低频旋转永磁场对人体表面热分布和血压及心率的影响

目的 探讨低频旋转永磁场对人体表面热分布、血压及心率的影响.方法 分别于磁场干预前后对25名志愿者进行红外热像、血压及心率检查.采用自身对照和组间对照的方法,分析红外热像图、血压及心率的变化,考察0.4T低频旋转永磁场对人体表面热分布、血压、及心率的影响.结果 正常人体表面热分布表现为中央温度较高、周边温度较低且左右对称的类正态分布特点;局部功能或器质改变的人体,表现出现局部过热或过凉的现象.0.4T低频旋转永磁场可以影响人的血压及心率,改善人体表面热分布,使患者异常的人体表面热分布趋于正常.结论 人体表面热分布与环境温度及人体健康状况有关,0.4 T低频旋转永磁场可以影响人的血压、及心率,改善人体表面热分布状态,促使异常人体表面热分布趋于正常.     

紫杉醇诱导的人白血病CCRF-CEM多药耐药细胞模型的建立

目的建立稳定的紫杉醇(paclitaxel)诱导的人肿瘤多药耐药细胞系,并对其生物学特点进行评价。方法用亚致死浓度(1/50IC50值)的紫杉醇连续诱导对化疗药物敏感的人急性T淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞,使其成为对紫杉醇耐药的CCRF-CEM/paclitaxel细胞,同时观察CCRF-CEM/paclitaxel细胞对柔红霉素(daunorubicin)和长春碱(vinblastine)的交叉耐药;用相应的单抗和FITC标记的二抗与细胞孵育后,用流式细胞仪分别检测细胞表面和细胞总P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺癌耐药相关蛋白(LRP)等表达水平的变化,并用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果CCRF-CEM/paclitaxel细胞传至第90代时,对紫杉醇产生了耐药,耐药倍数约为256.4倍;同时对柔红霉素和长春碱也产生了耐药,耐药倍数约为9.8和2.0倍。与CCRF-CEM细胞比较,CCRF-CEM/paclitaxel细胞表面P-gp和细胞总P-gp表达分别升高了18.8和14.4倍,MRP1和LRP分别升高了2.1和1.2倍;S期细胞比例由(48.3±1.2)%降低至(23.8±0.5)%,细胞凋亡百分率由(7.82±0.19)%减少至(2.47±0.37)%。结论成功建立了稳定的紫杉醇诱导的人CCRF-CEM/paclitaxel多药耐药细胞模型,该模型具有一般肿瘤多药耐药细胞的生物学特点。     

高原中枢性睡眠呼吸暂停的动态监测

目的 观察不同条件下急进高原人员发生高原中枢性睡眠呼吸暂停(central sleep apnea,CSA)的特点规律,初步探讨CSA的发生程度与特征性生理指标变化之间的关系. 方法 12名男性健康受试者,分为预习服组、供氧组和对照组,每组各4人.所有受试者急进3800 m高原环境,低氧环境暴露48d.预习服组:进驻高原前10 d,在常压低氧舱内进行连续10d(每天210 min)的阶梯式低氧暴露训练;供氧组:进入高原后前10 d,受试者实施阶梯式低氧暴露方案;对照组:不做任何措施进入高原.试验过程中,用微动敏感床垫式睡眠监测设备对受试者进行中枢性睡眠呼吸暂停监测,并对受试者的红细胞计数、血红蛋白水平进行测量. 结果 ①高原低氧环境暴露的48 d内,12名受试者CSA指数均值先呈上升趋势,第18天升高至最大值9.62次/h,之后呈下降趋势,第48天降低至2.72次/h;CSA的发生率不断上升,到第16天达到最大值(41.67％),然后不断下降,到第48天达到8.33％.②低氧暴露前10 d,与对照组比较,预习服组和供氧组受试者CSA发生率降低(x2=12.984、12.984,P＜0.01);预习服组和供氧组CSA指数均值小于1次/h,对照组CSA指数均值均大于1次/h.③受试者CSA指数均值与红细胞、血红蛋白浓度变化率呈显著正相关(r=0.747、0.934,P＜0.01). 结论 阶梯式低氧暴露措施可明显提升睡眠质量;CSA可作为人体高原低氧环境习服或慢性高原病发生程度的评价指标之一.     

中药材秦艽主要吸收成分群研究

该研究通过制备大鼠外翻肠囊模型,并对其转运活性进行了确认,以秦艽中的马钱苷酸、当药苦苷、龙胆苦苷、以及当药苷为检测指标,用HPLC对经肠囊主动转运吸收后被吸收进入浆膜层的秦艽提取物中的主要成分群进行了分析,探讨了中药材主要吸收成分群的研究方法。结果表明所采用的大鼠外翻肠囊模型,在实验45 min内,组织结构完整,转运活性良好;HPLC的专属性和线性关系良好,精密度的RSD<5.5%;样品的萃取回收率均在90%以上;在室温条件下,样品的稳定性良好。秦艽提取物经肠囊主动转运后,在浆膜液样品中,检测到了8种主要成分;提取物的浓度对主要成分的吸收具有极其显著影响,而不同肠段对主要成分吸收的影响没有显著差异。由此可见,大鼠外翻肠囊技术可用于某些中药材的吸收成分群的研究,是一种探讨中药材活性成分的有效方法。     

线粒体Prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF-CEM

目的：研究线粒体prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF-CEM细胞中的表达变化，探讨线粒体prohibitin蛋白在CCRF-CEM肿瘤细胞耐药发生机制中的作用。方法：提取紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞的线粒体总蛋白，对经双向电泳分离后得到的SDS-PAGE胶用ImageMaster§TM 2D Platinum software进行分析、比对，对胶上的蛋白点进行质谱分析，通过SWISS-PROT和NCBInr数据库鉴定蛋白的归属。结果：紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞中的线粒体prohibitin Protein15表达升高了68.6%（以蛋白表达的体积计）。结论：紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞中线粒体prohibitin表达增加。prohibitin可能通过调节线粒体的活动，对抗紫杉醇诱导的细胞凋亡，在耐药机制中发挥重要作用。     

线粒体Prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF-CEM细胞中表达的变化

目的：研究线粒体prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF—CEM细胞中的表达变化，探讨线粒体prohibitin蛋白在CCRF—CEM肿瘤细胞耐药发生机制中的作用。方法：提取紫杉醇耐药的CCRF—CEM／taxol细胞的线粒体总蛋白，对经双向电泳分离后得到的SDS—PAGE胶用ImageMaster^TM 2D Platinum software进行分析、比对。对胶上的蛋白点进行质谱分析，通过SWISS—PROT和NCBInr数据库鉴定蛋白的归属。结果：紫杉醇耐药的CCRF—CEM／taxol细胞中的线粒体pmhibitin Protein15表达升高了68．6％（以蛋白表达的体积计）。结论：紫杉醇耐药的CCRF—CEM／taxoI细胞中线粒体prohibitin表达增加。prohibitin可能通过调节线粒体的活动，对抗紫杉醇诱导的细胞凋亡，在耐药机制中发挥重要作用。     

pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达

目的：摸索真核细胞翻译启动因子5A（eIF5A）编码基因的合成、pcDNA3．1／eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达。方法：用PCR合成eIF5A基因，将基因分别接在克隆载体pMD18-T的EcoR V多克隆位点上和真核表达载体pcDNA3．1的Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ的多克隆位点之间，构建eIF5A基因的克隆载体和真核表达载体，分别在大肠杆菌E．coli DH5α中转化并提取质粒，将真核表达载体pcDNA3．1／eIF5A的质粒提取后，用脂质体包合并转染真核细胞CCRF-CEM，用流式细胞仪对eIF5A的表达水平进行检测。结果：eIF5A在CCRF-CEM细胞中的表达水平为107．03，eIF5A在转染细胞CCRF-CEM／trans中的表达水平为114．27，表达升高。结论：本实验构建了pcDNA3．1／eIF5A真核表达载体，发现其在CCRF-CEM细胞中高表达。本实验结果将有助于探讨肿瘤治疗过程中的新靶标。