分类全自动血液分析仪,除采用传统的电阻抗法和射频法外,还用流式细胞技术,结合特殊化学试剂及荧光染料作外周血五种白细胞的分类;并可分析出原始和幼稚粒细胞、有核红细胞。我们在该仪器使用前对其检测系统的方法学性能指标进行了分析评价,现将结果报告如下。     

内蒙古地区脑梗塞患者血小板最大聚集率分析

目的:探讨血小板最大聚集率对脑梗塞患者组的临床意义。方法:测定202例脑梗塞患者的血小板最大聚集率,并与健康对照组进行比较。结果:脑梗塞患者组的血小板最大聚集率明显高于健康对照组,二者之间有极显著性差异(P<0.001)。结论:血浆血小板最大聚集率对脑梗塞的诊断和预防有指导意义。     

抗凝血酶-Ⅲ检测在慢性肾小球肾炎与泌尿系感染中的比较分析

目的 通过抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的检测,探讨其在慢性肾小球肾炎和泌尿系感染患者中的诊断价值.方法 采用内蒙古自治区人民医院确诊的慢性肾小球肾炎患者、泌尿系感染患者和健康体检者各126例抗凝全血标本,按说明操作CS-5100凝血分析仪,测定三组标本AT-Ⅲ数据.结果 确诊的各126例慢性肾小球肾炎和泌尿系感染抗凝全血标本的AT-Ⅲ检测结果经t检验分析表明,慢性肾小球肾炎组与泌尿系感染组、对照组AT-Ⅲ检测结果比较在统计学上均存在差异(t=7.331,P＜0.05;t=7.297,P ＜0.05);而泌尿系感染组与对照组AT-Ⅲ检测结果差异无统计学意义(t=1.216,P＞0.05).结论 AT-Ⅲ的检测在慢性肾小球肾炎组中具有一定的临床诊断意义.     

CDK2干扰RNA对人脑胶质瘤细胞质蛋白质组的影响

目的构建人CDK2的干扰RNA真核表达载体,稳定转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞,经RT-PCR检测后,运用双向电泳-图像分析-质谱技术研究人脑胶质瘤细胞质蛋白质组的改变,探讨CDK2在SHG44细胞中的作用,为人脑胶质瘤的发生、发展的研究及诊断与治疗提供有价值的资料。方法 (1)构建CDK2干扰RNA真核表达载体并用双酶切和测序鉴定。(2)G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染的SHG44细胞系。(3)通过RT-PCR比较转染后CDK2mRNA的表达量。(4)双向凝胶电泳-质谱技术-数据库搜索,比较转染前后细胞质蛋白质组的变化。结果 (1)成功构建了CDK2干扰RNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo-CDK2-1。(2)获得稳定转染细胞系,命名为PCDK2-1-SHG44细胞。(3)通过双向电泳-图像分析-质谱技术得到细胞质未见表达的蛋白质5个,包括醛缩酶A、波形蛋白等蛋白质。结论成功建立稳定转染CDK2干扰RNA的SHG44细胞系。质谱鉴定得到的这些差异表达的蛋白质涉及细胞的增殖、细胞凋亡的信号转导调节、正常细胞的恶性转化及发育调控以及肿瘤的发生、发展和耐药性形成。     

两种区带电泳结果比较

在电泳技术中以区带电泳的应用最为广泛,因所用支持体种类不同而得以不同的命名。笔者用醋酸纤维膜和琼脂糖两种物质作载体,对40例健康人做蛋白电泳分析,蛋白区带有所差异,故加以比较、分析。     

血液中分离出234株细菌分析

从1985～1990年,我们对发烧病人共进行了1140人份血培养,并检出234株细菌病例均系我院门诊和住院的发烧待查患者。用常规方法分离并鉴定,采用纸片法(上海医化所的产品)做药敏试验,抑菌圈>15mm为敏感株。1140份标本中,分离出234株细菌阳性率为20.50％。革兰氏阳性球菌157株,革兰氏阴性球菌2株,革兰氏阴性杆菌71株。另有白色念珠菌3株,其中金黄色葡萄球菌占总菌株数中23.5％,表皮葡萄球菌21.37％,草绿链6.41,四球联菌8.55％、余有腐生葡萄球菌、肺炎双球菌、肠球菌非肠球菌、D链、腾黄球菌:G阴性杆菌中以大肠埃希氏兰菌为主(占12.82％),     

全自动尿沉渣分析仪检测尿液细胞干扰因素的探讨

在质量意识不断提高的今天，各项检验的标准化是保证质量的前提，传统的尿液检查按照标准化要求操作，约10min完成一个标本的检测，这与医院目前的工作量是不匹配的。全自动尿沉渣分析仪，应用流式细胞术分析尿液有形成分，它具有高效快速筛查、检测精度重复性好的优势，并且能定量提供各种成分的含量，对临床的诊断、疗效观察具有很大的价值。但在使用过程中，我们发现有许多因素会干扰尿液有形成分的检测，现就对RBC中的干扰因素做如下报道。     

新靶点CDK2干扰RNA对人脑胶质瘤增殖影响

目的构建4个新靶点的人细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)干扰RNA真核表达载体,转染人脑胶质瘤细胞后,检测出干扰效果最好的载体及细胞增殖能力的变化。方法构建4个新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体并用双酶切和测序鉴定;分别转染上述4个载体到人脑胶质瘤细胞株SHG44;通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)比较转染后CDK2 mRNA的表达量,选出干扰效果最好的一个,检测细胞增殖能力的变化。结果成功构建4个新靶点的CDK2干扰RNA真核表达载体P^CDK2-1、P^CDK2-2、P^CDK2-3、P^CDK2-4;CDK2 mRNA表达和细胞增殖明显受到抑制,P^CDK2-1的干扰效果为56%; P^CDK2-1-SHG44细胞与对照组相比增殖能力减弱。结论成功构建并筛选出效果最好的新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体,并使SHG44细胞的增殖水平降低。