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目的 探讨人结肠癌相关成纤维细胞(CAFs)及结肠正常成纤维细胞(NFs)的培养和鉴定方法,分析两者在生物学特性和蛋白表达方面的差异.方法 采用组织块法和胶原酶消化法进行人结肠CAFs和NFs的原代培养;选择第3代人结肠CAFs及NFs,通过形态学观察和免疫细胞化学染色进行鉴定;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测人结肠CAFs和NFs的增殖活性,并绘制7d生长曲线;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定结肠CAFs和NFs细胞上清液中骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶(MMP)-2含量.结果 结肠CAFs胞质突减少,细胞不规则,排列紊乱,可见双核及多核细胞,除细胞角蛋白(CK)外,波形蛋白(vimentin)与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)均为阳性表达;与结肠NFs比较,结肠CAFs增殖活性明显增强;ELISA法测定结肠CAFs和NFs细胞上清液中蛋白含量,其中OPN分别为(2.106±0.137) μg/L和(1.499±0.151) μg/L(P <0.01),TGF-β分别为(331.203±12.203) ng/L和(315.391±12.998) ng/L(P<0.01),VEGF分别为(17.216±0.632) ng/L和(14.887 ±0.661) ng/L(P<0.01),MMP-2分别为(1.830±0.192) μg/L和(1.436±0.102) μg/L(P <0.01).结论 通过组织块法和胶原酶消化法原代培养皆可获得高纯度的人结肠CAFs和NFs;两者在形态结构、增殖活性和蛋白表达等方面差异有统计学意义,这些差异可能是人结肠CAFs发挥其促结肠癌发生发展作用的生物学基础. 相似文献
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〔摘 要〕 目的:探讨麝香保心丸联合曲美他嗪对老年高血压性心脏病患者的疗效及炎症细胞因子水平影响。方法:
选取福清市第三医院及福清市医院 2019 年 1 月至 2022 年 1 月期间收治的老年高血压性心脏病患者 210 例,按照治疗
方法不同分为两组,各 105 例。对照组患者采用曲美他嗪治疗,观察组患者采用麝香保心丸联合曲美他嗪治疗。比较
两组患者临床疗效,治疗前后超声心动图指标(左心室舒张末期内径、左心室射血分数、室间隔厚度)、炎症细胞因
子(白细胞介素 –6、超敏 C 反应蛋白、基质金属蛋白酶 –9)及不良反应发生情况。结果:观察组患者治疗总有效率
高于对照组;治疗后观察组患者左心室舒张末期内径、室间隔厚度低于对照组,左心室射血分数高于对照组;治疗后
观察组患者白细胞介素 –6、超敏 C 反应蛋白、基质金属蛋白酶 –9 低于对照组,差异均具有统计学意义(P < 0.05)。
两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。结论:麝香保心丸联合曲美他嗪治疗老年高血压性
心脏病患者能有效改善患者心功能,控制炎症细胞因子水平,且不良反应发生率低。 相似文献
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目的探讨沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞移植瘤血管生成拟态(VM)的影响及其可能的机制。方法 (1)沉默Tca8113细胞的HIF-1α,Real time RT-PCR和Western blot验证干扰效率;(2)建立裸鼠皮下移植瘤模型:分为阴性对照组和沉默HIF-1α的干扰组,观察沉默HIF-1α对肿瘤生长的影响并绘制生长曲线;(3)瘤体HE染色及免疫组化CD31染色观察血管形态、微血管密度(MVD)和VM的变化,免疫组化染色观察沉默HIF-1α对血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。结果 (1)移植瘤的生长曲线显示干扰组瘤体的生长速度和体积显著慢于和小于对照组(P<0.05);(2)与对照组相比,干扰组瘤体内的血管形态趋于正常且MVD减小(P<0.05),VM现象少见;(3)与对照组相比,干扰组瘤体组织的VEGF、TGF-β1表达显著减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论口腔鳞癌移植瘤中存在VM现象,VM的形成可能与HIF-1α对靶基因VEGF、TGF-β1的表达调控有关。 相似文献
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目的探讨人结肠癌相关成纤维细胞(CAF)对结肠癌Lovo细胞增殖、黏附、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法收集人结肠CAF及正常成纤维细胞(NF)条件培养基,建立结肠CAF、NF与Lovo细胞间的共培养模型,以无血清培养基处理的Lovo细胞作为空白组.进行细胞增殖、黏附、迁移及Transwell侵袭能力检测。结果Lovo细胞与结肠CAF共培养后。增殖48和72h反映细胞增殖的吸光度(A)值分别为(0.667±0.059)和(0.709±0.030),明显高于空白组[(0.574±0.031)和(0.593±0.031)]和NF组[(0.597±0.036)和(0.652±0.029)],差异均有统计学意义(P〈0.01);黏附细胞的A值为(0.588±0.067),也明显高于空白组(0.226±0.039)和NF组(O.375±0.059),差异也均有统计学意义(P〈O.01);12h和24h细胞迁移率分别为(35.2±8.7)%和(64.6±7.1)%,明显高于空白组[(14.7±3.6)%和(26.3±10.3)%]和NF组[(14.1±7.3)%和(35.2±9.8)%](P〈O.01);透膜细胞数为(56.2±4.8)个,多于空白组的(14.6±2.2)个和NF组的(22.9~4.5)个(P〈O.01)。结论人结肠CAF具有增强结肠癌Lovo细胞增殖、黏附、迁移和侵袭的能力。 相似文献
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林凯金 《临床口腔医学杂志》2012,28(2):121-124
肿瘤的发生发展不仅依赖肿瘤细胞本身的恶性增殖,更依赖于肿瘤间质微环境结构和功能上的支持。癌相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境中最主要的宿主细胞,通过细胞间的直接接触、可溶性因子的分泌和对细胞外基质的修饰等方式对肿瘤的发生发展起着重要的调控作用。本文就CAFs及其与口腔肿瘤发生发展关系的研究进展进行综述。 相似文献
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目的探讨OPN、MMP-9、VEGF-C蛋白在口腔鳞癌原发灶和淋巴结转移灶肿瘤细胞中的表达规律及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测48例口腔鳞癌原发灶及其淋巴结转移灶中OPN、VEGF-C、MMP-9蛋白表达。结果 OPN、MMP-9、VEGF-C三种蛋白在正常口腔粘膜组织中无阳性表达,在口腔鳞癌原发灶及淋巴结转移灶组织中,三种蛋白呈阳性表达,其阳性表达率原发灶中依次为62.5%(30/48)、85.4%(41/48)、81.2%(39/48),淋巴结转移灶中依次为83.3%(40/48)、79.1%(38/48)、77.1%(37/48);OPN在原发灶中的表达低于淋巴结转移灶,两组间比较差异有显著性(P<0.05),而MMP-9和VEGF-C在原发灶和淋巴结转移灶中的表达均较强,差异无显著性(P>0.05)。在原发灶和转移灶之间OPN阳性表达与MMP-9和VEGF-C之间存在正相关(P<0.01)。结论 OPN可能成为预测口腔鳞癌转移的标记物和治疗新靶点,而MMP-9、VEGF-C与口腔鳞癌转移的关系有待进一步研究。 相似文献
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