姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡过程中核磷蛋白的表达与定位变化

目的探讨核磷蛋白NPM在癌细胞诱导凋亡过程中在细胞内、细胞核基质上的定位与表达变化,以及NPM与凋亡调控相关蛋白的关系,探索其在凋亡调控中的作用。方法在姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡的基础上,以亚细胞蛋白质组学方法分析NPM在核基质中的存在与变化,并以免疫印迹法杂交实验进行确证;激光扫描共焦显微镜观察NPM在EC9706细胞凋亡过程中的定位与变化,以及NPM与Bax、Bcl-2等基因产物的共定位关系。结果 NPM存在于EC9706细胞核基质蛋白组分中,并在姜黄素处理后表达下调。NPM在EC9706细胞凋亡过程中发生显著的胞质-核之间的穿梭定位变化,并与Bax、Bcl-2等蛋白具有共定位关系,且共定位区域发生了变化。结论 NPM是一种核基质结合蛋白,在EC9706细胞凋亡中的表达与定位变化,及其与凋亡调控蛋白的共定位关系提示,它在EC9706细胞凋亡调控中具有重要作用。     

人参皂甙Rg1、肉桂酸与丹参酮ⅡA组合对体外人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响

目的 研究中药有效成分人参皂甙Rg1、肉桂酸和丹参酮ⅡA组合(RCT)对人成骨肉瘤MG-63细胞的形态与超微结构改变和终末分化的影响,鉴定其对人成骨肉瘤细胞终末分化的诱导作用. 方法 以中药有效成分组合(33mg/L人参皂甙Rg1+2mmol/L肉桂酸+0.3mg/L丹参酮ⅡA)处理MG-63细胞7d,对照组与处理组样本各3次重复,免疫细胞化学检测及光镜与电镜观察系统研究RCT组合对MG-63细胞的细胞生物学效应.环六亚甲基双乙酰胺(HMBA)处理MG-63细胞作为分化诱导效果的阳性对照. 结果 免疫细胞化学检测显示,成骨肉瘤细胞终末分化指标Ⅰ型胶原、骨黏素、骨钙蛋白的表达呈强阳性,并观察到钙化糖原颗粒增多与典型骨结节的形成;光镜与电镜观察结果显示,处理后的MG-63细胞产生了细胞形态规则,大小一致,细胞铺展体积增大,核质比例减小,核内核仁数目减少,细胞器丰富发达等趋向正常细胞特征的显著改变. 结论 RCT组合能显著改变MG-63细胞形态与超微结构恶性特征,并促进终末分化标志物的表达,从而对人成骨肉瘤MG-63细胞的终末分化具有显著诱导作用.     

中国鲎鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

应用从中国鲎血细胞中提取的鲎素处理人肝癌SMMC－7721细胞，研究海洋生物活性物质的抗肿瘤作用。实验结果显示，经3．0mg.L^-1鲎素处理的SMMC－7721细胞生长缓慢，细胞生长抑制率为55．57％，细胞发裂指数抑制率达43．68％；处理后的细胞性磷酸酶活性降低36．26％，γ－GT活性下降，TAT活性增强。结果表明，鲎素能有效地抑制肝癌细胞的增殖活动，具有与癌细胞诱导分化物相似的抗肿瘤效果。     

胚胎干细胞的体外诱导分化模型

目的：胚胎干细胞是具有全能性及无限制自我更新与分化能力的一类特殊细胞群体，通过对胚胎干细胞诱导分化研究的回顾和总结，期望能给胚胎干细胞的临床应用提供理论参考。资料来源：应用计算机检索Highwire press以及Medline数据库2000／2004期间的相关章。检索词为“Embryonic stem cell，differentiation．induce”，同时计算机检索万方数据库2000／2004期间的相关章，检索词为“胚胎干细胞”，限定章类型为中。资料选择：对资料进行初审，选取与诱导分化有关的章，纳入标准为研究原。资料提炼：选取与诱导分化有关的章共369篇(其中外364篇)。通过阅读相关献的要，从中选取15篇较全面介绍胚胎干细胞的诱导分化以及应用的章。其中，全面介绍胚胎干细胞各种细胞模型，神经细胞模型，心肌细胞模型，上皮细胞模型，造血细胞模型。资料综合：7篇献较为全面的介绍胚胎干细胞可以诱导分化为神经细胞、心肌细胞、上皮细胞以及造血细胞等细胞模型，从以上献以及单独介绍各种细胞模型的章中分别对各种细胞模型的研究概况进行归纳整理。结论：胚胎干细胞经过定向诱导分化后可获得神经细胞．心肌细胞．上皮细胞以及造血细胞等细胞模型，这些模型可以用于细胞发育分化的分子机制．并对药物筛选和临床细胞治疗提供良好应用前景．     

肿瘤反基因治疗研究进展

寡聚核苷酸及其省生物能选择性调节基因表达,在反义技术中,寡聚核苷酸可以mRNA的专一序列或双链DNA的特定序列为靶点,阻止遗传信息向蛋白质的流动,也可与双螺旋DNA专一序列结合形成三链DNA,阻止基因转录或DNA复制,反基因寡聚核苷酸以及其独特的结构和优化反义RNA的技术特点,为恶性肿瘤的治疗提供了新的途径。     

恶性肿瘤患者的抗Koc自身抗体

目的:为了探讨恶性肿瘤患者的抗Koc自身抗体,研究其临床意义。方法:在优化重组Koc表达和提纯条件的基础上,以重组Koc为包被抗原,采用所建立的检测IgM、IgG、IgA类抗Koc自身抗体的ELISA技术。结果:发现抗Koc的阳性率与恶性肿瘤的类型有密切关系,以肝癌、直肠癌和肺癌较高,胃癌居中,而食道癌最低,其中后者与健康对照无明显差异。以IgM、IgG、IgA中任一类Ig抗Koc对阳性为抗Koc阳性标本,肝癌、直肠癌和肺癌的阳性率均分别＞50．0%,胃癌为25．5%,食道癌为15．8%,均明显较单一阳性率为高。结论:提示Ig类型抗体同步检测对于提高阳性率具有重要意义,抗Koc不失为恶性肿瘤诊断的一个良好新指标。     

牡蛎天然活性肽对人胃腺癌BGC-823细胞周期与基因表达的调控

目的 比较研究牡蛎天然活性肽（BPO）对人胃腺癌BGC-823细胞凋亡的生物学效应，并进一步探索其对胃癌细胞的作用机制。方法 采用酸抽提、凝胶柱层析等方法，从牡蛎体内分离提取到牡蛎天然活性多肽组分BPO-1，以姜黄素和HMBA处理组为平行对照，流式细胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测相关癌基因、抑癌基因表达变化。结果 BPO-1能有效抑制BGC-823细胞增殖活动，出现亚G1期细胞，细胞进入凋亡现象。BPO-1，姜黄素及其组合均能不同程度地上调BGC-823细胞p16，c-myc，Fas，p2^WAF1/CIP1蛋白表达，下调突变型p53，bcl-2蛋白表达。结论 BPO-1对胃癌细胞具有显著的诱导凋亡作用。其诱导癌细胞凋亡机制与其调节和干预bcl-2，c—myc等癌基因和p53，p16，p21^WAF1/CIP1等抑癌基因的表达有关。     

姜黄素诱导永生化人HaCaT细胞凋亡

目的 探讨姜黄素对人永生化上皮细胞凋亡的诱导作用.方法 应用细胞计数、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、苏木素-伊红(HE)染色和透射电镜检测经姜黄素诱导处理后人永生化上皮HaCaT细胞的凋亡.结果经7.5mg/L姜黄素诱导处理后,人永生化上皮HaCaT细胞的增殖活动受到明显的抑制,细胞生长抑制率达83.03%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达13.1%,并发生G2/M期阻滞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;光镜和电镜观察结果显示,姜黄素处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,染色质凝聚,线粒体肿胀,有凋亡小体形成等显著的凋亡特征.结论姜黄素对人永生化上皮HaCaT细胞凋亡有显著的诱导作用,从而为进一步研究表皮细胞衰老、凋亡机理提供了重要基础和研究依据.     

Prohibitin在姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中的调控机制

目的 探讨姜黄素（curcumin）诱导成骨肉瘤细胞凋亡前后,Prohibitin（PHB）蛋白的定位与表达变化,及PHB与凋亡相关基因产物的共定位关系。
方法 选择性抽提经姜黄素诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白,以蛋白质组学、免疫印迹法和激光扫描共焦显微技术对PHB在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在MG-63细胞中的共定位关系进行了研究。结果 双向凝胶电泳、质谱鉴定和免疫印迹法结果显示,PHB存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中,细胞凋亡后在细胞核基质蛋白中表达下调。免疫荧光显微镜观察显示,PHB定位于MG-63细胞核基质纤维上,经姜黄素处理后出现分布位置与表达水平的变化。激光扫描共焦显微镜观察结果显示,PHB在MG-63细胞凋亡过程中与Bax、Bcl-2、Fas、P53、c-Myc和Rb等基因产物具有共定位关系,且共定位区域发生了变化。 结论 PHB是一种核基质结合蛋白;PHB在MG-63细胞凋亡过程中的表达与分布变化,及其与细胞凋亡相关基因的共定位关系,对MG-63细胞凋亡具有重要影响。     

EGFR参与溶血磷脂酸诱导口腔鳞癌细胞整合素β6的表达

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞整合素β6(ITGB6)表达中的作用。方法:将口腔鳞癌细胞SAS接种到6孔板中,经LPA诱导后,收集细胞,用定量RT-PCR和Western Blot检测ITGB6的mRNA和蛋白表达量;利用EGFR抑制剂AG1478检测EGFR对LPA诱导ITGB6 mRNA和蛋白表达的影响。结果:1)经10 μmol/L LPA诱导2 h后,SAS细胞ITGB6的mRNA表达水平显著性增加;而ITGB6的蛋白水平则在诱导4h后有显著性升高。2)LPA诱导促进SAS细胞EGFR磷酸化水平增加。3)EGFR抑制剂AG1478抑制LPA诱导SAS细胞ITGB6 mRNA和蛋白表达。结论:LPA能诱导SAS口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA和蛋白表达,EGFR参与LPA诱导的ITGB6表达。