肌腱组织工程研究新进展

组织工程化肌腱原理是将分离的高浓度有活力的肌腱种子细胞种植于生物相容性好，可生物降解的细胞载体中，体外培养后植到缺损部位，形成新的、自身的，具有功能的肌腱组织，最终达到生物学意义上的完全修复。现就肌腱组织工程中肌腱细胞的特征、种子细胞来源、支架材料的制备、临床应用和面临的问题和展望等做一综述。     

2型糖尿病大鼠发病过程中相关指标与肝细胞膜流动性变化的研究

目的探讨2型糖尿病与长期高脂对脂类代谢的影响程度，讨论高脂对肝细胞膜流动性的影响，以揭示2型糖尿病中脂类代谢紊乱的机制。方法正常大鼠饲养、制造高脂10天大鼠模型、高脂20天大鼠模型、四氧嘧啶2型糖尿病大鼠模型，测定4组大鼠肝组织甘油三酯、总胆固醇含量、丙二醛（MDA）含量及肝细胞膜流动性。结果模型组与高脂10天组相比，肝组织MDA含量显著升高，肝细胞膜流动性显著降低，其甘油三酯及总胆固醇含量略低于高脂10天组及高脂20天组，但较正常组有一定程度的升高；高脂10天组与正常组相比，肝组织甘油三酯、总胆固醇的含量、MDA含量，均有显著升高，肝细胞膜流动性显著降低；高脂10天组与高脂20天组相比，肝组织甘油三酯的含量、MDA含量，以及肝细胞膜流动性变化均不显著，只有总胆固醇含量有显著下降。结论肝组织MDA含量、甘油三酯、总胆固醇含量及肝细胞膜流动性的变化与2型糖尿病的发病过程有密切关系，且肝组织MDA含量对肝细胞膜流动性影响较大，与其变化情况密切相关。     

人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒的构建及鉴定

背景：生长分化因子5是一种刺激肌腱、韧带塑型，增强愈合反应有效的生长因子，在活性组织工程肌腱构建中有重要作用。 目的：构建人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒，为转染基质干细胞向肌腱诱导分化实验奠定基础。 设计、时间及地点：细胞基因工程体外实验，于2007-08/12在哈尔滨医科大学遗传学教研室和分子生物学教研室完成。 材料：根据Genbank（NM000557）中人生长分化因子5的序列化学合成一对引物,从人胎儿软骨组织提取总RNA。 方法：通过反转录-聚合酶链反应得到人生长分化因子5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pcDNA6.2并转化入JM109菌株，提取重组质粒，PCR鉴定、酶切鉴定并测序。 主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测结果，PCR及SalⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定结果,重组质粒测序与Genbank中序列比较结果。 结果：电泳显示，反转录-聚合酶链反应产物为一长约380 bp的带，阳性克隆质粒经PCR电泳及双酶切均出现约380 bp的片段。测序表明与Genbank中的序列完全相符。 结论：成功构建出人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒，为组织工程化肌腱过程中种子细胞的制备提供转染质粒。     

人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒的构建及鉴定

背景：生长分化因子5是一种刺激肌腱、韧带塑型，增强愈合反应有效的生长因子，在活性组织工程肌腱构建中有重要作用。目的：构建人重组pcDNA6．2／生长分化因子5质粒，为转染基质干细胞向肌腱诱导分化实验奠定基础。设计、时间及地点：细胞基因工程体外实验，于2007-08／12在哈尔滨医科大学遗传学教研室和分子生物学教研室完成。材料：根据Genbank（NM000557）中人生长分化因子5的序列化学合成一对引物，从人胎儿软骨组织提取总RNA。方法：通过反转录聚合酶链反应得到人生长分化因子5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pcDNA6-2并转化入JM109菌株，提取重组质粒，PCR鉴定、酶切鉴定并测序。主要观察指标：反转录聚合酶链反应检测结果，PCR及Sal I和BamH I双酶切鉴定结果，重组质粒测序与Genbank中序列比较结果。结果：电泳显示，反转录-聚合酶链反应产物为一长约380bp的带，阳性克隆质粒经PCR电泳及双酶切均出现约380bp的片段。测序表明与Genbank中的序列完全相符。结论：成功构建出人重组DcDNA6．2／生长分化因子5质粒，为组织工程化肌腱过程中种子细胞的制备提供转染质粒。     

硬脑膜外血肿50例临床诊治

目的：分享硬脑膜外血肿的诊断与治疗经验。方法：回顾分析2011年1月50例硬脑膜外血肿患者的临床资料。结果：治愈31例,意识障碍消失,失语和语言不清者好转,意识清楚,肌力好转;病情加重7例,经二次手术后好转;死亡12例,包括院前抢救5例。结论：硬脑膜外血肿是临床急症,及时诊断,有效治疗,才能挽救生命,减少致残。     

全髋关节置换术后脱位的研究进展

脱位是全髋关节置换术（THA）后常见的并发症,仅次于无菌性松动,它是引起翻修术、全髋关节置换失败的第二大原因[1].一旦发生,可能需要延长住院时间、康复时间.本文就全髋关节置换术后脱位的危险因素及治疗作一综述.     

骨形态发生蛋白诱导成骨增加人工关节稳定性的相关研究

人工关节置换已成为骨科常规治疗手段,旨在增强人工关节稳定性的研究已广泛开展,骨形态发生蛋白是其中惟一能够单独诱导间充质细胞向骨组织方向分化的生长因子,是骨组织形成过程中最关键的调节因子,通过骨形态发生蛋白诱导增加界面成骨量成为加强人工关节稳定性的重要思路,己有一些应用人重组骨形态发生蛋白与不同载体结合用于金属置入体周围进行界面骨整合的研究,也取得了良好的效果。     

稳定转染增强型绿色荧光蛋白大鼠骨髓间充质干细胞系的建立

背景：利用间充质干细胞或含有治疗因子的干细胞进行有选择性的杀伤肿瘤细胞是一种有前途的治疗方法。 目的：建立含稳定转染增强型绿色荧光蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞系。 方法：通过脂质体介导慢病毒质粒pVector-EGFP、pHelper、Envelope 共转染293T细胞完成载体病毒构建,以实时荧光定量PCR检测慢病毒滴度;取对数生长期的SD大鼠骨髓间充质干细胞,以复感染指数MOI值0,5,10,15,20加入携带报告基因增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体稀释液,72 h后观察各组增强型绿色荧光蛋白的表达效率及阳性转染率。 结果与结论：携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体系统转染293T细胞能够正确表达,滴度为1×10⁸ TU/mL。包装好的病毒颗粒转染大鼠骨髓间充质干细胞二三天后,各孔均有增强型绿色荧光蛋白的表达。MOI值从0增至10,细胞的阳性表达率逐渐提高(P < 0.05),MOI值为10的组能获得>70%的转染率,但MOI值从10增至20,转染率变化不明显。说明以MOI值为10的滴度将慢病毒载体可将外源基因高效转入大鼠骨髓间充质干细胞内,建立含稳定转染增强型绿色荧光蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞系。     

稳定转染增强型绿色荧光蛋白大鼠骨髓间充质干细胞系的建立

背景：利用间充质干细胞或含有治疗因子的干细胞进行有选择性的杀伤肿瘤细胞是一种有前途的治疗方法。目的：建立含稳定转染增强型绿色荧光蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞系。方法：通过脂质体介导慢病毒质粒pVector-EGFP、pHelper、Envelope共转染293T细胞完成载体病毒构建,以实时荧光定量PCR检测慢病毒滴度;取对数生长期的SD大鼠骨髓间充质干细胞,以复感染指数MOI值0,5,10,15,20加入携带报告基因增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体稀释液,72h后观察各组增强型绿色荧光蛋白的表达效率及阳性转染率。结果与结论：携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体系统转染293T细胞能够正确表达,滴度为1×108TU/mL。包装好的病毒颗粒转染大鼠骨髓间充质干细胞二三天后,各孔均有增强型绿色荧光蛋白的表达。MOI值从0增至10,细胞的阳性表达率逐渐提高（P〈0.05）,MOI值为10的组能获得〉70%的转染率,但MOI值从10增至20,转染率变化不明显。说明以MOI值为10的滴度将慢病毒载体可将外源基因高效转入大鼠骨髓间充质干细胞内,建立含稳定转染增强型绿色荧光蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞系。     

骨髓基质干细胞与肌腱修复

骨髓基质干细胞在肌腱修复中的应用越来越受到重视.肌腱细胞是肌腱基本功能单位,经多次传代后甚至可能丧失进入增殖期的能力,寻求种子细胞是组织工程化肌腱构建的关键所在.骨髓基质干细胞向类肌腱细胞分化的关键因素是目前的主要研究方向,其中生长因子和力学刺激尤为重要.骨形态发生蛋白家族中的几种生长因子具有诱导肌腱和韧带形成的作用,保持新生肌腱形成过程中的正常力学刺激对新生肌腱的"塑形"可能是至关重要的.