应用鸡胚尿囊绒膜锥虫蓝吸收法评价化学物质的眼刺激性

背景：传统多采用兔眼刺激实验（Draize实验）评价化学物质眼刺激性,即将化学物涂进兔眼睛后观察其变化,这种方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦。各国实验室都在寻找动物替代实验的方法。 目的：采用鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收实验作为兔眼刺激实验替代方法评价化学物眼刺激性的可行性。 设计、时间及地点：观察实验,于2008-05/09在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成。 材料：无特定病原体级受精鸡卵,9日龄,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司。 方法：将1 g/L的锥虫蓝溶液滴加在受化学物质刺激损伤的鸡胚尿囊绒膜上,通过计算鸡胚尿囊绒膜受损伤后吸收锥虫蓝的量,半定量测定化学物质对鸡胚尿囊绒膜的刺激性,并将所得结果与体内兔眼刺激实验评分结果进行比对,作相关性分析。同时预测了5种常见有机溶剂的眼刺激性。 主要观察指标：鸡胚尿囊绒膜受刺激损伤后吸收锥虫蓝的量。 结果：鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法与体内兔眼刺激实验评分结果相关性很好（R2=0.925 9）。5种常见有机溶剂未稀释时,甘油无眼刺激性,丙酮、乙醇、二甲基亚砜、甲醇均有较高刺激性。当稀释为1%后,丙酮、乙醇、二甲基亚砜无眼刺激性,但甲醇刺激性仍然较高。 结论：鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法可以代替兔眼刺激试验对化学物质眼刺激性进行评价。     

碱性成纤维细胞生长因子对兔慢性高眼压视神经轴突的保护作用

目的研究在兔慢性高眼压动物模型中,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对视神经轴突的保护作用。方法新西兰大白兔22只（44眼）,选取20只免,用前房注入卡波姆的方法制成慢性高眼压动物模型,每只兔随机一眼为bFGF治疗组（20眼）,分别于建模同时及建模后7、14、21d重复玻璃体腔内注射2000U／50μL的bFGF;另一眼为外科对照组（20眼）,分别于相同时间玻璃体腔内注射等体积的PBS。另外2只兔不做任何注射为正常对照组（4眼）。观察bFGF治疗纽和外科对照组两组动物不同时间段的眼底视乳头、杯盘面积比、视神经轴突形态、数目以及建模后28d时视神经轴突超微结构的改变。结果14d时,外科对照组可见视乳头凹陷开始加深、颜色变淡,血管开始出现移位;21d时,外科对照组视乳头出现明显改变。bFGF治疗组杯盘面积比在14d及以后改变明显较外科对照组小（P〈0．05）。病理学观察可见,在各时期bFGF治疗组较外科对照组视神经纤维数目多,且存在统计学差异（P〈0．01）。电镜观察可见,28d时,外科对照组轴突排列紊乱、髓鞘变性,多见凋亡现象;但bFGF治疗组轴突内结构尚正常。结论bFGF在慢性高眼压状态下对视神经轴突有保护作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对兔慢性高眼压视神经轴突的保护作用

目的 研究在兔慢性高眼压动物模型中,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对视神经轴突的保护作用。方法 新西兰大白兔22只（44眼）,选取20只兔,用前房注入卡波姆的方法制成慢性高眼压动物模型,每只兔随机一眼为bFGF治疗组（20眼）,分别于建模同时及建模后7、14、21d重复玻璃体腔内注射2000U/50μL的bFGF;另一眼为外科对照组（20眼）,分别于相同时间玻璃体腔内注射等体积的PBS。另外2只兔不做任何注射为正常对照组（4眼）。观察bFGF治疗组和外科对照组两组动物不同时间段的眼底视乳头、杯盘面积比、视神经轴突形态、数目以及建模后28d时视神经轴突超微结构的改变。结果 14d时,外科对照组可见视乳头凹陷开始加深、颜色变淡,血管开始出现移位;21d时,外科对照组视乳头出现明显改变。bFGF治疗组杯盘面积比在14d及以后改变明显较外科对照组小（P＜0.05）。病理学观察可见,在各时期bFGF治疗组较外科对照组视神经纤维数目多,且存在统计学差异（P＜0.01）。电镜观察可见,28d时,外科对照组轴突排列紊乱、髓鞘变性,多见凋亡现象;但bFGF治疗组轴突内结构尚正常。结论 bFGF在慢性高眼压状态下对视神经轴突有保护作用。     

近视儿童屈光成分光学相干生物测量的研究

目的：探讨近视儿童各屈光成分值与性别、屈光度、年龄的关系。方法：3～12岁近视儿童79例140眼经门诊睫状肌麻痹后检影验光,采用光学相干生物测量仪（Zeiss IOL Master）测量其眼轴长度（AL）、角膜屈光力（K1、K2）、前房深度（ACD）,计算眼轴长度与角膜曲率的比值AL/CR,对测量值进行统计分析。结果：① 近视儿童的屈光度值男女之间差异无统计学意义（t=-0.54,P=0.59）。女性的眼轴长度明显短于男性（t=-3.00,P=0.003),角膜屈光力大于男性（K1:t=2.10, P=0.04;K2:t=2.69,P=0.008),前房深度小于男性（t=-3.78,P=0.00);② 近视屈光度与眼轴长度呈负相关（r=-0.488),与角膜屈光力呈负相关(K1:r=-0.262;K2:r=-0.277);③ 年龄与眼轴长度（r=0.173）、前房深度（r=0.233）呈正相关;④ 本研究近视儿童的AL/CR值为3.087±0.11,近视屈光度与AL/CR比值呈负相关(r=-0.732）。结论：在静态屈光状态下,近视儿童的屈光成分存在性别差异。儿童近视是眼轴和角膜屈光力两种因素共同作用所致。随着年龄增长,眼轴长度、前房深度增加,角膜屈光力无明显变化。     

五种化妆品的皮肤刺激性：平皿法鸡胚试验评价**

背景：评价化妆品皮肤刺激性,传统多采用兔皮肤刺激实验,即将化学物涂抹在动物背部去毛的皮肤上,观察其变化,这些方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦。各国实验室都在寻找动物替代实验的方法。 目的：采用平皿法鸡胚试验方法作为替代方法评价化妆品引起人体皮肤不良反应潜在可能的可行性。 设计、时间及地点：动物替代实验,于2008-03/05在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成。 材料：无特定病原体级受精鸡卵,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司。 方法：将鸡胚置于平皿中,孵育第8天用于试验,记录出现出血,血管裂解及凝血的鸡胚数目,得出刺激因子X,以判断待测物质是否具有人体皮肤不良反应潜在可能。并与人体斑贴试验结果进行比较。 主要观察指标：刺激因子X。 结果：5种化妆品中2种有人体皮肤不良反应潜在可能,刺激因子X＞5。与人体斑贴试验结果经校正χ2 检验比较,差异无显著性意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1。 结论：平皿法鸡胚试验和人体斑贴试验的结果一致,该方法可以用来评价化妆品的皮肤刺激性。 关键词：皮肤刺激性;替代方法;人体斑贴试验;鸡胚试验     

五种化妆品的皮肤刺激性:平皿法鸡胚试验评价

背景:评价化妆品皮肤刺激性,传统多采用兔皮肤刺激实验,即将化学物涂抹在动物背部去毛的皮肤上,观察其变化,这些方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦.各国实验室都在寻找动物替代实验的方法.目的:采用平皿法鸡胚试验方法作为替代方法评价化妆品引起人体皮肤不良反应潜在可能的可行性.设计、时间及地点:动物替代实验,于2008-03/05在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成.材料:无特定病原体级受精鸡卵,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司.方法:将鸡胚置于平皿中,孵育第8天用于试验,记录出现出血,血管裂解及凝血的鸡胚数目,得出刺激因子X,以判断待测物质是否具有人体皮肤不良反应潜在可能.并与人体斑贴试验结果进行比较.主要观察指标:刺激因子X.结果:5种化妆品中2种有人体皮肤不良反应潜在可能,刺激因子X＞5.与人体斑贴试验结果经校正x2 检验比较,差异无显著性意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1.结论:平皿法鸡胚试验和人体斑贴试验的结果一致,该方法可以用来评价化妆品的皮肤刺激性.     

应用鸡胚尿囊绒膜锥虫蓝吸收法评价化学物质的眼刺激性

背景:传统多采用兔眼刺激实验(Draize实验)评价化学物质眼刺激性,即将化学物涂进兔眼睛后观察其变化,这种方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦.各国实验室都在寻找动物替代实验的方法.目的:采用鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收实验作为兔眼刺激实验替代方法评价化学物眼刺激性的可行性.设计、时间及地点:观察实验,于2008-05/09在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成.材料:无特定病原体级受精鸡卵,9 日龄,购于北京梅里亚通实验动物技术有限公司.方法:将1 g/L的锥虫蓝溶液滴加在受化学物质刺激损伤的鸡胚尿囊绒膜上,通过计算鸡胚尿囊绒膜受损伤后吸收锥虫蓝的敏,半定量测定化学物质对鸡胚尿囊绒膜的刺激性,并将所得结果与体内兔眼刺激实验评分结果进行比对,作相关性分析.同时预测了5种常见有机溶剂的眼刺激性.主要观察指标:鸡胚尿囊绒膜受刺激损伤后吸收锥虫蓝的量.结果:鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法与体内兔眼刺激实验评分结果相关性很好(R2=0.925 9).5种常见有机溶剂未稀释时,甘油无眼刺激性,丙酮、乙醇、二甲基业砜、甲醇均有较高刺激性.当稀释为1%后,内酮、乙醇、二甲基亚砜无眼刺激性,但甲醇刺激性仍然较高.结论:鸡胚尿囊绒膜-锥虫蓝吸收法可以代替兔眼刺激试验对化学物质眼刺激性进行评价.     

bFGF在持续高眼压下对兔视网膜神经节细胞的保护作用

目的  研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在持续高眼压下对兔视网膜神经节细胞的保护作用。方法  健康新西兰大白兔27只,其中24只（48眼）卡波姆注入前房法制成持续高眼压动物模型,随机分为2组,每只兔一眼为高眼压组(各24眼),另一眼为bFGF实验组（各24眼）;另3只（6眼）为正常组。bFGF实验组在建模过程中及成功后1、2、3周玻璃体腔内注射bFGF各1次,正常组在相应的时间仅玻璃体腔内注入与bFGF实验组等体积的磷酸缓冲生理盐水(PBS)。术后每日固定时间测量眼压,将眼压维持在30mmHg以上。分别于建模后1、2、3、4周随机处死6只兔子。完整摘除眼球行常规HE染色观察视网膜神经节细胞形态变化并计数存活细胞数目,免疫组织化学染色检测视网膜神经节细胞Bcl-2凋亡基因的表达。建模后4周行电镜观察视网膜神经节细胞超微结构的变化。结果  光镜：建模后两组神经节细胞数目均较正常组减少,自2周后高眼压组与bFGF实验组比较差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学：比较视网膜神经节细胞抗凋亡蛋白（RGCsBcl-2）基因蛋白表达的阳性目标面积构成比,第3周时bFGF实验组Bcl-2基因蛋白仍保持较高水平的表达,两组比较差异有统计学意义（P<0.01）。电镜：术后4周bFGF实验组改变明显轻于高眼压组,细胞器较对照组丰富,部分线粒体仍可见完整嵴。结论  bFGF作为一种神经营养因子,对高眼压下兔视网膜神经节细胞具有保护作用。     

儿童远视和近视眼睫状肌麻痹前后各屈光成分的变化

目的通过测量比较儿童远视和近视眼睫状肌麻痹前后各屈光成分的变化,探讨调节对其屈光成分的影响。方法对520例3～12岁儿童使用1%阿托品散瞳验光,睫状肌麻痹前后均采用光学相干生物测量仪（Zeiss IOL Master）测量眼轴长度、角膜屈光力（K1、K2）、前房深度。对其中远视646眼、近视221眼的睫状肌麻痹前后各屈光成分测量值进行统计对照分析。结果①儿童远视眼睫状肌麻痹后眼轴变短（P=0.01）,角膜屈光力变小（K1P=0.01;K2P=0.04）,前房深度加深（P=0.00）。②儿童近视眼睫状肌麻痹后前房深度加深（P=0.00）,眼轴长度、角膜屈光力无变化。结论儿童远视眼睫状肌麻痹后眼轴变短,角膜屈光力变小,前房加深;儿童近视眼睫状肌麻痹后前房加深,而眼轴长度、角膜屈光力无变化。     

两种3T3光毒性试验方法在防晒化妆品光毒性评价中的应用

背景:评价化妆品光毒性,传统多采用兔或豚鼠动物实验,即将化学物涂抹在动物背部去毛的皮肤上,经一定时间间隔后暴露于长波紫外线光线下,观察其变化,这些方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦.各国实验室都在寻找动物替代实验的方法.目的:采用2种3T3细胞光毒替代试验方法(中性红法与MTT法)评价防晒化妆品引起皮肤光毒性的可能性.设计、时间及地点:动物替代实验,于2008-08/12在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成.材料:3T3小鼠胚胎成纤维细胞,购于美国ATCC公司.方法:选用SPF值分别为10,15,30的防晒化妆品霜剂和乳液各1种,作用于3T3细胞后,暴露或不暴露于紫外线下,用中性红法与MTT法判定细胞毒性情况.主要观察指标:光刺激因子值.结果:防晒化妆品SPF30-2(霜剂)可能有光毒性,2≤光刺激因子值<5.中性红法与MTT法均得到了相同的结论.结论:3T3细胞光毒性试验用来评价化妆品的光毒性是可行的.