一种特殊虫草与冬虫夏草的表型和DNA条形码特征比较分析及鉴别方法研究

目的：通过对子座和虫体部分进行表型与DNA条形码序列分析,探讨一种发现于四川的特殊冬虫夏草（以下简称特殊虫草）与常见冬虫夏草的区别。方法：体视显微镜观察虫草样品的外部特征;聚合酶链式反应（PCR）扩增得到真菌部位内转录间隔区（ITS）序列和宿主蝙蝠蛾昆虫的细胞色素氧化酶Ⅰ（COⅠ）序列;利用CodonCode Aligner和MEGA软件进行序列分析,建立邻接（NJ）系统进化树;对ITS序列进行限制性内切酶图谱分析,寻找具有鉴别意义的酶切位点,并通过PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）鉴别进行验证。结果：特殊虫草与常见冬虫夏草相比,虫体头部的颜色明显不同;子座真菌的ITS序列存在7个差异位点,虫体COⅠ序列存在56个差异位点,基于ITS序列及COⅠ序列的NJ系统进化树分析均显示,两者不能聚为一支;在两者差异区域,冬虫夏草存在1个XhoⅠ的酶切位点,因此其ITS序列的PCR产物可被限制性内切酶XhoⅠ切割为2个片段,特殊虫草不能被XhoⅠ切割,所以酶切前后的PCR产物在琼脂糖凝胶图上没有变化,通过该方法可对两者进行鉴别。结论：发现了一种特殊虫草,其与常见冬虫夏草的真菌子座和宿主蝙蝠蛾...     

基于PCR的麦冬鉴别方法研究

目的：建立中药材麦冬的PCR检测方法。方法：对麦冬及其混伪品的ITS序列进行比对分析,在ITS 1区设计了麦冬的特异性引物,并通过对PCR反应条件的优化,建立麦冬的PCR鉴别方法。结果：建立了麦冬真伪鉴别的PCR检测方法,并利用该方法对收集的样品进行检测,实现了麦冬与混伪品的准确鉴别。结论：该方法操作简单、特异性强、重复性好,检测结果客观易判读。     

市售三七粉中三七的DNA检测方法研究

目的 建立基于PCR的三七真伪检测方法,并对三七粉进行检测。方法 对三七及其伪品的序列进行比对分析,在ITS区设计多组三七的特异性引物,对引物进行筛选,并对PCR反应条件进行优化,建立了三七的DNA检测方法。结果 建立了三七的DNA检测方法,并利用该方法对市场购买的三七粉进行检测,均能检测出三七药材成分。结论 该方法操作简单、特异性强、重复性好。     

基于PCR的冬虫夏草检测方法研究

目的:建立基于PCR的冬虫夏草真伪检测方法。方法:对冬虫夏草及其伪品的序列进行比对分析,在ITS区设计了冬虫夏草的特异性引物,并通过对PCR反应条件的优化,建立了冬虫夏草与常见伪品的PCR检测方法。结果:建立了冬虫夏草真伪鉴别的PCR检测方法,并利用该方法对采集的虫草样品进行检测,实现了冬虫夏草与伪品的准确鉴别。结论:该方法操作简单、特异性强、重复性好。     

冬虫夏草的分子鉴定方法

目的 建立专属性强的冬虫夏草分子鉴定方法.方法 通过在ITS1区设计冬虫夏草的特异性引物,并进行不同条件的优化试验,建立冬虫夏草的酶联免疫吸附法(PCR)鉴别体系.结果 建立的酶联免疫吸附法(PCR)体系对冬虫夏草有164bp条带的扩增,而伪品无扩增现象.结论 所建立的PCR体系能够准确、快速的鉴别冬虫夏草及其伪品.