蛛网膜下腔注射甲氨蝶呤对大鼠胫骨癌痛的影响

目的 评价蛛网膜下腔注射甲氨蝶呤对大鼠胫骨癌痛的影响.方法 雌性未交配SD大鼠48只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=8):假手术+人工脑脊液组(SA组)、假手术+甲氨蝶呤200μg组(SM200组)、骨癌痛+人工脑脊液组(CA组)和骨癌痛+不同剂量甲氨蝶呤组(CM1～3组).CA组和CM1～3组采用胫骨骨髓腔内注射Walker-256乳腺癌细胞制备胫骨癌痛模型,于注射Walker-256乳腺癌细胞后第7天经L5.6蛛网膜下腔分别注射人工脑脊液、甲氨蝶呤50、100和200 μg; SA组和SM200组骨髓腔内注射等体积生理盐水,于相同时点经L5.6蛛网膜下腔分别注射人工脑脊液和甲氨蝶呤200 μg.于注射Walker-256乳腺癌细胞或生理盐水前l d(基础值)、注射Walker-256乳腺癌细胞或生理盐水后第7天(T0)、给药后2、4、8h及1、2、3、5、7 d(Tl～8)时测定大鼠缩足反应阈值(MWT).结果 与基础值比较,CA组和CM1～3组各时点MWT下降(P＜0.05);与T0时比较,CA组T5～8时MWT下降,CM1组T3-5时MWT升高,CM2组T2～6时MWT升高,CM3组T2～7时MWT升高(P＜0.05);与SA组比较,CA组和CM1～3组MWT下降(P＜0.05);与CA组比较,CM1组T4～7时MWT升高,CM2组和CM3组T3-7时MWT升高(P＜0.05).结论 蛛网膜下腔注射甲氨蝶呤可减轻大鼠胫骨癌痛,其效应与甲氨蝶呤剂量有关.     

大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及意义

目的探讨大麻素受体2（CB2）在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及其在癌痛产生和维持中的作用。方法 雌性SD大鼠42只,体重160～180g,随机分为5组：对照组（C组）、假手术组（S组）、骨癌痛组（BCP组）、DMSO（二甲基亚砜）组（D组）和CB2选择性拮抗剂AM630组（A组）。采用右侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μlWalker256（4×105）乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛模型,于接种后第7d从S组和BCP组分别随机选取6只,同C组的大鼠一起处死取脊髓,采用免疫印迹技术观察脊髓CB2的表达,在接种后的第1、2及第3天按照分组D组和A组分别鞘内注射DMSO0.15μl和溶于1%DMSO的AM63015μg。分别于注射肿瘤前1d、注射后的第1、3、5、7、14、21d（T0～6）测定机械痛阈和热痛阈。结果免疫印迹显示C组大鼠脊髓基本没有CB2的表达,与C组及S组相比,BCP组接种后第7d脊髓CB2表达水平升高。鞘内注射AM630癌细胞后大鼠接种后肢提前出现机械痛觉过敏现象。结论脊髓CB2参与大鼠胫骨癌痛的产生和维持。     

中医定向透药疗法联合运动疗法治疗创伤后膝关节功能障碍30例

目的:探讨中医定向透药疗法联合运动疗法治疗创伤后膝关节功能障碍的临床效果.方法:选择2019年11月至2020年9月萍乡市人民医院收治的创伤后膝关节功能障碍患者60例,按随机对照原则分为两组,各30例.对照组采用中医定向透药疗法治疗,观察组采用中医定向透药联合运动疗法治疗.比较两组患者临床疗效,治疗前、治疗3个疗程后膝...     

加巴喷丁减轻骨癌痛大鼠的机械痛敏

目的 观察不同剂量加巴喷丁对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的影响.方法 雌性SD大鼠42只,随机分为7组(n=6),即空白对照组(N组)、假手术+生理盐水组(SN组)、假手术+加巴喷丁200 mg ·kg-1·d-1组(SG200组)、骨癌痛+生理盐水组(BN组)、骨癌痛+加巴喷丁50mg·kg-1·d-1组(BG50组)、骨癌痛+加巴喷丁100mg·kg-1·d-1组(BG100组)和骨癌痛+加巴喷丁200mg· kg-1·d-1组(BG200组).从术后第7天起,在保持正常饮水量的前提下,SG200组、BG50组、BG100组和BG200组每天分别按体重将加巴喷丁200mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg溶于5 ml生理盐水中饲喂,N组、SN 组和BN组仅给予同等量的生理盐水.分别在术前、术后1,3,5,7d和8,10,12,14d(分别对应为给药后1,3,5,7d)测定右后肢机械缩足阈值(MWT)和自由行走痛行为评分.结果 术后第7天,骨癌痛大鼠MWT [ (3.78 ±0.38)g]和自由行走痛评分[(0.76 ±0.44)分]与空白对照组[(14.50 ±1.38)g,(0.00±0.00)分]和假手术组[(10.21±0.88)g,(0.00±0.00)分]比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).在连续应用加巴喷丁的1周中,SN组和SG200组大鼠行为学的差异无统计学意义(P＞0.05); BG50组与BN组比较,MWT无明显差异(P＞0.05),自由行走痛行为评分相对降低,差异有统计学意义(P＜0.05);术后第10天,BG100组[(5.35±0.85)g]和BG200组[(5.71±0.72)g]与BN组[(2.61±0.40)g]和BG50组[(3.28±1.15)g]比较,MWT明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);直到术后14d,差异仍有统计学意义(P＜0.05);从术后第8天起,BG100组和BG200组自由行走痛行为评分较BN组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 中到大剂量的加巴喷丁可以缓解骨癌痛大鼠的疼痛症状,但是随着肿瘤骨破坏的加重,加巴喷丁的止痛作用也随之降低.     

脊髓趋化因子配体21在大鼠胫骨癌痛中的作用

目的 探讨脊髓趋化因子配体21(CCL21)在大鼠胫骨癌痛中的作用.方法 健康成年雌性SD大鼠48只,体重160～ 180 g,10～ 11周龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为6组(n=8):假手术组(Ⅰ组)、假手术+ CCL21中和抗体组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+溶媒PBS组(Ⅳ组)、骨癌痛+对照IgG组(Ⅴ组)和骨癌痛+CCI21中和抗体组(Ⅵ组).采用胫骨骨髓腔内注射Walker-256乳腺癌细胞方法制备胫骨癌痛模型.注射Walker-256乳腺癌细胞后14 d,Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组分别经L5,6鞘内注射PBS 15μl、亲和纯化的正常羊IgG 10 μg( 15 μl)和CCL21中和抗体10μg(15μl);Ⅱ组鞘内注射CCL21中和抗体10 μg.于注射Walker-256乳腺癌细胞或生理盐水前1 d(基础状态)、注射后7、14 d及鞘内给药后0.5、1、2、4、8、12、24、48 h(T1～10)时测定机械刺激缩足反应阈值(MWT).结果 与基础值比较,Ⅲ组～Ⅵ组各时点MWT降低(P＜0.05),Ⅰ组和Ⅱ组各时点MWT差异无统计学意义(P＞0.05).与T2时比较,Ⅵ组T5～8时MWT升高(P＜0.05).与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组～Ⅵ组MWT降低(P＜0.05);与Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组比较,Ⅵ组T5～8时MWT升高(P＜0.05).结论 脊髓CCL21参与了大鼠胫骨癌痛的维持.     

大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及意义

目的 探讨大麻素受体2(CB2)在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及其在癌痛产生和维持中的作用.方法 雌性SD大鼠42只,体重160～180g,随机分为5组:对照组(C组)、假手术组(S组)、骨癌痛组(BCP组)、DMSO(二甲基亚砜)组(D组)和CB2选择性拮抗剂AM630组(A组).采用右侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker256(4x10<'5>)乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛模型,于接种后第7d从S组和BCP组分别随机选取6只,同C组的大鼠一起处死取脊髓,采用免疫印迹技术观察脊髓CB2的表达,在接种后的第1、2及第3天按照分组D组和A组分别鞘内注射DMSO 0.15μl和溶于1%DMSO的AM630 15μg.分别于注射肿瘤前1d、注射后的第1、3、5、7、14、21d(T<,0-6>)测定机械痛阈和热痛阈.结果 免疫印迹显示C组大鼠脊髓基本没有CB2的表达,与C组及S组相比,BCP组接种后第7d脊髓CB2表达水平升高.鞘内注射AM630癌细胞后大鼠接种后肢提前出现机械痛觉过敏现象.结论 脊髓CB2参与大鼠胫骨癌痛的产生和维持.     

趋化因子配体2中和抗体对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响

目的 探讨鞘内注射趋化因子配体2(CCL2)中和抗体对胫骨癌痛大鼠机械痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响.方法 采用Walker 256乳腺癌细胞,构建大鼠胫骨癌痛模型.雌性SD大鼠(160～180 g)40只,随机分为5组(n=8):假手术组(Ⅰ组)、假手术+CCL2中和抗体组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+ control IgG组(Ⅳ组)和骨癌痛+CCL2中和抗体组(Ⅴ组).术后第10～12天,每天1次鞘内注射CCL2中和抗体或control IgG( 10 μg/15μ1).分别于术前、术后1d,3d,5d,7d,10 d,14 d,21 d测定各组大鼠机械痛敏阈值(PMWT).另取30只大鼠,分组同前(n=6),术后14d取材,免疫荧光染色法测定各组大鼠脊髓背角小胶质细胞标志物(Iba-1)的平均光密度值(MOD).结果 (1)痛行为学:术后10d,14 d,21 d,Ⅲ组大鼠PMWT分别为:(1.78 ±0.38)g,( 1.70±0.17)g,(1.35±0.07)g;Ⅳ组大鼠PMWT分别为:(2.99±0.67)g,(2.52±0.75)g,(1.13±0.07)g;Ⅴ组大鼠PMWT分别为(5.88±0.66)g,(7.81±0.75)g,(6.19±0.53)g.与Ⅲ组相比,Ⅴ组大鼠PMWT值明显升高(P＜0.01),Ⅳ组大鼠PMWT值无明显变化(P＞0.05).(2)免疫荧光染色:术后14d,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠脊髓背角Iba-1的MOD值分别为(151.3±10.8),(149.2±10.6),(74.5±5.0);与Ⅲ组相比,Ⅴ组大鼠MOD值明显升高(P＜0.01);Ⅳ组大鼠MOD值无明显变化(P＞0.05).结论 鞘内注射CCL2中和抗体能显著减轻胫骨癌痛大鼠的机械痛敏,并能抑制其脊髓小胶质细胞的活化.     

脊髓趋化因子配体2在大鼠胫骨癌痛中的作用

目的 探讨脊髓趋化因子配体2(CCL2)在大鼠骨癌痛中的作用.方法 健康成年雌性SD大鼠84只,体重160～ 180g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=28):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和骨癌痛组(P组).P组胫骨骨髓腔内注射Walker-256乳腺癌细胞混悬液制备大鼠胫骨癌痛模型;S组胫骨骨髓腔内注射生理盐水;C组不作任何处理.于接种前ld、接种后l、3、7、10、14和21 d时,测定机械性刺激阈值.于接种前ld、接种后7、14和21'd时痛阈测定结束后,各组随机处死6只大鼠,取L4～6脊髓组织,采用ELISA法测定CCL2含量,反映其表达.接种后14 d时痛阈测定结束后,P组随机取4只大鼠,采用免疫荧光双标染色法观察脊髓背角CCL2与离子钙接头蛋白分子-1(小胶质细胞特异性标记物)、胶质纤维酸性蛋白(星形胶质细胞特异性标记物)和神经元特异核蛋白(神经元特异性标记物)的共表达情况.结果 与C组和S组相比,P组接种后7～21 d时机械性刺激痛阚下降,接种后7、14和21 d时脊髓CCL2表达上调(P＜0.05).骨癌痛大鼠脊髓背角CCL2在小胶质细胞和星形胶质细胞中存在表达,而在神经元中无表达.结论 脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞中释放的CCL2参与了大鼠胫骨癌痛的发生发展.     

大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓背角细胞中的表达

目的：观察胫骨癌痛大鼠脊髓大麻素受体2（CB2）表达的变化,探讨CB2在骨癌痛中作用及其可能的脊髓机制。方法：雌性SD大鼠56只,体重160-180g,随机分为7组（n=8）：对照组、假手术组、骨癌痛组,假手术组和骨癌痛组又各分为3个亚组（术后7d、14d和21d组）,分别用免疫印迹法检测各组大鼠脊髓水平CB2表达的变化,激光共聚焦技术观察CB2的表达部位。结果：免疫印迹结果显示对照组基本没有CB2的表达,与对照组相比,假手术组及骨癌痛组脊髓CB2表达水平升高（P〈0.05）;与假手术组相比,骨癌痛7d组脊髓CB2蛋白表达明显上调（P〈0.05）。激光共聚焦技术显示CB2主要表达于脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞。结论：胫骨癌痛大鼠脊髓背角有CB2表达,早期为其表达的高峰,且主要表达于小胶质细胞和星形胶质细胞。     

大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓背角细胞中的表达

目的:观察胫骨癌痛大鼠脊髓大麻素受体2(CB2)表达的变化,探讨CB2在骨癌痛中作用及其可能的脊髓机制。方法:雌性SD大鼠56只,体重160-180g,随机分为7组(n=8):对照组、假手术组、骨癌痛组,假手术组和骨癌痛组又各分为3个亚组(术后7d、14d和21d组),分别用免疫印迹法检测各组大鼠脊髓水平CB2表达的变化,激光共聚焦技术观察CB2的表达部位。结果:免疫印迹结果显示对照组基本没有CB2的表达,与对照组相比,假手术组及骨癌痛组脊髓CB2表达水平升高(P<0.05);与假手术组相比,骨癌痛7d组脊髓CB2蛋白表达明显上调(P<0.05)。激光共聚焦技术显示CB2主要表达于脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞。结论:胫骨癌痛大鼠脊髓背角有CB2表达,早期为其表达的高峰,且主要表达于小胶质细胞和星形胶质细胞。