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拓扑异构酶(topoisomerase,topo)是参与DNA拓扑结构调整和转录、复制、修复的重要工具酶,由活性Tyr残基向DNA发动亲核攻击,导致DNA单股或双股断裂.Topo蛋白的含量、活性、功能改变是卵巢癌耐药发生的重要机制之一,作用于相关信号传导通路的上游.TopoⅡ蛋白表达增加的卵巢癌患者预后较差.TopoⅠ、Ⅱ抑制剂如TPT、VP-16等在复发卵巢癌的有效率大致为13%~25%,现已成为二线用药的首选. 相似文献
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p53突变型胃癌细胞株细胞凋亡及基因调控机制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究顺铂作用于p53野生型AGS、p53突变型MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株后,引起细胞凋亡及p53下游基因表达的变化,探讨其发生机制。方法采用流式细胞技术(FCM)检测不同浓度顺铂(0、1、2μg/mL)作用24h后AGS、MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株,细胞周期和凋亡率的变化;RT-PCR法检测上述不同浓度顺铂分别作用于3种胃癌细胞株,p53下游基因p21、bax、puma、bcl-2、bcl-xl表达的变化。结果FCM显示,顺铂可引起3种细胞细胞周期发生改变:S+G2期比例均明显升高,同时3种细胞的凋亡率均明显增多(P<0.01);RT-PCR结果显示,AGS细胞的p53、bax、p21表达均随顺铂剂量的增加而增加(P<0.05),puma变化不明显(P>0.05);bcl-2、bcl-xl的表达随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05)。MGC-803、SGC-7901细胞的bcl-2、bcl-xl表达均随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05),而bax、p21、puma的表达变化不明显。结论在p53突变细胞株中,DNA损伤可诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,凋亡调控因子的表达也发生改变。其机制可能与p53突变的具体位点有关,亦可能与p53非依赖性途径的信号传递有关。 相似文献
3.
目的 构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法 沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列.结果 纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的 条带(260 bp左右)大小,插人的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论 成功构建了针对人AFP基因的miRRA表达质粒. 相似文献
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拓扑异构酶与卵巢恶性肿瘤耐药关系的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
拓扑异构酶(topoisomerase,topo)是参与DNA拓扑结构调整和转录、复制、修复的重要工具酶,由活性即残基向DNA发动亲核攻击,导致DNA单股或双股断裂。Topo蛋白的含量、活性、功能改变是卵巢癌耐药发生的重要机制之一,作用于相关信号传导通路的上游。Topo II蛋白表达增加的卵巢癌患者预后较差。TopoI、II抑制剂如TPT、VP-16等在复发卵巢癌的有效率大致为13%-25%,现已成为二线用药的首选。 相似文献
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氧化苦参碱诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用的实验研究 总被引:14,自引:2,他引:14
目的 探讨氧化苦参碱对卵巢癌细胞SKOV3诱导凋亡作用。方法 采用MTT法、DNA凝胶电泳、生长曲线、荧光染色等实验技术研究氧化苦参碱在体外对SKOV3细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。结果 氧化苦参碱对SKOV3细胞生长有明显的抑制作用 ,且这种抑制作用呈浓度依赖性。细胞经 0 189mmol·L-1和 0 3 78mmol·L-1的氧化苦参碱作用 48h后 ,即呈现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带。结论 氧化苦参碱在一定浓度下能诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡 相似文献
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背景:研究发现,Lewis血型抗原与多种恶性肿瘤关系密切,岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase ,FUTs)是参与合成Lewis抗原的关键酶,FUT3是其中之一。
目的:设计并构建靶向FUT3基因的miRNA干扰质粒,为探索肿瘤基因治疗新途径奠定基础。
设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-05/10在济南市中心医院医学实验诊断中心完成。
材料:BLOCK-iT TM Pol II miR RNAi Expression Vector Kits (含荧光基因 GFP) 、T4 DNA连接酶购自invitrogen公司;大肠杆菌菌株One Shot TOP10购自invitrogen公司。
方法:根据GenBank中FUT3的序列,应用www.invitrogen.com网站的设计软件设计、合成针对FUT3 miRNA的相应Oligo DNA,退火后与BLOCK-iT TM Pol II miR RNAi Expression Vector相连接,转化感受态 E.coli TOP10 。
主要观察指标:①重组质粒DNA序列分析。②质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳检测。③紫外分光光度计检测。④聚合酶链反应鉴定。
结果:经测序鉴定和聚合酶链反应鉴定证实成功构建针对人FUT3基因的miRNA干扰质粒 pcDNATM6.2-GW/EmGFP- FUT3-miR;质粒DNA的琼脂凝胶电泳检测和紫外分光光度计分析结果确认所提质粒纯度较高,可以用于后续试验。
结论:FUT3 靶向miRNA表达载体构建成功。 相似文献
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目的 探讨Y染色体微缺失与无精子症、少精子症的关系.方法 应用多重聚合酶链反应技术(PCR)对127例无精子症(80例)和严重少精子症(47例)的不育患者及60例正常生育男性进行Y染色体AZF基因、DAZ外显子检测.结果 无精子和严重少精子患者Y染色体微缺失7例,缺失率5.51%.其中AZFc缺失2例,DAZ外显子缺失5例.少精子症组缺失率8.51%,无精子症组缺失率3.75%,小睾丸组的缺失率6.54%,正常睾丸组缺失率4.94%,正常生育男性AZF基因和DAZ外显子均未检测到缺失.结论 (1)AZF因子、DAZ外显子微缺失可导致无精子症、严重少精子症:(2)绝大部分无精子、严重少精子患者Y染色体AZF因子、DAZ外显子并没有微缺失,有必要再去寻找新的精子发生基因. 相似文献
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分析了MC—CDMA系统采用多用户检测器的性能,多用户检测器采用解相关—并行干扰抵消体制。在同样的慢瑞利衰落多径信道条件下,与Hara提出的单用户检测体制进行比较,同时分析了上行和下行信道的情况。仿真结果显示在无信道估计错误时,在下行信道,单用户MMSEC检测性能较好,但在上行信道多用户检测器的性能远远好于单用户检测器。文中迈进一步仿真分析了信道估计错误对检测器的影响,发现对于较大的信道估计错误,多用户检测器比单用户检测器更敏感。结论是MMSEC只适用于下行MC—CDMA系统,而多用户检测器是上行MC—CDMA系统信道估计错误很小时的极佳方案。 相似文献
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人子宫内膜碎屑注入小鼠腹腔后种植情况的连续观察 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 :连续观察人子宫内膜碎屑注入小白鼠腹腔后的种植情况。方法 :将4 0只雌性小白鼠随机分为两组 ,实验组给予过量雌激素支持。腹腔内注射子宫内膜碎屑 ,每日随机取 2组小白鼠各 1只处死 ,观察内膜植入情况。结果 :第 3天起有明确的植入 ,第 2 0天时仍可见植入的子宫内膜 ,总植入率为 87.5 % (35 / 4 0 ) ,2组差异无显著性。镜检发现植入内膜进行性退化 ,过量雌激素对其演变无明显影响。结论 :(1)小白鼠是EMs发生极早期机理研究的理想动物模型 ;(2 )移植子宫内膜极易与腹膜粘附、植入 ,因而 ,不可能是EMs发生的限制性因素 ;(3)过量激素对植入子宫内膜的退化无逆转作用 ,提示卵巢激素对异位内膜最初的演变方向无显著影响。 相似文献