皮内注射布氏杆菌活疫苗毒理学评价

目的研究人用皮内注射布氏菌活疫苗拟取代目前我国人用皮上划痕布氏菌活疫苗。方法对菌种进行了全面检定合格后，进行菌苗制备及实验室动物毒理、药效学方面的系列研究包括小白鼠急性毒性试验、局部刺激试验、全身过敏试验、长期毒性试验、用细胞免疫诊断制剂布氏菌素对皮内免疫12周的豚鼠做背部皮肤变态反应试验。结果小鼠皮内注射布氏菌活疫苗的最大耐受量为10亿个菌，用布氏菌素注射足底，可引起明显迟发型变态反应。局部刺激试验只有注射10亿菌的部位会在48h后化脓，但在1-2周内可自愈。全身过敏试验，皮内免疫布氏菌疫苗组及阴性对照组对豚鼠进行攻击后，均未出现任何异常反应，而阳性对照组豚鼠全部死亡。毒性试验，布氏活疫苗皮内免疫组与盐水对照组经6周和12周后各项血常规、血生化检查均未见异常，各脏器组织的病理学检查亦未见病理改变，免疫12周后对豚鼠骨髓造血细胞亦无影响，对皮内免疫12周的豚鼠做背部皮肤变态反应试验，24-48h结果为阳性。结论动物实验结果显示，布氏菌活疫苗用皮内注射的途径进行免疫是可行的。     

鼠疫噬菌体国家参考品的研制

目的采用鼠疫噬菌体国家参考品研制鼠疫鉴别及鼠疫活疫苗纯菌检查。方法制备鼠疫噬菌体参考品,建立噬菌体效价质量标准,对参考品进行协作验证,并对参考品进行稳定性分析。结果研制的鼠疫噬菌体国家参考品,其效价质量标准应不低于10^-7,该参考品在-20℃条件下具有较好的稳定性,在37℃条件下稳定性较差。结论研制的鼠疫噬菌体国家参考品已被国家有关部门正式批准,可用于鼠疫鉴别诊断及鼠疫活疫苗纯菌检验。     

注射用布氏菌活疫苗免疫学评价

目的以小鼠为动物模型,通过检测布氏菌活疫苗免疫小鼠产生的体液免疫、细胞免疫应答及保护力,对其进行免疫学评价。方法将30只小鼠随机分为3组,皮下免疫布氏活疫苗,免疫4周后分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中总IgG抗体,抗体亚类IgG1及IgG2a;ELISPOT法检测分泌IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目,以及用ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFN-γ、IL-4的细胞因子水平;用羊布氏菌弱毒株M5攻击免疫动物,通过脾脏细菌计数评价布氏活疫苗的免疫保护作用。结果用ELISA法检测到免疫布氏活苗的小鼠体内有特异性抗体产生;ELISPOT可检测到较高的分泌IFN-γ脾脏淋巴细胞数目,ELISA方法可检测到较高的IFN-γ水平,表明布氏活疫苗主要诱导Th1型免疫应答;通过布氏活疫苗保护力分析,表明该疫苗具有较好的免疫保护效果。结论布氏疫苗采用注射免疫途径是可行的,免疫后能获得较好的免疫效果。     

新型布鲁氏菌皮肤变态反应制剂的效果评价

利用三氯醋酸和硫酸铵综合法提取制备纯化的布鲁氏菌纯蛋白变应原 ,同时采用现行市售布鲁氏菌素进行对比研究 ,对相关人群做布鲁氏菌皮内变态反应实验。结果表明该制品具有良好的皮肤变态反应原性 ,其特异性及敏感性均优于现行市售菌素 ,可做为一种新型布氏菌病诊断制剂应用于实验研究及现场调查研究。     

鲍氏不动杆菌感染快速诊断方法的研究

目的 建立鲍氏不动杆菌(ABA)感染的快速诊断方法.方法 收集临床分离的ABA48株,对其进行耐药性分析;分别用聚合酶链反应(PCR)方法、血清学方法对其快速诊断方法进行初步研究.结果 PCR对ABA的检出率为83.3％,48株菌中8株未检出;此方法的最低检出量为3.6×103 CFU;通过对60份阴性血清的检测,确定Cutoff值为0.43,对48份阳性血清进行检测,均为阳性,检出率为100.0％.结论 该试验建立的PCR诊断方法和酶联免疫吸附试验(ELISA)血清学诊断方法,具有较高的特异性和敏感性,为临床ABA快速、高效诊断方法的建立提供了试验依据.     

T或B细胞缺陷小鼠对弱毒布鲁氏菌的感染性观察

本试验选用不同类型细胞缺陷小鼠,分成6个试验组,前3组为CBA/N与BALB/c小鼠交配所生仔一代,为B细胞免疫功能缺陷小鼠及其相应的对照小鼠,后3组为615B_6/PB_1与C_(57)BL/6交配所生之仔鼠,系T淋巴细胞免疫功能缺陷与T和NK细胞联合免疫功能缺陷小鼠及其对照小鼠。以上各组小鼠分别以1亿菌体布鲁氏菌活菌苗注射腹腔,于注射后一定间隔检测抗体效价并取有关脏器做细菌培养;B细胞功能缺陷小鼠抗体效价为1:80～1:160,对照小鼠为1:160～1:640,T细胞和T、NK细胞功能缺陷小鼠抗体效价为1:4～1:80,对照小鼠为1:128～1:640,45天时心血培养虽为阴性而脾脏仍有细菌生长。脾重的增减与抗体效价有一定关系与活菌数不成平行关系。该小鼠为菌苗免疫机理的探讨提供了模型。     

鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗浓度测定通用参考品的研制

目的将现用鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗3套浓度测定参考品整合成一套通用参考品。方法确定通用参考品吸光度值,从3套鼠疫、布氏菌及炭疽疫苗浓度测定用参考品共9个浓度中选取代表性3个浓度参考品;利用现用3种活疫苗浓度测定用参考品的线性方程,计算通用参考品所代表各种疫苗的浓度;制备参考品并进行质量控制;观察参考品的长期稳定性;组织3个实验室进行协作验证。结果确定通用参考品吸光度值为0.350、0.494、0.665;确定通用参考品所代表各种疫苗浓度;完成通用参考品的制备,各项检定符合规定;对4℃冷藏保存参考品进行稳定性研究,变异系数小于2.0%;经3个实验室协作验证,各实验室使用2种参考品的测定结果误差均小于2.0%。结论在现有参考品的基础上整合成一套鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗分光光度法浓度测定通用参考品,并为以后建立分光光度法细菌浓度测定通用参考品奠定基础。     

胰岛素笔注射针头更换频次的现状调查

为调查糖尿病患者胰岛素笔注射针头更换频次现状及其相关影响因素,对130例糖尿病住院患者在入院前应用胰岛素笔注射更换针头频次情况及其相关影响因素采用问卷调查。结果表明,胰岛素笔注射不更换针头现象普遍,60.2%的患者每周更换1次,30.1%患者每支笔芯更换1次,仅有6.3%是一次性使用,3.3%不定时更换,不更换针头的原因与注射针头价格、患者病程、文化程度、接受教育频率等因素相关(P<0.05)。结论:在我国糖尿病患者中约30%在接受胰岛素治疗。尽管及时使用胰岛素可提高血糖达标率已成为全球医生的共识,但我国的糖尿病达标率仍只有四分之一,而且已经使用胰岛素的患者血糖达标率只有37%,患者对注射技术掌握不到位可能是一个重要的原因。糖尿病患者重复使用胰岛素注射针头现象严重,糖尿病患者健康教育有待加强。