针刺配耳穴治愈单侧眼睑下垂1例

1 病历介绍 患者,女,43岁,汉族,老师,2004年4月20日初诊.主诉:左侧上眼睑下垂1d.患者昨日晨起发现左侧眼裂变小,上眼睑抬举无力,且逐渐加重,至晚间上眼睑已完全不能上抬.到眼科检查未发现器质性病变,遂介绍到针灸科治疗.查体:左侧上眼睑不能上抬,眼球活动正常,视力正常.     

肿瘤血管生成调节与肿瘤治疗

肿瘤血管生成是一个非常复杂的过程，涉及到多种因子的调节。针对肿瘤血管生成的治疗对策在目前肿瘤治疗中具有十分重要的意义。本文就影响肿瘤血管生成的各种调节因子、抗血管生成的主要治疗靶标及研发现状作一综述，为肿瘤治疗的抗血管生成新靶标的设计研究提供信息。     

噬菌体文库与计算机模拟筛选H1N1 流感病毒血凝素结合位点的比较

目的:对H1N1 流感病毒血凝素HA 的抗原表位初步筛选。方法:用噬菌体展示文库对2 株抗体的结合位点进行筛选,将筛选的抗原位点结合HA 序列进行多肽合成,免疫小鼠制备单克隆抗体,通过分子生物学手段对4 株抗体的轻链和重链可变区基因进行调取,通过计算机模拟抗体序列结合的抗原的结构域,推测抗体结合的氨基酸位点。结果:噬菌体文库筛选得出抗体的结合序列富含组氨酸和精氨酸,将针对多肽的单克隆抗体的序列和前期获得的2 株抗HA 单克隆抗体的序列比对分析,发现A1-8 和anti-14p 结合的HA 抗原序列相一致,H1-13 和anti-11p 结合的HA 抗原序列相一致。结论:通过将噬菌体展示文库技术和计算机模拟预测抗原抗体结合,可以有效筛选抗原表位,为流感病毒HA 抗原表位预测方法的完善提供理论基础。     

一种高效表达小干扰RNA载体的构建研究

目的：用mir30前体骨架来构建高效表达小干扰RNA载体。方法：通过基因合成的方法，将mir30前体骨架进行全长基因合成，并在合成的mir30前体骨架中引入合适的酶切位点用于外源发夹DNA的克隆，然后将之克隆到含U6启动子的表达载体中。将针对绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的小干扰RNA克隆到以上表达载体中，通过转染及Western blot来检测新的小干扰RNA表达载体的基因沉默效率。结果：同目前常用的含polⅢ的小干扰RNA表达载体相比较，用mir30前体骨架表达针对GFP的小干扰RNA的表达载体可以明显抑制GFP的表达。结论：用mir30前体骨架构建的小干扰RNA表达载体可高效表达外源小干扰RNA。     

人endostatin、 K5及endostatin-K5重组腺病毒载体的构建及其表达

目的:人endostatin、 K5及endostatin-K5基因克隆, 重组腺病毒载体的构建及其表达产物体外活性检测.方法:采用PCR方法扩增基因, 通过酶切连接方法将3种基因片段克隆到腺病毒shuttle载体pAd5-CMV-H1H2-MCS-6His中;用磷酸钙沉淀法分别将经Pac I酶切的表达人endostatin、 K5及endostatin-K5的腺病毒shuttle载体与Pac I酶切的腺病毒骨架共转染HEK 293细胞;用CsCl密度梯度离心法纯化制备病毒;用重组腺病毒感染HeLa细胞并在不同时间点收获蛋白, Western blot检测24 h、 48 h和72 h的蛋白表达量;通过MTT方法检测蛋白对ECV-304生长抑制作用.结果:成功制备表达人endostatin、 K5及endostatin-K5重组腺病毒载体;Western blot可以检测到蛋白表达, 蛋白表达量随病毒感染HeLa细胞的时间延长而逐渐增高;由重组腺病毒所表达的3种蛋白对ECV304细胞均有明显的生长抑制作用.结论:由含有人endostatin、 K5及endostatin-K5基因的重组腺病毒载体所表达的蛋白对ECV-304生长具有明显的抑制作用.