稀土荧光探针,核酸结构与抗癌药物作用机理

一、引言稀土荧光探针在生物学、医药学等研究中的应用越来越广泛,如作为闭壳层电子结构金属离子(Ca~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)等)的探针研究金属离子在金属酶、金属蛋白中的微环境,研究金属离子与生物大分子相互作用的计量化学;作为迅速扩散加强能量转移的能量给体,研究生物膜结构;作为未配对鸟嘌呤的探针,用于探察核酸结构中单股链的存在。众所周知、绝大部分抗癌药物的靶分子是DNA和RNA。如顾式二氯二氨合铂(Cis-DDP)、博莱霉素(Bleomycin)、阿霉素     

长春西汀与牛血清白蛋白结合作用的研究

应用荧光、紫外光谱法研究在模拟人体生理条件下长春西汀与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用,求得长春西汀与BSA的结合常数K=3.09×103和结合位点数n=0.933.根据热力学参数确定长春西汀与BSA之间的作用力类型,根据Fǒster偶极-偶极非辐射能量转移原理,计算长春西汀与BSA相互结合时其受体-受体间的距离r=2.59 nm.     

肿瘤基因靶向治疗载体的构建和鉴定

目的构建并鉴定人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因核心启动子调控的EGFP基因表达载体。方法从体外培养的HepG2细胞中提取全基因组DNA,以此为模板,克隆得到hTERT基因启动子核心区基因片段(hTERTp)。设计引物以质粒pEGFP-N1为模板利用PCR扩增得到EGFP基因片段,将两者通过搭桥PCR扩增得到hTERTp-EGFP片段,经SacⅠ、XbaⅠ双酶切定向插入到pGL3-Enhancer载体中,得到重组表达载体pGL3-hTERTp-EGFP。将该表达载体瞬时转染HELF细胞和HeLa细胞后观察EGFP蛋白表达情况。结果重组质粒经测序后确认插入序列正确无误,瞬时转染48h后在HeLa细胞中可以看到EGFP蛋白的大量表达,而在HELF细胞中未见表达。结论成功构建了可以通过hTERT核心启动子调控治疗基因在肿瘤细胞中特异表达的重组表达载体pGL3-hTERTp-EGFP。     

灯盏乙素与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的采用荧光、紫外光谱法研究在模拟人体生理条件下灯盏乙素与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。方法将灯盏乙素对牛血清白蛋白进行荧光淬灭滴定,利用Scatchard模型和F"rster非辐射能量转移理论得出灯盏乙素和牛血清白蛋白的结合参数。结果灯盏乙素与BSA的结合常数K=1.240×106,结合距离r=2.94nm,相互作用力主要为疏水作用力。结论阐明了灯盏乙素和牛血清白蛋白相互作用的机制,建立了灯盏乙素和牛血清白蛋白的结合模型。