小剂量吉西他滨联合顺铂时序用药对晚期肺腺癌的临床研究

目的 探讨临床中晚期肺腺癌患者应用小剂量吉西他滨与顺铂时序用药治疗效果.方法 选取我院2009年1月至2009年12月80例晚期肺腺癌患者为研究对象,将其按照随机数字法分为研究组和对照组,研究组给予小剂量吉西他滨与顺铂时序用药治疗,对照组给予小剂量吉西他滨与顺铂常规用药治疗,观察两组的治疗效果.结果 研究组治疗有效率为65.0％,对照组治疗有效率为42.5％,研究组治疗有效率明显的高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.研究组骨髓抑制、血小板减少和粒细胞减少以及周围神经损害与恶心、呕吐发生率均明显的低于对照组,差异有统计学有意义（P＜0.05）.研究组和对照组1年后的生存率分别为72.5％、70.0％,两组的数据比较差异无统计学意义（P＞0.05）;研究组和对照组3年后生存率分别为52.5％、27.5％,两组的数据比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 临床中对于晚期肺腺癌患者应用小剂量吉西他滨与顺铂联合治疗采取时序用药治疗效果显著,毒副反应少,值得临床中应用与推广.     

己烯雌酚和胰岛素样因子3对睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8mRNA和蛋白表达水平的影响

目的 探讨不同水平的己烯雌酚(DES)和胰岛素样因子3(INSL3)对体外培养的睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8(LGR8) mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3日龄的雄性昆明小鼠的睾丸引带组织解剖取出,并进行细胞培养.传代后,随机分为正常对照组及实验组(不同浓度DES组:A～E组,不同浓度INSL3组:Ⅰ～Ⅳ组)共11组.其中,实验组加入的DES浓度分别是3.7×10-2 mmol·L-1、3.7×10-3 mmol·L-1、3.7×10-4 mmol·L-1、3.7×10-5 mmol·L-1和二甲基亚砜溶剂对照组;INSL3的浓度分别为3.3×10-3 μmol·L-1、3.3×10-4 μmol·L-1、3.3×10-5 μmol·L-1及3.3×10-6 μmol·L-1.加药持续作用48 h后,应用反转录PCR和流式细胞术分析睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白的表达情况.结果 A组和Ⅳ组LGR8的mRNA及蛋白水平显著高于正常对照组(P<0.01);与正常对照组相比,B、C、D组LGR8 mRNA及其蛋白表达均显著下降(Pa<0.05),而E组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组LGR8 mRNA和其蛋白的表达差异均无统计学意义(Pa>0.05).结论 高剂量的DES和极低剂量的INSL3均能上调睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白表达水平,推测DES和INSL3可能通过LGR8作用途径来影响睾丸引带的发育.     

先天性性别异常临床研究方法

先天性性别异常(disorders of sex development,DSD)是一组病因复杂,临床表现多样的先天性疾病.大约有一半的病例分子生物学诊断不明确,需要以临床特征诊断.这类疾病活产儿发病率在1:4 500～1:5 000之间,某些亚类发病率约1:100 000甚至更低.     

胰岛素样因子3对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响

目的 探讨胰岛素样因子3 (INSL3)对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响.方法 手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织,进行原代细胞培养后传代.将传代细胞随机分为正常对照组和实验组,实验组加入INSL3,浓度分别为3.3×10-3 μmol·L-1、3.3×10-4 μmol·L-1、3.3×10-5 μmol·L-及3.3 × 10-6 μmol·L-1,分别持续作用12 h、24h、48 h,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其细胞增殖情况；细胞免疫荧光和流式细胞术检测其细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的结构变化及表达情况.结果 不同浓度INSL3作用后的不同时间点,检测细胞增殖和收缩活性的相关指标,结果均存在时间-剂量效应,且差异有统计学意义(p＜0.05).正常对照组及各实验组细胞均呈持续性增殖,24h后增殖更明显.与正常对照组比较,INSL3可刺激睾丸引带细胞骨架重塑,细胞周边肌动蛋白丝带增多,胞质中微丝F-actin明显粗大、变长,细胞中F-actin表达量增加.各实验组中以3.3 ×10-3 μmol·L-1组变化尤其明显.结论 INSL3对睾丸引带细胞增殖和收缩活性有直接促进作用,可能参与睾丸引带发育甚或睾丸下降过程的调节.     

免疫相关lncRNA和胃癌预后关系分析及预测模型建立

目的:研究免疫相关lncRNA与胃癌的关系,从而探索胃癌治疗潜在的靶点。方法:通过TCGA数据库收集443例胃癌患者基因表达谱数据及临床数据,筛选胃癌中与免疫相关的lncRNA,通过单因素与多因素COX分析构建预测模型。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,ROC曲线下面积（AUC）评价该模型预测的准确性,主成分...     

己烯雌酚对小鼠睾丸引带中LGR8表达的影响

目的:通过体内实验研究己烯雌酚(DES)对小鼠睾丸引带中胰岛素样因子3受体LGR8的影响,从而探讨外源性雌激素对小鼠睾丸下降的影响。方法:8～10周龄KM孕鼠随机分为正常组、空白对照组和实验组(0.1、1.0、10、100μg/kg DES 4个剂量组),共6组,每组20只。于孕9～17 d每天分别给予实验组妊娠小鼠不同剂量的DES(0.1、1、10、100μg/kg),空白对照组给予等体积DMSO+生理盐水,正常组不给药。应用免疫组化和RT-PCR分别检测胎鼠和幼鼠睾丸引带中LGR8蛋白和mRNA的表达。结果:HE染色可见胎鼠正常组、对照组睾丸引带发育良好,中间的间叶组织和外周的肌源细胞之间分界清楚;实验组可见睾丸引带发育不良,间叶组织和肌源细胞之间无明显分界,组织结构紊乱。幼鼠正常组和实验组睾丸引带发育未见明显不同。LGR8表达于睾丸引带肌源细胞和间叶组织细胞,以肌源细胞表达为主。实验组LGR8阳性表达较正常组弱,胎鼠各实验组和幼鼠DES 1、10、100μg组与同发育阶段的正常组相比均有统计学意义(P<0.05)。DES高剂量(10、100μg)组与同发育阶段的正常组相比LGR8 mRNA表达增加(P<0.05)。各实验组PCR产物测序均未见明显突变。结论:DES可影响小鼠睾丸引带LGR8 mRNA和蛋白的表达,DES可能通过影响INSL3-LGR8信号系统干扰睾丸引带的发育,进而影响睾丸正常下降。     

椎间盘终板软骨组织总BNA的提取

高持量的RNA分离是进行基因表达的研究的基础.