HIV感染过程及致病机理

AIDS是由HIV引起的传染性疾病。自1981年Michael S Gettlieb报道首倒AIDS以来，虽已有十几年的研究历程，然而人类仍处于AIDS的威胁之下，为寻求AIDS的有效防治，对于HIV的感染过程及致病机理还有待于深入探讨。     

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌M受体各亚型mRNA表达的影响

目的通过检测M受体各亚型在心肌上的mRNA表达量,研究大明胶囊对高脂血症大鼠降血脂作用的分子机制。方法制备高脂血症大鼠模型,尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等血脂指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定M2、M3、M4、M54种M受体亚型mRNA的表达,观察其在高脂、正常和给药3种条件下的差异。结果高脂血症时血清中的TC、TG、LDL、FFA及MDA水平升高(P<0.05),HDL与SOD降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC、TG、LDL、FFA及MDA水平降低(P<0.05),HDL与SOD水平上调(P<0.05)至近正常水平;比较高脂模型组与正常组M受体各亚型mRNA表达,结果M2、M4、M5受体亚型表达减弱,M3受体亚型表达增强,差别有统计学意义(P<0.05)。给大明胶囊后与高脂模型组比较M3受体亚型mRNA表达增强,M2受体亚型表达减弱,且具有显著差异(P<0.05),M4、M5受体亚型mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论高脂血症大鼠模型建立成功,大明胶囊具有降血脂作用,并且M3受体的水平上调是大明胶囊降血脂作用的分子机制之一。     

同型半胱氨酸对豚鼠心房肌细胞钠电流作用的研究

目的 研究同型半胱氨酸对豚鼠心房肌细胞钠通道的作用.方法 应用Langendorff装置分离单个豚鼠心房肌细胞,运用全细胞膜片钳技术检测同型半胱氨酸对心肌离子通道的作用.结果 同型半胱氨酸可以明显地增加豚鼠心房肌细胞上的钠电流,50μmol/L同型半胱氨酸可以增加钠电流47.1%,而500μmol/L同型半胱氨酸可增加钠电流115.7%,同型半胱氨酸对钠电流作用的半数有效浓度为(90.8±18.6)μmol/L,50μmol/L同型半胱氨酸可使钠通道的最大激活电位由-30mV升至-20mV;而通道动力学研究显示,同型半胱氨酸可以明显地延迟钠通道的失活和加快钠通道的复活.结论 同型半胱氨酸可以明显地增加豚鼠心房肌细胞钠电流,改变钠通道的最大激活电位,其主要是通过抑制钠通道失活过程增加钠电流的幅度.     

Experimental Research on the Cryopreserved Human Fetal Brain Tissue in Culture

４个月龄的人胎脑组织在无菌条件下分离，经酶消化，低温冷冻保存６个月，胎脑组织在３７℃水浴中快速复温并在体外培养。实验结果证实经冻存的人胎脑组织在体外可以继续生长发育。因此我们得出结论，人胎脑组织可被冷冻保存且保持活性。     

大鼠心室肌M3受体与间隙连接蛋白43作为抗心律失常药物靶点的综合研究

目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M₃受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用，并为其作为筛选药物靶点提供依据。方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜，及免疫沉淀与免疫印迹技术，研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关系。结果证实了大鼠心室肌细胞膜蛋白中M₁～M₅等5个亚型的存在；观察到大鼠单个心肌细胞膜上M₃受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位；发现M受体各亚型与间隙连接蛋白43均存在结构整合，且一定浓度离子型去垢剂可破坏M₃受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系，并进一步发现参与M₃受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式。结论大鼠心室肌M受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在结构性共定位关系，且可被一定浓度离子型去垢剂破坏。     

体外培养冻存的胎脑组织的实验性研究

４个月龌的人胎脑组织在无菌条件下分离，经酶消化，低温冷冻保存６个月，胎脑组织在３７℃水溶中快速复温并在体外培养，实验结果证实经冻存的人胎脑组织在体 外可以继续生长发育。因此我们得出结论，人胎脑组织可被冷冻保存且保持活性。     

人乳头瘤病毒基因工程疫苗的基础实验研究

人乳头瘤病毒(HPV)16型感染与宫颈癌的发生、发展密切相关,故研制HPW16型基因工程疫苗对预防HPV感染、控制宫颈癌的发生有重要意义。本研究构建HPV16 L1基因工程菌并进行了基础实验研究。首先采用PCR技术从3例宫颈癌组织中扩增和克隆了HPV16L1基因片段并进行测序。进而构建了pPIC3.5～HPV16L1真核表达工程菌、pQE31～HPV16L1和pGEX4T-HPV16LI原核表达工程菌及杆状病毒-昆虫细胞表达系统。经SDS-PAGE、Westem blot和电镜等手段证明了工程菌表达HPV16 L1蛋白的分子特性和免疫原性,而且,重组菌表达的HPV16 L1可以形成类病毒颗粒(VLP)。经免疫BALB/C小鼠可获得高效价特异血清,证实重组HPV16 L1蛋白具有良好的免疫原性。为进一步研制临床应用疫苗及血清学诊断试剂提供了实验基础。     

人乳头瘤病毒基因工程疫苗的基础实验研究

人乳头瘤病毒(HPV)16型感染与宫颈癌的发生、发展密切相关，故研制HPV16型基因工程疫苗对预防HPV感染、控制宫颈癌的发生有重要意义。本研究构建HPV16L1基因工程菌并进行了基础实验研究。首先采用PCR技术从3例宫颈癌组织中扩增和克隆了HPV161基因片段并进行测序。进而构建了pPlC3．5-HPV16L1真核表达工程菌、pQE31-HPV16L1和pGEX4T—HPV16L1原核表达工程菌及杆状病毒一昆虫细胞表达系统。经SDS—PAGE、Western blot和电镜等手段证明了工程菌表达HPV16 L1蛋白的分子特性和免疫原性，而且，重组菌表达的HPV16 L1可以形成类病毒颗粒(VIP)。经免疫BALB／C小鼠可获得高效价特异血清，证实重组HPV16 L1蛋白具有良好的免疫原性。为进一步研制临床应用疫苗及血清学诊断试剂提供了实验基础。     

大鼠胚胎胸腺细胞体外培养后存活率及表面抗原的变化

应用同种胸腺移植治疗免疫缺陷和恶性肿瘤 ,疗效已经得到肯定。但对于胚胎胸腺取出后 ,经体外培养 ,细胞的存活情况及是否需经处理以降低其抗原性 ,尚无统一认识 ,本实验对其进行了研究 ,现报道如下。一、材料与方法1.材料 :孕 16ｄＳＤ大鼠 2 0只 ,由哈尔滨市药检所提供。ＦＩＴＣ标记的小鼠抗大鼠ＣＤ4、ＣＤ8单克隆抗体 ,批号ＣＡ95 13Ｃ -ＵＳＡ。2 .方法 :ＳＤ大鼠在无菌条件下剖腹取胎鼠胸腺 ,用生理盐水冲洗血迹 ,去除被膜、血管 ,用眼科剪剪成 <1ｍｍ3的组织块 3 0 0 0ｍｇ ,研磨过网 ,制成单细胞悬液。将单细胞悬液平均分为Ａ组 (…