重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的: 构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链, 制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb).方法: PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因, 限制性酶切消化后, 定向克隆于真核表达载体pcDNA3, 构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ.重组载体转染COS7细胞后, SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达.用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠, 取脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆.结果: 成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体, SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达.杂交瘤细胞经筛选与鉴定, 获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株, Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性.结论: 构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链.并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb.为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础.     

降糖药物在肝硬化合并糖尿病患者中应用的临床证据

<正>卵巢癌（ovarian cancer,OC）是女性第七位常见的恶性肿瘤,同时在癌症死亡原因中排名第八。最新统计显示,2020年美国OC的死亡病例数约14000,其死亡率居妇科恶性肿瘤之首,严重威胁女性生命健康。OC起病隐匿,发现时多属晚期以及预后较差是其公认的特点。目前针对OC的治疗方式以手术切除病灶和铂类药物化疗为主,尽管手术方法与化疗方案不断改进,仍有部分患者会产生耐药、复发进而死亡,导致OC的5年生存率低于45%[1]。     

国医大师卢芳应用泌感汤治疗肾盂肾炎临床经验

国医大师卢芳认为,肾盂肾炎的病因病机为邪犯足太阳膀胱经,热与湿结,邪由经入腑,膀胱气化不利,气机受阻,久病及肾,膀胱湿热则害肾,引起肾虚,卫外不固,故易反复发作.针对此病因病机,卢老采用清热解毒,活血祛湿的治疗原则,并以泌感汤治疗此病,取得较好临床效果.     

免疫球蛋白G4相关硬化性胆管炎2例

1 临床资料 病例1 ,男, 72岁,因"黄疸、乏力纳差1 +月,呕血3小时"于2017年12月13日入院.既往有高血压、痛风、脑梗死病史,10 +年前行胆囊切除术,个人史无特殊.入院前患者于外院完善上腹部增强MRI及MRCP显示肝内外胆管扩张,胆总管胰头段明显狭窄,局部壁增厚,胰腺广泛增大、实质肿胀欠均匀.入院查体:...     

补肾活血汤对子宫内膜异位症大鼠Nrf2/Keap1通路的调节作用研究

[目的]研究补肾活血汤对子宫内膜异位症大鼠Nrf2/Keap1通路的调节作用.[方法]90只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血汤低、中、高剂量组及达那唑组,15只/组.采用自体子宫内膜移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,补肾活血汤低、中、高剂量组按照2.5、5、10 g/kg灌胃给予补肾活血汤,达那唑组给予达那唑(0...     

厚朴超临界CO_2提取工艺优化及提取物抗氧化活性研究

目的优选超临界CO_2提取厚朴有效成分的工艺并探讨厚朴超临界CO_2提取物的抗氧化活性。方法采用HPLC法测定厚朴超临界CO_2提取物中厚朴酚与和厚朴酚的含量,正交试验优选厚朴超临界CO_2提取工艺,MTT法检测提取物抗氧化活性。结果厚朴酚优化工艺为萃取压力25 MPa,萃取温度55℃,CO_2用量30 kg;和厚朴酚最佳提取工艺压力15 MPa、萃取温度50℃、CO_2用量25 kg。厚朴超临界CO_2提取物具有抗氧化活性,且分离参数不同,抗氧化活性有显著差异。结论在所优选的提取工艺条件下,厚朴酚、和厚朴酚的提取效率较高,重复性较好,工艺稳定可行,提取物具有良好的抗氧化活性。     

自拟乳验方治疗肝郁痰凝型乳腺增生症临床研究

目的:研究自拟乳验方联合他莫昔芬治疗肝郁痰凝型乳腺增生症(HMG)临床疗效。方法:将78例肝郁痰凝型HMG患者随机分为治疗组和对照组,每组各39例,对照组给予他莫昔芬治疗,治疗组在对照组基础上加用自拟乳验方治疗。1个月经周期为1疗程,治疗2疗程后观察中医证候积分(乳房疼痛、乳房肿块大小、乳房肿块质地)、雌二醇(E_2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)水平的变化及不良反应发生情况。结果:2组临床疗效对比,差异有显著性(P0.05);治疗后2组乳房疼痛积分、乳房肿块大小积分及乳房肿块质地积分均降低,但治疗组改善优于对照组(P0.05);治疗后2组患者血清E_2、PRL水平均降低,P水平均升高,但治疗组改善E_2、P、PRL分泌的疗效优于对照组(P0.05);治疗组较对照组的不良反应发生率低。结论:自拟乳验方联合他莫昔芬治疗具有明显改善乳房疼痛及乳房肿块的作用,并能有效调节患者血清性激素水平,不仅疗效确切,还可降低西药他莫昔芬的不良反应发生。     

米诺环素对缺血性脑卒中血脑屏障重塑的影响及其机制

目的探索米诺环素（minocycline,MC）对大鼠局限性脑缺血再灌注后血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）重塑及神经保护的作用机制及影像可视化。方法48只SD大鼠随机分为4组：早期给药组、晚期给药组、生理盐水组及假手术组,每组12只。其中早期给药组于手术后即刻尾静脉注入MC（3 mg/kg）;晚期给药组于拔线后恢复再灌注6 h后大鼠尾静脉注入MC（3 mg/kg）;生理盐水组于再灌注即刻注入相同体积的生理盐水;假手术组除了不插入线栓外,其余处理同生理盐水组。再灌注24 h后进行神经功能评分,并采用HE、免疫组化、Western blot、免疫荧光及磁共振成像等方法观察MC对脑缺血再灌注后BBB重塑的影响及影像学改变。结果缺血再灌注24 h后各组神经功能缺损评分差异有统计学意义（P<0.001）,其中生理盐水组神经功能缺损评分高于给药组;早期给药组神经功能缺损评分低于晚期给药组。磁共振图像显示各组最终梗死体积差异有统计学意义（P<0.001）。早期给药组及晚期给药组梗死体积显著小于生理盐水组,早期给药组小于晚期给药组,假手术组未显示梗死灶。给药组脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、CD11b的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组脑组织中转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、YM1、RECA-1、PDGFR-β的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。给药组血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组。Western blot结果显示给药组IL-1β、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、TNF-α的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组claudin-5、occludin、ZO-1、IL-10、TGF-β和YM1的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。结论MC可有效减轻缺血再灌注损伤促发BBB重塑,立即给药对神经功能障碍的改善作用更明显。     

执行《中国药典》2010年版中药材与饮片标准所遇到的问题及建议

《中国药典》作为国家监督管理药品质量的法定技术标准,是药品生产、经营、管理和检验的法定依据。《中国药典》2010年版已实施三年多了,对保证药品质量,规范药品标准起到了重要作用。笔者在日常检验中,发现中药材和饮片有些质量标准的制定不尽合理,有些标准的制定尚未考虑人力、物力及操作可行性。就以下问题谈几点商榷意见和建议,供再版时参考。     

Ⅰ型马德龙病1例报告及文献复习

<正>马德龙病(Madelung’s Disease)是一种良性多发性对称性脂肪瘤病,多发生于地中海地区,亚洲地区发病率最低,且好发于中老年肥胖男性,多呈散发^[1]。主要以大量无包膜脂肪团块对称性聚积在皮下筋膜浅层或深层,常累及颌面、颈项、上臂、上背及胸部等部位为典型特征的罕见疾病。该病主要影响颈项面部外观及活动,部分患者可因压迫气管及食管,出现声嘶,呼吸、吞咽困难。可合并有肝功能异常、高尿酸血症、高血脂症、男性乳房发育、神经病变、