双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞TE85细胞内尿激酶型纤溶酶原激活物和色素上皮衍生因子表达的影响

目的 观察双氢青蒿素(DHA)对人骨肉瘤细胞活性、转移能力以及细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 将不同浓度的DHA(5、10、20、40、80 μmol/L)作用于体外培养的正常人成骨细胞和人骨肉瘤细胞TE85 12、24、48 h后,噻唑蓝(MTT)法测定DHA对细胞活性的影响,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞中uPA和PEDF mRNA水平的表达,Westen blot法检测uPA和PEDF蛋白水平的表达.结果 DHA对人成骨细胞活性无明显影响(P＞0.05).DHA能够明显抑制人骨肉瘤细胞TE85的活性(P＜0.05).不同作用时间下DHA对人骨肉瘤细胞TE85的半数抑制浓度(IC50)分别为(12 h)=(41.66±0.53) μmol/L、IC50(24 h)=(32.28 ±0.27)μmol/L和IC50 (48 h)=(22.53±1.26) μmol/L.DHA能够明显减少人骨肉瘤细胞的迁移和细胞中uPA的表达水平,同时细胞中PEDF表达升高(P＜0.05).结论 DHA对正常人体骨组织无害,能够有效抑制骨肉瘤细胞生长和转移.     

阿仑膦酸钠/磷酸钙骨水泥释放体系结构及体外释放规律的研究

目的 制备不同浓度的阿仑膦酸钠/磷酸钙骨水泥释放体系,观察阿仑膦酸钠对磷酸钙骨水泥结构的影响及复合释放体系体外释放的规律.方法 分别制备1wt％、3wt％和5wt％的载阿仑膦酸钠磷酸钙骨水泥释放体系,分别采用傅氏转换红外线光谱分析仪、扫描电子显微镜和高效液相色谱仪研究载阿仑膦酸钠磷酸钙骨水泥的结构和药物体外释放规律.结果 阿仑膦酸钠的载入没有改变磷酸钙骨水泥相成分的官能团;扫描电镜下各实验组微观结构相似,均呈珊瑚样状结晶体相互交织成网状结构;各组药物在同一时间点释放量(％)的差异无统计学意义(P＞0.05),各组药物的释放均分为48 h前的突释阶段和48 h后的缓释阶段,符合Higuchi机制扩散释放模型.结论 阿仑膦酸钠的载入对磷酸钙骨水泥的晶体结构基本没有影响,且在磷酸钙骨水泥释放体系中能够持续、稳定的释放.     

用羧甲基纤维素浓缩催产素稀溶液方法的研讨

1.本文报道了一种用羧甲基纤维素浓缩催声素稀溶液的方法。操作简单,耗费不多和不需要任何特殊设备。活力回收率达65～80％。 2.根据蛋白质(或多肽)含有酪氨酸或色氨酸,(催产素含酪氨酸)能与Folin—酚试剂起氧化还原反应,生成蓝色化合物,蓝色的深浅与蛋白浓度成正比,作比色法测定,用作为考察催产素注射液的质量的参考。 3.通过羧甲基纤维素吸附、洗脱所得到的催产素溶液,不仅浓度提高,而且经Folin—酚法测定其蛋白质含量,发现单位效价的蛋白质含量明显降低,纯度有所提高。     

聚乙二醇双水相体系在分离纯化蛋白质中的应用

蛋白质等生物大分子在聚乙二醇双水相体系中分配系数不同,可依此而进行分离纯化。此法分离的选择性优于硫酸铵、丙酮分段等经典方法,且对蛋白质有保护作用。该法操作简便,处理量大,回收率高,正日益广泛的应用。     

固定化酵母细胞生产1，6－二磷酸果糖的动力学研究

筛选获得一株１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）的高产酵母菌株，改变通透性后的酵母细胞，在发酵及固定化生产ＦＤＰ过程中发现Ｆｅ２＋和甘油能大量提高ＦＤＰ的积累。将戊二醛交联后的酵母细胞，用卡拉胶固定化后，装入酶反应柱，连续生产ＦＰＤ，柱反应可稳定在１０天以上，转化率维持在２０％以上。     

经股内侧肌入路全膝表面关节置换治疗膝骨性关节炎

目的探讨人工全膝表面关节置换手术入路（TKA）。方法膝骨性关节炎21例,经股内侧肌间入路行TKA,采用人工全膝表面关节后稳定型假体,骨水泥固定。结果 21例膝术后均无神经血管损伤、髌骨轨迹不良、感染、切口皮肤牵拉性坏死等并发症;术后平均出血（305±55）ml;术后第2d下床行走;术后3d膝关节屈曲活动度为（85±7）度、7d（105±5）度、6周（114±6）度;3个月（122±6）度;术后直腿抬高时间为（2±1）d;术后3个月膝关节功能评分为（92±5）分。结论经股内侧肌入路行TKA具有手术创伤小、功能恢复快、直腿抬高时间早等优点     

1,6-二磷酸果糖的快速测定方法

本文报道了以间苯二酚为显色剂,以D-果糖为测定标准,快速测定1,6-二磷酸果糖的方法。结果表明:显色反应产物的最大吸收波长为570nm,最佳显色反应体系是2ml,1,6-二磷酸果糖溶液(10～200μg),2mg间苯二酚与7 ml浓盐酸,混匀后于80℃恒温水浴中加热14分钟,冷却后于570nm测定吸收值,产生的光吸收值在1小时以内稳定。     

1,6—二磷酸果糖产生菌的筛选及最佳培养条件的研究

1,6-二磷酸果糖在治疗心血管疾病方面已得到广泛的应用。为了建立应用固定化微生物细胞将蔗糖转化为1,6-二磷酸果糖的方法,本文进行了1,6-二磷酸果糖产生菌的筛选和最佳培养条件的研究。在所筛选的微生物细胞中,菌株8912具有较高的产1,6-二磷酸果糖酶系活力。最适培养条件为:麦芽汁培养基糖度为12柏林,培养温度28℃,pH6.5。     

新合成吩嗪衍生物体外诱导癌细胞周期阻滞和凋亡的实验

目的 探讨新合成吩嗪衍生物抗癌活性及其作用机制。方法 MTT法检测细胞增殖,吖啶橙/溴乙锭（AO/EB）染色荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V-FITC/7-AAD双染检测凋亡,Western blot检测p53和caspase-3蛋白的表达。结果 pn18、pn23、pc27和pc28四种化合物在体外抑制癌细胞增殖,尤其对人结直肠癌细胞HCT116作用明显,且呈时间和剂量依赖性。pc28在四种化合物中作用最强,48 h对HepG2、HCT116和A549细胞半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（6.62±2.69）、（10.83±1.41）和（22.39±4.31）μmol。20 μmol化合物作用于HCT116细胞24 h后,细胞密度降低,形态变圆,细胞内明亮绿色荧光与染色质浓缩相关,死亡细胞呈橙黄色和红色与细胞膜通透性增加有关;pc28诱导的细胞晚期凋亡比例由0.345%升高至19.7%。20 μmol pn18和pc27诱导G₀/G₁期细胞分别升高17.5%和25.0%,pn23和pc28诱导S期细胞分别升高18.4%和11.0%。pn23和pc28诱导p53表达升高,pc28也能上调并激活caspase-3。结论 四种合成的新型吩嗪衍生物在体外能有效抑制多种癌细胞增殖,其作用机制可能与诱导细胞周期阻滞和凋亡相关。     

过氧化物酶6对紫外线致大鼠角膜损伤的治疗作用及机制

研究过氧化物酶6(PRDX6)对紫外线照射导致大鼠角膜损伤的治疗作用及其可能的机制。Wister雄性大鼠,紫外线照射法建立大鼠角膜损伤模型,将动物随机分为对照组、PRDX6组和地塞米松(DXM)组,连续给药12 d。通过裂隙灯显微镜检查角膜浑浊度,光学显微镜下观察角膜组织病理学改变,应用硫代巴比妥酸法及化学比色法检测角膜组织丙二醛(MDA)及总抗氧化能力(TAOC)。Western blot检测p38 MAPK信号通路的表达情况,RT-PCR法检测细胞因子基因的表达情况。结果显示,与对照组比较,PRDX6组角膜浑浊度明显降低,病理损伤得到改善,角膜MDA含量减少,TAOC增加,p38 MAPK磷酸化蛋白水平降低,对照组与PRDX6组细胞因子基因的表达有差异(P <0.05)。结果提示 PRDX6对紫外照射后导致的角膜损伤有一定的治疗作用,这可能与其减轻氧化损伤程度,抑制p38 MAPK磷酸化及调节细胞因子基因表达有关。