基于2020年版《中华人民共和国药典》相关蛋白检测方法并联合质谱分析人干扰素α2b相关蛋白的一级结构

目的:用人干扰素α2b相关蛋白检测方法联合质谱对人干扰素α2b相关蛋白进行一级结构分析,确认不同保留时间的相关蛋白。方法:液相色谱条件为Agilent ZORBAX C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 300?,5μm);流动相A为30%乙腈水溶液(含0.2%三氟乙酸),流动相B为80%乙腈水溶液(含0.2%三氟乙酸),流速为0.5 mL·min^-1,柱温为室温。质谱条件为电喷雾正离子模式,采用MS模式进行扫描,毛细管电压为2 500 V,Cone电压为40 V,去溶剂气体温度为350℃,源温为120℃,去溶剂气体流速为800 L·h^-1,扫描范围为m/z 400～4 000,碰撞电压为40 V,MS采集时间为20～60 min。结果:相关蛋白的相对分子质量均与理论相对分子质量一致,3号峰为主峰,相对分子质量为19 264.81和19 395.93,为人干扰素α2b和N-末端甲硫氨酸化人干扰素α2b; 1号峰相对分子质量为19 280.72,为氧化人干扰素α2b, 2号峰相对分子质量为19 412.25,为(氧化...