泛素羧基末端水解酶L1在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及其抗氧化作用

背景 氧化损伤是年龄相关性白内障发生的主要原因,而泛素蛋白酶系统参与晶状体的分化发育,研究发现其关键酶泛素羧基末端水解酶L1( UCHL1)参与帕金森病和阿尔茨海默病等年龄相关性疾病的发生发展,且与氧化应激有关. 目的 研究UCHL1在年龄相关性白内障发病过程中的作用.方法 收集24例单纯年龄相关性白内障患者术后获得的晶状体囊膜(皮质性白内障12例、核性白内障12例)、5例正常人晶状体前囊膜上皮和人晶状体上皮细胞(LECs)系SRA01/04细胞,采用免疫荧光法检测UCHL1在各组人晶状体前囊膜上皮细胞中的表达情况.构建UCHL1真核表达质粒,鉴定后采用脂质体转染法转染SRA01/04细胞作为UCHL1过表达组,同时采用绿色荧光蛋白(GFP)真核表达质粒转染SRA01/04细胞作为GFP过表达组,使用梯度过氧化氢叔丁醇(TBHB)处理24h后,采用MTT法检测各组人LECs的活性变化.结果 免疫荧光检测表明,UCHL1在各组人LECs中均有表达,但在正常晶状体囊膜、皮质性白内障以及核性白内障晶状体囊膜上皮细胞表达量的总体差异有统计学意义(F=13.441,P=0.000).皮质性白内障组以及核性白内障组晶状体囊膜上皮细胞中UCHL1的表达量均低于正常晶状体组(P=0.000、0.000),但皮质性白内障组和核性白内障组之间UCHL1的表达量差异无统计学意义(P=0.164).Western blot鉴定结果表明,UCHL1真核表达质粒转染后可见SRA01/04细胞中UCHL1的强表达.MTT检测结果显示,0.3 mol/L TBHB处理24 h后,UCHL1过表达组细胞活性吸光度(A570/630)值与GFP过表达组比较有增高的趋势,而0.2、0.4、0.5 mol/LTBHP均导致SRA01/04细胞的耐受或者大量凋亡. 结论 UCHL1具有抗氧化作用,且可能在年龄相关性白内障的发生发展过程中起抑制作用.     

年龄相关性皮质性白内障波形蛋白基因外显子突变的研究

目的探讨波形蛋白(vimentin)基因外显子序列突变与年龄相关性皮质性白内障的关系。方法选择年龄相关性皮质性白内障患者110例(病例组)及同一地区正常对照100例(对照组)进行以医院病例资料为基础的对照研究。以外周血基因组DNA为模板,通过PCR扩增vimentin基因全部外显子,并将PCR产物纯化后测序。测序结果与GenBank公布的vimentin基因正常序列比对。结果病例组的血尿酸含量为(344.00±79.91)μmol·L-1较对照组(309.00±72.75)μmol·L-1显著增高(P=0.001),病例组的血肌酐含量为(59.20±13.57)μmol·L-1较对照组(55.24±13.61)μmol·L-1增高(P=0.04);2组测序结果显示vimentin基因全部外显子序列中,并未发现突变。结论年龄相关性皮质性白内障的发病机制与vimentin基因外显子序列突变无关,其致病基因有待进一步试验确定。     

氧化应激调节泛素羧基末端酯酶L1在人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞株中的表达

目的在梯度过氧化氢叔丁醇(tert-butyl hydroperoxide,TBHB)氧化应激情况下,研究泛素羧基末端酯酶L1(ubiquitin car-boxyl-terminal hydrolase L1,UCHL1)和波形蛋白(Vimentin)在人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞株中表达趋势。方法将SRA01/04细胞分为对照组和梯度处理实验组共四组,使用0.10、.5和1 mol.L-1过氧化氢叔丁醇(tert-butyl hydroperoxide,TB-HB)处理人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞03,,6和12 h,采用RT-PCR检测UCHL1和Vimentin在不同时间点的表达情况。结果在0.5 mol.L-1TBHP作用下,UCHL1在SRA01/04细胞中的表达在3 h时降低,6 h时升高,而在12 h时降低;而Vimen-tin在不同浓度TBHP处理的各个时间点表达均无变化(该实验独立重复三次)。结论氧化应激调节UCHL1在人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞株中的表达,提示UCHL1可能在维持细胞内环境稳定和氧化应激中起重要作用。     

围术期长期血糖控制对糖尿病SD大鼠术后伤口愈合的对比研究

目的通过观察糖尿病大鼠伤口愈合期间血清中肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和局部巨噬细胞浸润程度以及成纤维细胞数量,探讨长期血糖控制是否可明显改善糖尿病大鼠术后的伤口愈合。方法 a)创建糖尿病大鼠伤口模型,A组:正常大鼠;B组:术前血糖控制1d;C组:术前血糖控制3d;D组:术前血糖控制7d;E组:术前血糖控制1个月。采用相同术式制作相同大小的伤口进行对照分析。五组分别于造模后的第1天、3天、7天、14天(每个时间段3只)心脏采血并切取伤口组织样本,ELISA检测血清中TNF-α、IL-6水平,免疫组织化学染色观察伤口创面中巨噬细胞和成纤维细胞数量。b)糖尿病大鼠造模前后均使用中效胰岛素降低血糖水平,观察上述指标变化。结果 a)与对照组相比较,实验糖尿病组的伤口愈合均出现了延迟。在伤口造模后的早期阶段,围术期内控制血糖组(B、C、D组)局部巨噬细胞数量明显偏低(P0.05),后期巨噬细胞数量明显增多(P0.05)。b)实验组组间进行比较后发现,局部巨噬细胞和成纤维细胞浸润程度,E组较B、C、D组能够明显改善伤口愈合情况。c)与对照组相比较,实验组血清中TNF-α和IL-6的表达均较高。在切口愈合的早、中期阶段,E组血清中TNF-α和IL-6的表达较B、C组明显低,但与对照组间仍存在有差异性(P0.05)。结论糖尿病大鼠伤口愈合过程中易发生持续性炎症反应且不易消退,并且这种炎症反应发生较迟,术前长期控制血糖较短期内控制能够进一步提升伤口的愈合率,但和正常大鼠相比,仍然有伤口不愈合的风险。     

胫骨平台骨折合并软组织损伤的诊断与治疗

背景　胫骨平台骨折常合并膝关节周围软组织损伤,如果在正确、及时治疗胫骨平台骨折的基础上,对其合并的软组织损伤早期诊断、治疗,不仅可以帮助患者减轻痛苦,还可以最大限度帮助患者恢复患肢功能,提高其生活质量。目的　探讨胫骨平台骨折合并软组织损伤诊断和治疗的策略。方法　选择2014年4月-2017年9月在山西医科大学第二医院住院治疗的胫骨平台骨折合并软组织损伤患者82例为研究对象,并根据Schatzker分型情况分为6种类型。记录患者术前一般资料、围术期指标、软组织损伤分布情况及多处软组织损伤情况,并进行比较。结果　本次调查患者延迟诊断及漏诊的发生率为30.5%（25/82）。Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ型骨折的手术时长多于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型骨折,Ⅵ型骨折的出血量多于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型骨折（P<0.05）。40例患者发生多处（2处及以上）软组织损伤,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型多处软组织损伤率比较,差异无统计学意义（P=0.574）。患者均在术后4~8个月骨性愈合,下肢力线基本正常。美国特种外科医院膝关节评分（HSS评分）：26例为优,29例为良,26例为可,1例为差,优良率为67.1%。结论　胫骨平台骨折合并软组织损伤延迟诊断及漏诊率较高,要给予高度重视,早期诊断、早期治疗软组织损伤,尽量避免造成患肢运动、感觉障碍,甚至截肢的严重后果。     

UCHL1基因多态性中的S18Y异构体与年龄相关性白内障发病机制的相关性

目的：研究泛素羧基末端酯酶L1(UCHL1)的基因多态性异构体S18Y在年龄相关性白内障发病机制中的作用。

方法：采用病例对照研究的方法,使用聚合酶链式反应(PCR)分别扩增白内障组(242例)和正常人组(144例)血液中UCHL1基因,测序后分析S18Y异构体的基因频率。

结果：UCHL1-S18Y的基因多态性在等位基因(P=0.746)和基因型频率(P=0.813)上没有统计学差异; 二元Logistic回归模型分析显示年龄在两组间具有统计学意义(P<0.001),将年龄和性别作为混杂因子校正后计算UCHL1的S18Y等位基因中(腺嘌呤)A-携带者的OR比值比和95%置信区间(95% CI),结果显示(腺嘌呤)A-携带者在两组间无统计学差异(P=0.818)。

结论：本研究提示UCHL1-S18Y的基因多态性在年龄相关性白内障发生发展过程中没有起到显著作用或者保护作用。     

乳腺癌术后中西医结合治疗的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。目前,手术仍然是治疗乳腺癌的首选方式,术后辅以化疗、放疗、内分泌治疗等。上述西医治疗虽可延长患者生命,但手术创伤大、辅助治疗时间长,患者承受并发症和副反应的身心压力大。祖国医学博大精深,在缓解乳腺癌术后上肢水肿、预防及治疗术后皮瓣坏死、缓解胃肠道反应及骨髓抑制、缓解类更年期综合征及骨质疏松等方面有独特造诣,若能将中西医结合治疗,则可有效地降低乳腺癌术后西医治疗带来的并发症和副反应。针对西医治疗乳腺癌的方式及原理、中医治疗缓解术后并发症、减缓放化疗及内分泌治疗带来的副反应的进展,本文对乳腺癌术后中西医结合治疗的研究进展作一综述,旨在提高临床医师对乳腺癌术后中西医结合治疗的认识,加强中西医结合治疗的力度,进而提升乳腺癌患者术后的生活质量。