乙型肝炎病毒X蛋白相关lncRNA NEAT1促肝癌增殖和转移的研究北大核心CSCD

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)相关lncRNA NEAT1表达与肝癌患者临床特征及预后的关系,及其对肝细胞癌(HCC)增殖和转移的影响。方法从本院行肝切除术的肝癌患者的标本中收集肝癌组织和相应的邻近非肿瘤肝组织各125份。构建稳定转染HBx基因的HepG2细胞和相应阴性对照,采用微阵列分析鉴定HBx差异调控的lncRNAs。采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和HCC细胞中NEAT1的表达,MTT法测定细胞增殖,Transwell分析细胞迁移和侵袭能力。通过功能获得和功能丧失试验确定NEAT1/miR-128-3p在HCC细胞迁移和侵袭中的作用。结果微阵列分析显示,NEAT1在稳定转染HBx基因的HepG2细胞上调。NEAT1与HBx/HBV相关,并在体外和体内HCC中上调。临床病理分析表明,NEAT1与肝血管浸润、不良肿瘤分化和HBV感染显著相关(P<0.05),并且NEAT1在HCC组织中过表达与患者预后不良相关(P<0.05)。亚组生存分析表明,HBV阴性HCC患者的预后较好(P<0.05),而HBV+/NEAT1+亚组患者的预后较差(P<0.05)。体外试验证实,NEAT1过表达显著促进HepG2增殖(P<0.05),并增强细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);NEAT1敲除显著抑制Hep3B增殖(P<0.05),并降低细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因试验证实NEAT1靶向miR-128-3p,且miR-128-3p在很大程度上逆转NEAT1对HCC细胞迁移和侵袭能力的作用。结论 NEAT1通过竞争结合miR-128-3p作为ceRNA,促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

两种免疫分析法检测乙型肝炎的分析

目的 探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRF)和荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR)检测乙型肝炎(下称乙肝)的临床意义.方法 用TRF法检测乙肝两对半,用FQ-PCR法检测HBV-DNA.结果 不同的乙肝两对半模式有不同的阳性检出率.结论 FQ-PCR能反映 HBV真实感染和复制状态,更有利于临床治疗和疗效观察.     

自身抗体及生化指标在原发性胆汁性肝硬化诊断中的应用

目的探讨自身抗体联合生化指标在原发性胆汁性肝硬化诊断中的价值。方法选取2017年1-12月在成都大学附属医院已确诊的原发性胆汁性肝硬化患者41例(PBC组),病毒性肝炎患者65例(病毒性肝炎组),体检健康者50例(健康对照组)作为研究对象。采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(ASMA)和抗肝肾微粒体抗体(LKM),免疫印迹法检测抗线粒体抗体M2(AMA-M2)、2-酮酸脱氢酶复合体(M2-3E,又名BPO)、肝肾微粒体抗体(LKM-1)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP)、抗肝细胞溶质抗原1型(LC-1)抗体。全自动生化分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)和胆汁酸(TBA)等肝功生化指标并进行统计学分析。结果 PBC组ANA阳性率为97.50%,荧光核型分别为胞浆颗粒型56.10%、核颗粒型21.95%、着丝点型7.32%、核膜型7.32%和核点型4.88%。PBC组ANA及AMA阳性率高于病毒性肝炎组和健康对照组,差异有统计学意义(χ2ANA=83.12、79.35,χ2AMA=58.61、54.58,P0.05)。PBC组AMA-M2、M2-3E检出率分别与病毒性肝炎组、健康对照组比较差异有统计学意义(χ2AMA-M2=71.93、63.14,χ2M2-3E=78.77、69.36,P0.05)。PBC组GGT、ALP水平显著高于病毒性肝炎组,差异有统计学意义(UGGT=492.50,UALP=300.50,P0.05)。结论 PBC患者可检测出AMA、AMA-M2、M2-3E等自身抗体,尤其是AMA-M2与M2-3E联合检测并且生化肝功指标升高,有助于疾病早期诊断。     

浓度对数和Ct值在HBV-DNA定量检测室内质控中的应用

目的探讨浓度对数和Ct值两种参数在乙肝病毒-脱氧核糖核酸（HBV—DNA）定量检测室内质控中的应用。方法分别以室内质控品浓度对数和Ct值的均值、标准差绘制Levery—Jennings质控图。结果以质控品浓度对数为参数分析质控结果时出现22S失控;而以Ct值为参数分析质控结果时未发现失控。结论以质控品浓度对数为参数分析室内质控较Ct值更为敏感。能更好地保证HBV-DNA定量检测的质量。     

多台血液流变学仪器比对实验的研究

目的通过对同一项目不同仪器检测结果进行分析，以了解不同仪器检测结果的准确性和结果不一致的可接受限。方法以参加室间质评而且成绩优秀的仪器为参比仪器，其余为待比对仪器，连续10d在3台全自动血液流变学分析仪上测定所有参比项目，每批重复测两次。计算P、回归方程、相关系数和系统误差。结果3台全自动血液流变学分析仪相关系数良好，差异无统计学意义，均在可接受范围内。结论本室3台血液流变学分析仪测定结果的一致性良好，所有项目的结果均可接受。     

MYC和MUC1 mRNA联合检测在乳腺癌诊断中的应用

目的:建立逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测乳腺癌核内原癌基因(nuclear oncogene,MYC)和黏蛋白1(Mucin1,MUC1)基因表达水平,探讨其联合检测在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用。方法:建立RT-PCR反应,并以β2-微球蛋白为内对照测定30例健康女性体检者、52例良性乳腺肿瘤和103例乳腺癌外周血中MYC和MUC1的表达量。结果:外周血中MYC和MUC1在乳腺癌组表达率显著高于良性乳腺疾病组及健康体检组,而良性乳腺疾病组和健康体检组的表达率无差异。MUC1和MYC联合检测的特异性显著高于单一基因。结论:RT-PCR联合检测外周血MUC1和MYC基因表达,可提高对乳腺癌诊断的特异性,具有标本来源容易、操作简便和价格便宜等优点,可有效辅助诊断乳腺癌。