大鼠肝微粒体CYP3A1/2和CYP2C9/10参与甘草次酸羟化代谢

目的:对参与18α-甘草次酸(GA)羟化代谢的细胞色素P450(cytochromeP450,CYP)亚型进行研究。方法:采用大鼠肝微粒体体外代谢GA的孵育方法和高效液相色谱(HPLC)技术,通过分析甘草次酸在肝微粒体中形成的单羟化代谢物的酶促动力学,分析其酶学模型,然后用不同的CYP同工酶选择性抑制剂和底物进行抑制实验,初步选出介导甘草次酸单羟化代谢所涉及的CYP同工酶。结果:大鼠肝微粒体羟化代谢GA呈反应时间(10～40min),底物浓度(25～200μmol/L)和蛋白浓度(0.25～1.0g/L)依赖性。GA代谢为22α-羟-GA和24-羟-GA的Vmax分别为(7.9±1.4)μmol.min-1.g-1和(3.4±1.0)μmo1.min-1.g-1,Km分别为(33±9)μmol/L和(68±18)μmol/L。抑制性研究可见:TAO和Ery剂量依赖性抑制22α-羟-GA形成,最大抑制率分别为82.4%和45.7%,而Sul无显著抑制作用;Sul剂量依赖性抑制24-羟-GA形成,抑制率依次为26.8%、45.3%和69.5%,而TAO和Ery的抑制作用不显著。红霉素N-脱甲基酶活性与22α-羟化代谢速率高度相关(r=0.864,P<0.01,n=10),与24-羟化代谢速率无明显相关(r=0.310,P>0.05,n=10)。结论:大鼠肝微粒体CYP3A1/2和CYP2C9/10分别参与了GA的C-22α和C-24羟化代谢。     

生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则浅析

《中国药典》2020年版三部“生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则”（通则9401）是国内首个适用于生物制品生物活性/效价测定方法验证的指导原则,弥补了国内缺少针对生物活性方法验证指导原则的空白。为正确理解和执行该指导原则,推动国内生物活性/效价测定方法验证工作的规范化,本文从该指导原则的新增背景、起草过程、国内外药典比较和主要内容解读等几方面进行了阐述,并就未来该通则内容的完善进行了初步展望,旨在为广大从业人员提供指导性建议及参考。