高压静电场对发育小鼠生理及生化指标的影响

目的:探讨不同强度高压静电场(HVEF)对动物机体生理功能的影响。方法:昆明种小鼠150只,随机分为 5组（每组30只）,分别设非静电场处理组（CK）、HVEF0.6、1.2、1.8和2.4 kV·cm^-1处理组,测定不同强度HVEF下饲养的小鼠在发育过程中多种生理生化指标的变化。结果:一定强度HVEF具有促进小鼠生长的作用,其阈值为 0.6 kV·cm^-1。在这个电场强度处理下,小鼠体重明显增加;心肌细胞和肝细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性升高;脂质过氧化物(LPO)的含量下降,与CK组比较差异有显著性（P<0.01）;心脏和肝脏多种生化酶指标均正常。结论：HVEF对小鼠发育的促进作用不是对某一代谢机制的单独作用,而是整体机能协同作用 的结果,适宜的HVEF对多种疾病的康复是有益的。     

重组灵芝免疫调节蛋白抑制HL60细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的:探讨重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)对HL60细胞抑制作用及诱导凋亡的研究。方法:采用MTT法检测rLZ-8对HL60细胞的体外杀伤作用;通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡率;应用钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色,检测rLZ-8作用HL60细胞后细胞内钙离子浓度变化;分光光度法测定细胞caspase-3活性。结果:rLZ-8可明显抑制HL60细胞增殖,随着rLZ-8浓度增加,细胞凋亡率也增加;激光共聚焦检测细胞内钙离子水平明显升高,并且细胞内caspase-3活性增高。结论:rLZ-8可诱导HL60细胞发生凋亡,细胞内钙超载及caspase-3活性增高可能是rLZ-8诱导HL60细胞凋亡的途径之一。     

灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)诱导K562细胞发生细胞核介导的细胞凋亡的研究

目的:探讨重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)诱导K562细胞发生细胞凋亡相关机制的研究。方法:采用MTT法检测rLZ-8对K562细胞的体外杀伤作用;通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡率;应用钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色,检测了rLZ-8作用K562细胞后细胞内钙离子浓度变化,分光光度法测定细胞caspase-3活性,还利用激光扫描共聚焦显微镜确定了rLZ-8在K562细胞内的亚细胞定位。结果:rLZ-8可明显杀伤K562细胞,并诱导其发生细胞凋亡;rLZ-8可提高K562细胞内的caspase-3活性,进一步确证了细胞凋亡的发生;激光扫描共聚焦显微镜下观察,rLZ-8可定位在细胞核中,并引起细胞内钙离子水平升高。结论:rLZ-8具有诱导K562细胞发生凋亡的作用,这种杀伤肿瘤细胞的作用可能与rLZ-8可富集在细胞核上的特性有关。     

三七总黄酮对病毒性心肌炎模型治疗作用的药效学研究

目的评价三七总黄酮对柯萨奇B3病毒感染体外、体内模型的治疗作用。方法采用柯萨奇B3型病毒感染原代培养Wistar乳鼠心肌细胞方法,建立体外病毒感染模型;Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇B3型病毒感染建立病毒性心肌炎体内实验动物模型。结果三七总黄酮能明显抑制体外培养心肌细胞病变;治疗组小鼠生存率明显增加,心肌酶释放活性明显降低;小鼠干扰素水平上升,病毒滴度降低;炎性浸润作用明显减轻。结论三七总黄酮对柯萨奇B3病毒所致小鼠病毒性心肌炎具有一定治疗作用。     

重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体,为rLZ-8的药效学及药代动力学研究奠定基础.方法:以纯度99%的rLZ-8免疫BALB/c小鼠;应用常规的细胞融合技术建立一种能够稳定分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用小鼠腹腔接种法制备腹水;Protein A Sepharose 亲和层析柱在AKTA纯化仪上对抗体进行纯化;间接ELISA方法测定单克隆抗体的效价;Western blot胶片曝光方法对rLZ-8单克隆抗体特异性进行分析.结果:筛选出2株可特异性分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株.分别命名为clone13-2-3和clone11-4-4.其抗体亚型分别为IgG1亚型和IgG2a亚型.腹水抗体效价分别为1:12 000和1:7 500,细胞培养上清效价分别为1:3 000和1:2 800.Western blot检测证明这两株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体均具有良好的特异性.结论:成功制备出较高效价和较高特异性的鼠抗rLZ-8的单克隆抗体.