宽叶缬草SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

目的 建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性（SRAP）-聚合酶链式反应（PCR）反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法 采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg²⁺浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果 单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11 μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg²⁺可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg²⁺加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11 μL,模板DNA 30 ng,Mg²⁺ 0.025 mmol·L^-1,Taq DNA 1.5 U,正向引物与反向引物各5 μmol·L^-1,用双蒸水补足体系至 20 μL。最优退火温度为36.8 ℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论 建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。     

The analgesic effect of Valerianae radix et rhizoma water extraction with spectrum-effect relationship北大核心CSCD

疼痛是机体组织潜在或实际受损后所产生的不愉快的感觉,属于人体预警机制,而长期疼痛和过度伤害性刺激会造成机体生理功能紊乱,影响人们的正常生活,降低生活质量[1]。宽叶缬草(Valerian radix et rhizoma,VRR)为败酱科缬草属植物宽叶缬草Valetiana officinalis L.var.latifolia Miq.的干燥根及根茎,其性辛、苦、温,主治脘腹胀痛、风湿痹痛、腰膝酸软、失眠[2-4],民间治疗疼痛及失眠多以水煎入药主,故将宽叶缬草水提物作为研究对象。