中药麻黄炮制前后生物碱和挥发油的变化

目的:分析麻黄蜜炙后生物碱与挥发油两类主要成分的变化.方法:用气质联用方法分析蜜炙后挥发性成分的变化,按<中国药典>测麻黄总碱的方法比较蜜炙后麻黄总碱的变化情况.结果:蜜炙后挥发性成分变化较大,其中异桉叶素、对-聚伞花素、D-柠檬烯、桉叶素、T-萜品烯等含量显著升高,苯甲醛、四甲基吡嗪、对乙烯基茴香醚、1-α-松油醇、T-松油醇等含量均降低;总生物碱含量则均表现为减少.结论:麻黄蜜炙后辛散发汗力减弱,润肺平喘作用增强,可能与总碱含量减少及挥发油特征变化有关,这为研究古人的炮制机理提供新的实验依据.     

利用均匀设计法优化蜜麻黄的炮制工艺

目的:优化并规范蜜麻黄炮制工艺.方法:以麻黄总生物碱含量为考察指标,采用均匀设计法对蜜麻黄炮制工艺进行优化.结果:优化的工艺条件为:加炼蜜量为10%、润蜜时间0.5 h、炒制温度90±5℃、炒制时间11min,麻黄总生物碱含量理论预测值为1.849%,5个批次的验证试验结果为:1.89%、1.82%、1.84%、1.86%、1.85%.结论:本实验优化的蜜麻黄炮制工艺可行.     

焦磷酸测序鉴定建泽泻方法的建立

目的:建立一种基于内部转录间隔区2(ITS 2)序列突变位点鉴别建泽泻的焦磷酸测序方法。方法:分别提取建泽泻与川泽泻的须根、叶片、叶柄DNA,采用焦磷酸测序方法进行分析鉴定,并通过毛细管电泳测序验证方法的正确性。结果:建立了一种基于ITS 2序列焦磷酸测序鉴定方法,经毛细管电泳测序验证结果准确可靠。建泽泻ITS 2序列中的突变位点A-T的突变频率均不小于83%。结论:焦磷酸测序方法可以准确鉴定不同基源的泽泻物种。     

正交实验优化中药太子参氨基酸超声提取工艺

目的确定太子参中总氨基酸的提取工艺条件。方法采用正交试验法,以总氨基酸含量和薄层色谱结果为考察指标,对超声提取太子参氨基酸的条件进行优选。结果所考察的因素中,氨基酸的提取工艺影响程度为:乙醇浓度>提取次数>乙醇用量>提取时间。结论超声提取的最佳条件为:A1B3C3D3,优化的工艺条件稳定可行。     

泽泻不同提取物对SGC-7901细胞线粒体能量代谢的影响

目的 比较泽泻不同提取物对细胞线粒体能量代谢的影响。方法 分别制备泽泻水提取物(WRE)、乙醇提取物(ERE)、超临界CO₂萃取物(SFE),以SGC-7901胃癌细胞为研究对象,阳离子荧光羰花青染料JC-1染色,采用倒置荧光显微镜观察结合流式细胞仪检测3种提取物对细胞线粒体膜电位的影响;应用酶标仪检测3种提取物对琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响。结果 红色荧光减弱(或绿色荧光增强)的程度:ERE < SFE < WRE。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、WRE组、ERE组、SFE组的单阳细胞比例分别为3.5 %、14.8 %、9.8 %和17.3 %,与正常对照组比较,3组提取物单阳细胞比例均有增加,差异有统计学意义(P < 0.01),与ERE组比较,WRE组单阳细胞比例更高(P < 0.01)、SFE组单阳细胞比例最高(P < 0.01);SDH检测结果显示,SFE组对细胞SDH活性有抑制作用,而ERE组和WRE组均有不同程度的促进作用,且ERE组对SDH的促进作用大于WRE组;与正常对照组比较,ERE组和WRE组的SDH活性差异有统计学意义(P < 0.01,P < 0.05);与ERE组比较,WRE组、SFE组的SDH活性差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 泽泻醇提物对线粒体膜电位的损害较小,对SDH活性促进作用较显著,提示泽泻醇提取物具有较明显改善线粒体能量代谢的作用。     

基因芯片法检测自疑药源性耳聋患者基因突变35例

目的:对自疑药源性非综合征型耳聋患者进行中国人常见耳聋基因的突变分析,以明确其分子病因。方法:收集35名自疑非综合征药源性耳聋患者的外周血样本,常规方法提取基因组DNA,进行基因芯片分析。对突变患者的基因,进行PCR扩增,扩增产物经DNA测序分析,并与NCBI GenBank数据库进行比对,从而对耳聋相关基因的突变进行分析。结果:35名自疑非综合征耳聋患者中检出已知的mtDNA12SrRNA基因罕见致病突变C1494T 1例,占2.86%,其余为野生型或是其他基因突变。结论:在临床自疑药物性聋病患者中真正与线粒体基因突变相关的仅占少数,48临床开展药源性耳聋基因检测时,最好同时进行其他耳聋相关基因的检测,而基因芯片检测是其中一项很好的方法。     

橄榄肉超临界CO2萃取物GC/MS分析

目的 分离鉴定橄榄肉成分.方法 采用超临界CO2萃取方法进行橄榄肉成分提取,提取物进行气相色谱/质谱联用(GC/MS)分析.结果 橄榄肉萃取物得率为7.39％,GC/MS共分离出67个组分,初步鉴定出36种成分,主要成分为十八碳-9-烯酸、麦角甾烷、3-甲基-3-乙基戊烷、9,12-十八碳二烯酸、n-十六酸等等,并应用...     

实时荧光定量PCR法测定福州地区高危型HPV感染型别与病毒载量

目的利用实时荧光定量PCR技术进行HPV-DNA分型定量检测,观察HPV亚型感染的分布情况,初步探讨HPV感染主要基因型别及病毒载量与宫颈病变的关系。方法随机收集本院妇科门诊患者108例,建立病历档案,采集患者宫颈脱落细胞样本,进行HPV-DNA分型定量检测。结果108例门诊患者检出HPV阳性14例,阳性率为12.96%,其中单纯HPV次要高危阳性感染9例,占64.28%;单纯HPV-16阳性感染2例,单纯HPV-31阳性感染1例;HPV-16、HPV-31和HPV次高危型三重感染1例,HPV-16和HPV-18/45的二重感染1例。结论本组患者HPV次高危型感染亚型几率最大,HPV高危型和次要高危型的感染与宫颈病变有高度的相关性,且病毒的感染量与病变的程度有一定的相关性,同时也显示HPV实时荧光定量PCR技术是一种有效的HPV检测手段。     

雷公藤硫氰酸基内酯醇的半合成研究

目的合成雷公藤硫氰酸基内酯醇。方法以雷公藤甲素为起始原料,通过亲核取代反应生成雷公藤硫氰酸基内酯醇。结果总收率为79．5％,目标化合物的结构经IR、^1H—NMR、MS等方法确证。结论利用半合成技术开发高效低毒的新药是一条重要途径。     

泽泻提取物HPCE指纹图谱研究

目的 建立中药泽泻提取物毛细管电泳指纹图谱。方法 采用毛细管区带电泳模式,压力进样：0.5Psi×10 s,分离电压30 kV,柱温25 ℃,DAD检测波长为202 nm,带宽8 nm,参比波长400 nm,带宽20 nm。运行缓冲液由0.1 mol·L^-1硼砂-0.1 mol·L^-1 SDS-甲醇(4∶6∶2)构成,检测结果用相似度评价软件分析其指纹图谱的相似度。结果 10批次泽泻提取物毛细管电泳指纹图谱的相似度均在0.9以上,表明其指纹图谱整体面貌基本一致。结论 所建立的泽泻提取物高效毛细管电泳指纹图谱稳定、可靠,可作为泽泻提取物的特征指纹图谱,该研究为泽泻提取物的定性鉴别及内在质量评价提供了新的参考依据。