人源性多肽pCM-19抗菌机制的初步研究

目的：初步分析人源性多肽pCM-19的抗菌作用机制。方法：利用荧光素掺入破损细胞膜的原理，采用流式荧光激活细胞分析（FACScan）和扫描电子显微镜分析pCM-19对靶菌膜的作用机制。结果：FACS分析法结果显示pCM-19处理后的大肠杆菌PI着染细菌比例明显高于未处理组，并且随作用时间的延长，PI着染BL-21菌比例增大，20min时达最高水平，20min以后反而降低；扫描电子显微镜观察到pCM-19处理后的大肠杆菌有明显的表面形态学的改变，如细菌体积缩小、细菌表面出现皱缩、凹陷似有孔洞形成。结论：人源性多肽pCM-19可能作用于细菌细胞壁和（或）细胞膜，通过改变其通透性而发挥杀菌作用。     

不同剂量顺铂对大鼠肝毒性作用的研究

目的肝毒性是顺铂药理学上的主要特点,本研究对不同剂量顺铂对大鼠肝毒性的作用效果及机制进行了探索。方法顺铂通过腹腔给药方式给予,低剂量组顺铂(10 mg/kg·bw)、中剂量组顺铂(50 mg/kg·bw)和高剂量组顺铂(250 mg/kg·bw),对照组注射相同体积生理盐水。连续给予7 d并在最后1 d麻醉处死后取样进行生化和组织病理学分析检测。结果对不同剂量处理组的肝进行分析,qPRC结果显示顺铂呈浓度依赖性降低肝细胞生长因子(HGF)、有机阴离子转运多肽1(Oatp1)和多药耐药相关量白2(Mrp2)的表达,随着浓度的增加,肝细胞表达TNF-α表达明显增加(P0.05)。ELISA结果显示顺铂呈浓度依赖性增加了血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和总胆红素(TBIL)的含量(P0.05)。高浓度顺铂降低了肝组织内超氧化物歧化酶(SOD)的浓度,同时性增加了丙二醛(MDA)浓度(P0.001)。苏木素-伊红(HE)染色结果显示各剂量顺铂组出现不同程度中心静脉扩张、肝细胞空泡改变和实质性炎症等病理改变,其中高剂量组最严重。Caspase-3免疫染色结果显示,Caspase-3呈浓度依赖性上调。结论本研究对顺铂的肝毒性进行了系统探索,发现了顺铂通过剂量依赖方式产生对肝毒性作用,为顺铂类药物的使用剂量加以限定并提供了重要依据。     

人格拉利素来源肽段的构效关系研究

目的:研究人格拉利素功能肽段一级结构与活性的关系.方法:依据确定的生物学活性,在人格拉利素功能肽段CM19的基础上,利用抗菌肽的特点及已知的抗菌肽构效关系研究结果对CM19进行氨基酸取代、缺失及随机排列设计合成5条肽段,通过试管法和平板法检测相应肽段的抗菌活性.结果:CM19氨基端第一个半胱氨酸在发挥抗菌作用中是必需的;阳性电荷数的增加或者分布不合适不改善抗菌活性;氨基酸的排列顺序明显降低抗菌活性;CM19羧基端7肽无明显的抗菌作用.CM12具有广谱抗菌作用,不但对非耐药菌而且对耐药菌具有同样的作用.结论:氨基酸的取代、缺失及排列对人格拉利素肽段的抗菌功能具有明显的影响.     

锰剂无法延长肠型放射病小鼠存活时间

迄今为止,肠型放射病几无有效的治疗措施.不过,有几种低等生物天然具有超强的对抗电离辐射损伤的能力,例如,耐辐射奇球菌经10 kGy剂量的急性照射后依然能够自我修复[1].     

胰蛋白酶抑制剂对人肝癌细胞SK－HEP-1迁移和侵袭的影响

目的 观察尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)对人肝癌细胞株SK-HEP-1迁移和侵袭等肿瘤生物学特性的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测UTI对SK-HEP-1细胞增殖的影响;Transwell法检测不同浓度UTI对细胞迁移和侵袭能力的作用;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测不同浓度UTI作用后,尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)的mRNA和蛋白表达.结果 UTI组对SK-HEP-1细胞的增殖无影响(P＞0.05);与对照组比较,不同浓度的UTI组均能抑制人肝癌细胞SK-HEP-1的体外迁移和侵袭能力,且呈剂量效应关系,差异有统计学意义(P＜0.05);不同浓度的UTI组中SK-HEP-1细胞UPA的mRNA和蛋白表达均明显下降,且呈剂量依赖性,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 UTI能抑制人肝癌细胞SK-HEP-1迁移与侵袭,其机制可能与UTI抑制SK-HEP-1细胞UPA表达有关.     

格拉利素抗菌肽家系的发现及部分功能验证

目的:继发现人源性新抗菌肽基因并进行功能验证后,进一步发现高度同源蛋白质家系并进行功能验证.方法:利用生物信息学分析手段对该蛋白家系各成员进行系统分析,人工合成具有代表性的不同肽段,采用比浊法和菌落计数法测定人工合成肽段的抗菌活性.结果及结论:发现了富含甘氨酸并且序列高度同源的抗菌肽家系,命名为格拉利素(Glyrichin),目前含有来自不同生物的29个成员,所有成员均无相关功能研究报道;根据多序列比对结果所合成的、代表家系中9个成员的4条多肽均有不同程度的抗菌作用.上述生物信息学分析和实验研究结果强烈提示了新抗菌肽家系的存在,其中跨越哺乳动物的抗菌肽家系的存在已得到充分证实.     

胰管结石合并胰腺癌1例并文献复习

胰管结石合并胰腺癌比较特殊,临床表现较复杂,现报告本院治疗的胰管结石合并胰腺癌1例,并复习相关文献．以提高对该病的认识。     

人源新基因hGlyrichin的克隆及其功能的初步研究

目的：克隆获得与mL52新基因（GenBank：AY028425）同源人类新基因hGlyrichin，并研究其功能。方法：采用PCR法从人胎肝cDNA文库中扩增出该新基因，因富含甘氨酸而命名为hGlyrichin，以RT—PCR和Northem杂交分析在多种细胞株中的表达及转录本大小，并对该基因进行生物信息学分析，利用pE他2b表达载体构建重组质粒pET22b-hGlyrichin，转化大肠杆菌BL-21（DE3）中进行IPTG诱导表达。结果与结论：电子PCR证实该基因定位于人染色体20q11．22，包含3个外显子和2个内含子。Northern杂交结果显示为单一转录本，大小约600bp，与mL52全长cDNA长度相符。所编码的蛋白为含有疏水区的小分子阳离子蛋白，相对分子质量和等电点分别为8182．83和9．58，二级结构（Garnier-Robson模型）预测是以B折叠型为主，这些特点与目前已知的大多数阳离子抗菌肽的结构及部分理化特性极为类似，该基因转化后的大肠杆菌在IPTG诱导表达时的生长受到明显抑制，初步证实了hGlyrichin具有明显的抗菌活性。     

口服地衣芽孢杆菌对肠型放射病小鼠存活的影响

大剂量意外全身照射或腹部局部放疗均可导致肠型放射病的发生[1].此类病例常因严重腹泻和继发感染而死亡,因此,控制肠源性感染已成为治疗肠型放射病的常规措施之一[2].