股骨干骨折后戒烟能减少骨不连

目的了解长期吸烟的股骨干骨折患者戒烟与否与发生骨不连之间的联系。 方法回顾性分析近2年在上海市奉贤区中心医院就诊的股骨干骨折患者病例资料。纳入标准为采用髓内钉治疗的男性单侧股骨干骨折、吸烟者的吸烟史≥5年;排除标准为开放性骨折、长期卧床、严重骨质疏松症、合并其他部位骨折、感染性骨不连。根据患者吸烟、戒烟情况,将受伤前无吸烟史的患者纳入为非吸烟组、受伤后戒烟的患者纳入为戒烟组、受伤后未戒烟的患者纳入为未戒烟组。记录3组患者达到骨折临床愈合的时间,进行卡方检验,了解3组患者骨不连发生情况的差异;并对骨折达到临床愈合的中位时间用Kaplan-Meier法进行预估及比较。 结果非吸烟组有12.5%(4例)、戒烟组有20.4%(11例)、未戒烟组有52.9%(9例)出现骨不连,差异具有统计学意义(χ²＝10.705,P<0.05),成对比较提示未戒烟组的骨不连发生情况明显高于非吸烟组(χ²＝9.315,P<0.0167)、及戒烟组(χ²＝6.779,P<0.0167)。3组患者骨折达到骨折临床愈合的中位时间估计值分别为15.1周[95%置信区间(14.9,15.3)周]、22.0周[95%置信区间(21.7,22.4)周]和51.1周,3组患者达到骨折临床愈合时间的差异有统计学意义(P <0.05)。 结论长期吸烟的股骨干骨折患者伤后及时戒烟能减少骨不连发生,但骨折临床愈合时间比未吸烟患者稍有延长。     

急性跟腱断裂的治疗进展

近年来跟腱断裂的发病率逐年增高,目前没有一个标准的治疗策略。保守治疗可以避免各种手术并发症,跟腱再断裂的发生率高,而手术治疗虽有并发症的风险,但再断裂率低。对于跟腱断裂患者的术后固定,功能性支具固定能加快患者的康复过程,并能给患者带来比管型石膏固定更好地功能结局。     

金荞麦查尔酮异构酶的基因克隆及其花期表达与黄酮量分析

目的 获取金荞麦总黄酮合成途径的关键酶查尔酮异构酶（chalcone isomerase,CHI）基因的全长序列,并进行序列分析;对花期金荞麦CHI基因在各组织中的表达与总黄酮量进行分析。方法 利用同源克隆技术获得金荞麦查尔酮异构酶基因（FdCHI）的cDNA序列;采用半定量RT-PCR对CHI表达量进行分析,并采用AlCl₃法测量总黄酮量。结果 金荞麦FdCHI基因cDNA包含一个750 bp的ORF,编码249个氨基酸,命名为FdCHI。生物信息学分析表明该编码蛋白与其他植物CHI氨基酸序列同源率较高。FdCHI在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明,其表达量花＞根＞叶＞茎,总黄酮量为花＞叶＞茎＞根。结论 在金荞麦中首次获得CHI基因的cDNA序列,编码蛋白具有CHI同源蛋白的典型特征。FdCHI基因在金荞麦茎、叶和花中的表达量与总黄酮量具有相关性,但在根中表达量与总黄酮量相关性较小。     

金荞麦黄酮醇合酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的 克隆金荞麦黄酮醇合酶(FdFLS)基因的编码序列,并对该基因进行序列分析、原核表达及其活性研究.方法 采用同源克隆技术获得FdFLS基因cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;构建FdFLS原核表达载体pET-30b(+)-FdFLS,在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,并测定目标蛋白的酶学活性.结果 FdFLS基因开放阅读框(ORF)全长1008 bp,编码334个氨基酸;FdFLS基因在大肠杆菌中可表达出相对分子量约4×104的蛋白,并具有将二氢槲皮素和二氢山柰酚转化为槲皮素和山柰酚的催化活性.结论 首次克隆到FdFLS基因,并实现该基因在大肠杆菌中有活性的表达.     

金龙胆草3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及序列分析

目的 对金龙胆草Conyza blinii 3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因进行克隆及序列分析,并检测其是否可作为金龙胆草的内参基因。方法 采用RACE技术克隆金龙胆草GAPDH基因的cDNA全长序列,利用DNAMAN、BLAST、MEGA等工具对序列进行生物信息学分析,并以其为内参进行半定量RT-PCR。结果 克隆获得了1个全长1 418 bp的GAPDH基因,完整开放阅读框1 020 bp,编码340个氨基酸,命名为GLGAPDH。序列比对结果显示,金龙胆草的GAPDH基因与紫背天葵的同源序列相似性达到96%,与薇甘菊的同源序列相似性为93%。通过系统进化树分析发现其与紫背天葵的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析GLGAPDH作为内参基因在不同组织中表达稳定,扩增效果良好,重现性强。结论 首次克隆了金龙胆草GAPDH基因的全长cDNA序列,并通过半定量实验验证了其可作为内参基因用于基因表达量分析,为金龙胆草次生代谢物合成过程中关键酶表达分析及调控机制的研究奠定了基础。     

金荞麦苯丙氨酸解氨酶基因FdPAL 的克隆及原核表达

目的:克隆金荞麦苯丙氨酸解氨酶(FdPAL)基因DNA和全长cDNA序列,对该基因进行序列分析,原核表达及其活性相关研究.方法:采用同源克隆和RT-PCR技术扩增苯丙氨酸解氨酶基因的DNA序列和全长cDNA序列并对其进行生物信息学分析;构建PAL原核表达载体pET30b(+)-FdPAL,在大肠杆菌Escherich coli BL21( DE3)中进行诱导表达,使用分光光度计法定量测定其酶活,使用薄层色谱法鉴定其催化活性.结果:金养麦PAL基因DNA序列全长2 583 bp,由2个外显子,1个内含子构成(命名为FdPAL,GenBank登录号为HM628904);cDNA序列包含1个2 169 bp的开放阅读框(ORF),编码722个氨基酸,理论相对标准分子质量78.31 kDa,等电点5.94.SDS-PAGE分析表明,诱导后的新生蛋白质相对标准分子质量为75.37 kDa;诱导4h后,表达产物的苯丙氨酸解氨酶比活力最高,达到4 386 nmol·g-1·min-;薄层色谱结果表明,诱导表达产物具有催化苯丙氨酸转化为肉桂酸的活性.结论:首次从金荞麦中克隆到PAL基因,该基因具有植物PAL同源基因的典型特征;重组的金荞麦PAL基因表达载体[pET30b(+)-FdPAL]能有效地在大肠杆菌Ecoli BL21 (DE3)中表达,并形成具有一定催化功能的酶.     

金荞麦花青素合酶基因的克隆及其表达与花青素量的相关性研究

目的 获取金荞麦花青素合成途径关键酶花青素合成酶（anthocyanins synthase,ANS）基因的全长序列,并进行序列分析;对花期金荞麦ANS基因在各组织中表达水平与花青素量的相关性进行分析。方法 利用同源克隆技术获得ANS基因cDNA序列;采用半定量RT-PCR对ANS表达量进行分析;采用分光光度法测量花青素量。结果 金荞麦ANS基因cDNA包含一个1 077 bp的ORF,编码358个氨基酸,命名为FdANS。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白与其他植物ANS蛋白氨基酸序列同源率较高。FdANS在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明,其表达量花＞叶＞茎＞根,花青素量为花＞叶＞茎＞根。结论 在金荞麦中首次获得ANS基因的cDNA序列,编码蛋白具有ANS同源蛋白的典型特征。FdANS基因在金荞麦根、茎、叶和花中的表达量与花青素量具有相关性。     

知母中菝葜皂苷元分离、其衍生物合成及活性

目的分离知母中菝葜皂苷元,并对其进行衍生化,初步评价目标化合物活性。方法采用萃取、水解、重结晶,并通过化学手段和光谱分析鉴定知母中菝葜皂苷元的结构和纯度,通过一系列反应合成其衍生物。测定目标化合物的抗衰老活性。结果分离得到菝葜皂苷元,通过不同反应合成了8个菝葜皂苷元衍生物。8个化合物显出不同抗衰老活性。结论化合物1、2、6、7、8为新化合物,其中化合物1抗衰老活性突出,可进行深入研究。     

金荞麦查尔酮异构酶的基因克隆及其花期表达与黄酮量分析

目的 获取金荞麦总黄酮合成途径的关键酶查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)基因的全长序列,并进行序列分析;对花期金荞麦CHI基因在各组织中的表达与总黄酮量进行分析.方法 利用同源克隆技术获得金荞麦查尔酮异构酶基因(FdCHI)的cDNA序列;采用半定量RT-PCR对CHI表达量进行分析,并采用AlCl3法测量总黄酮量.结果 金荞麦FdCHI基因cDNA包含一个750 bp的ORF,编码249个氨基酸,命名为FdCHI.生物信息学分析表明该编码蛋白与其他植物CHI氨基酸序列同源率较高.FdCHI在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明,其表达量花＞根＞叶＞茎,总黄酮量为花＞叶＞茎＞根.结论 在金荞麦中首次获得CHI基因的cDNA序列,编码蛋白具有CHI同源蛋白的典型特征.FdCHI基因在金养麦茎、叶和花中的表达量与总黄酮量具有相关性,但在根中表达量与总黄酮量相关性较小.     

孕中期血清学产前筛查联合超声检测的临床价值探讨

目的：探讨孕中期血清学产前筛查联合超声检测的临床应用及价值。方法对188例发生不良妊娠结局的孕妇,将其在孕中期进行的血清学产前筛查结果联合超声检测进行回顾性分析。进行孕中期产前筛查孕妇共3912例,其中包括高风险孕妇176例,低风险孕妇3728例。结果188例发生不良妊娠结局的孕妇中有59例在孕中期进行产前筛查时为高风险孕妇,占所有高风险孕妇的33．52％（59／176）,129例为低风险孕妇,其不良妊娠结局发生率占低风险孕妇的3．46％（129／3728）,产前血清学筛查高风险孕妇不良妊娠结局的发生率明显高于低风险孕妇,两者比较差异有统计学意义（P＜0．01）,产前血清学筛查高风险联合超声检测对不良妊娠结局的阳性预测值为79．59％,而单独应用血清学检测或超声检测对不良妊娠结局的阳性预测值较低。结论血清学产前筛查联合超声检测在预测不良妊娠结局方面有重要的临床意义。