丙型肝炎病毒基因NS5区酶切分型研究

目的：了解丙型肝炎病毒（HCV）感染的基因型及其与临床的关系。方法：用逆转录套式聚合酶链反应（RT－PCR）和限制性片断长度多态性（RFLP）分析的方法,对78例HCV感染患进行HCV NS5区基因分型。结果：HCV1b型感染71例（91％）,HCV2a型7例（9％）,未发现其它基因型;丙型肝炎患有无输血史,是否重叠HBV感染,其基因分型构成比均无显性差异（P＞0．05）;1b型HCV血清ALT异常（63．4％）明显多于2a型（14．3％）（P＜0．05）。结论：本组HCV感染的基因型多数为1b型,少数为2a型,1b型更易致肝细胞损伤,并可能与活动性肝病有关。     

反义基因对肝癌血管内皮生长因子表达的抑制

原发性肝细胞癌(HCC)的生长很大程度上依赖新生血管的形成。抑制肿瘤血管的形成，特别是肿瘤血管形成调控因子血管内皮生长因子(VEGF)的基因治疗是近年HCC治疗研究的新方向。本文通过实验方法探讨不同序列的反义寡核苷酸(ODN)对VEGF表达的抑制效应，为今后肝癌VEGF的基因治疗提供实验基础。     

野生型XPD转染对胆管癌QBC939细胞生物学行为的影响

目的:探讨野生型XPD基因对人胆管癌QBC939细胞的生物学影响. 方法:用碱裂解法提取空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD,提取出的质粒以KPNⅠ、BGIⅡ和SPHⅠ酶切鉴定.实验分4组,重组质粒pEGFP-N2-XPD组、空载质粒pEGFP-N2组、脂质体组,并用具有相同遗传背景和代数的QBC939细胞作为空白对照.用脂质体转染法瞬时转染四组细胞.荧光显微镜下观察转染后绿色荧光蛋白报告基因表达情况.提取各组细胞总RNA,合成cDNA,用聚合酶链反应(PCR)检测4组细胞中XPD、p53、cyclin D1、c-myc表达情况.并用四甲基偶氮唑盐(MTT)和流式细胞仪检测细胞增殖及其细胞周期的变化. 结果:pEGFP-N2-XPD细胞与pEGFP-N2、脂质体组和空白对照组相比,XPD mRNA表达量明显增加(0.778±0.018 vs 0.561±0.039,0.544±0.035,0.542±0.034,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞中p53 mRNA相对表达量与pEGFP-N2、脂质体组和空白对照组比较具有统计学意义(0.421±0.019 vs 0.256±0.014,0.267±0.015,0.274±0.018,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞与其他组相比,cyclin D1 mRNA相对表达量明显降低(0.339±0.041 vs 0.560±0.039,0.558±0.050,0.560±0.041,均P<0.01).pEGFP-N2-XPD细胞与其他组相比,c-myc mRNA相对表达量明显降低(0.355±0.045 vs 0.570±0.075,0.560±0.041,0.537±0.050,均P<0.01).流式细胞仪检测pEGFP-N2-XPD组细胞周期G1期为81.65%,S期为11.83%,其他组G1期分别为65.54%、56.61%、63.26%;S期分别为24.10%、29.52%、27.28%,结果具有统计学意义(P<0.05).MTT检测示pEGFP-N2-XPD细胞生长率为0.249±0.02,与其他组相比,细胞增殖力明显减弱(P<0.01). 结论:野生型XPD基因可以抑制胆管癌细胞的生长,XPD基因可抑制c-myc、cyclin D1基因的表达,增加p53基因表达.     

灯盏细辛治疗肝硬化的疗效观察

目的：探讨灯盏细辛治疗肝硬化的临床疗效。方法：136例肝硬化患者随机分为两组：治疗组70例和对照组66例。治疗组采用灯盏细辛治疗；对照组采用一般支持治疗。结果：治疗组治疗后肝功能明显改善（P〈0．05），对照组治疗前后血清白蛋白及胆红素无明显改变（P〉0．05）；治疗组治疗后肝纤五项明显下降（P〈0．05），对照组治疗前后改变不明显（P〈0．05），肝纤五项两组治疗后相比，有显著性差异（P〈0．05）。结论：灯盏细辛可明显改善肝脏功能，降低肝脏纤维化，对肝硬化的治疗具有良好的前景。     

结肠息肉癌变相关因素探讨

目的：探讨结肠息肉癌变的临床相关因素.方法：回顾性分析416例结肠息肉的临床相关资料.结果：（1）416例结肠息肉患者癌变42例（10.1%）,其中腺瘤性息肉癌变率高（20.0%,37/154）;非腺瘤性息肉癌变率低（1.9%,5/262）,两者相比存在显著性差异（P＜0.01%）.（2）结肠息肉癌变与年龄（≥40岁）、息肉直径（≥1.0 cm）有关（P＜0.05）,而与息肉所在的部位无关（P＞0.05）.结论：结肠息肉癌变与息肉的病理类型、息肉的大小及患者年龄密切相关,临床上对结肠息肉均应进行病理活检,并加以彻底治疗.     

糖尿病继发感染的C—反应蛋白水平及其临床意义

目的 探讨糖尿病继发感染后血清Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）水平变化，评价ＣＲＰ作为糖尿病继发感染的早期诊断价值。方法 采用速率散射比浊法，检测４７例糖尿病继发感染患者感染前后及感染控制后血清ＣＲＰ浓度。结果 继发感染前后及感染控制前后血清ＣＰＲ浓度有显著性差异（Ｐ〈０．０１），继发感染后血清ＣＲＰ浓度明显高于感染前，而感染控制后血清ＣＲＰ浓度则明显降低。结论 血清ＣＲＰ水平变化与有无感染密切相关。动态观     

PUMA/ASPP1双抑癌基因对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的探讨p53正向细胞凋亡调控因子(p53up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA)/p53促凋亡蛋白(apoptosis stimulating protein of p53,ASPP)1融合基因及单个基因对胃癌SGC-7901细胞的杀伤作用。方法通过脂质体(lipofectamine)2000TM将PUMA/ASPP1融合基因及PUMA、ASPP1单个基因分别转染胃癌SGC-7901细胞系[实验设5组,分别为胃癌细胞无转染空白对照(SGC-7901)组,空载质粒转染细胞对照(SGC-7901-pcDNA3.1)组以及重组ASPP1质粒转染细胞实验(SGC-7901-ASPP1)组、重组PUMA质粒转染细胞实验(SGC-7901-PUMA)组、重组PUMA/ASPP1质粒转染细胞实验(SGC-7901-PUMA/ASPP1)组],再次经G418筛选,获得稳定表达融合基因SGC-7901-PUMA/ASPP1细胞株。通过MTT法及使用流式细胞仪测定各组胃癌SGC-7901系细胞的存活数(光吸收度即A值)及细胞周期。结果 SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3.1组A值比较差异无统计学意义(P>0.05);SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA组和SGC-7901-PUMA/ASPP1组A值明显低于SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3.1组(均P<0.01);SGC-7901-ASPP1组、SGC-7901-PUMA组和SGC-7901-PUMA/ASPP13组中,SGC-7901-PUMA/ASPP1细胞组A值最低(P<0.01)。与SGC-7901组、SGC-7901-pcDNA3.1组比较,SGC-7901-ASPP1、SGC-7901-PUMA、SGC-7901-PUMA/ASPP1组的G1期明显增多,S期明显减少,尤以SGC-7901-PUMA/ASPP1组S期减少为甚(均P<0.01);SGC-7901-pcDNA3.1组与SGC-7901组比较G1期、S期差异无统计学意义(P>0.05)。结论双抑癌基因可有效抑制胃癌SGC-7901系细胞增殖,双抑癌基因较单个抑癌基因具有更强的抗肿瘤作用。     

双自杀基因CD+TK对胰腺癌BxPC-3细胞的影响

目的探讨逆转录病毒介导的双自杀基因对胰腺癌BxPC-3细胞的杀伤作用及胰腺癌的基因治疗方法。方法通过脂质体将含有双自杀基因的逆转录病毒载体MMLV—CD＋TK导入包装细胞PA317，经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA317／CD＋TK细胞株，收集病毒上清液，浓缩后转染胰腺癌BxPG3细胞系，再次经G418筛选，获得稳定表达双自杀基因的BxPC-3／CD＋TK细胞株。用RT—PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶（5-flourocytosine，5-FC）和（或）无环鸟苷（Ganciciovir，GCV）后，MTT法测定转基因组及未转基因组胰腺癌BxPC-3系细胞的存活率。结果双自杀基因在胰腺癌BxPC-3系细胞中可稳定表达，联合使用5-FC和GCV对细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应效果明显。结论逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死胰腺癌Bx-PC-3系细胞，双自杀基因具有更强的抗肿瘤作用。     

肝硬化合并感染的C-反应蛋白水平及其临床意义

目的　探讨肝硬化合并感染后血清C 反应蛋白 (CRP)水平变化 ,评价CRP作为肝硬化并发感染的诊断价值。方法　采用速率散射比浊法 ,检测 5 8例肝硬化合并感染患者感染前后及感染控制后血清CRP浓度。结果　肝硬化并发感染前后及感染控制前后血清CRP浓度有显著性差异 (P <0 .0 1) ,并发感染后血清CRP浓度明显高于感染前 ,而感染控制后血清CRP浓度则明显降低。结论　血清CRP水平变化与有无感染密切相关 ,动态观察血清CRP水平 ,有助于肝硬化合并感染的早期诊断及抗感染疗效的判断。