抗康柏西普抗体筛选用ELISA检测方法的建立

目的:为评价康柏西普免疫原性,建立一种恒河猴血清中的抗康柏西普抗体检测方法。方法:建立一种以康柏西普为包被蛋白、羊抗人Ig G Kappa light chain抗体为检测抗体的ELISA检测方法,并验证其精密度和专属性。同时运用细胞增殖实验确定阳性样品抗康柏西普抗体的活性。结果:所建立的检测方法最佳包被浓度为5μg·m L-1,检测抗体的最佳稀释倍数为2 500倍。阳性判断阈(cut point)为0.162,批内和批间变异系数均未超过15%。康柏西普浓度在小于10μg·m L-1时对检测无干扰。24个血清样品中,抗康柏西普抗体阳性率为62.5%,HUVEC细胞增殖实验显示无阳性血清具有中和康柏西普生物学活性的能力。结论:经验证,该方法可应用于抗康柏西普抗体的检测,为临床前及临床研究提供支持。     

松龄血脉康胶囊UPLC指纹图谱研究及组分鉴别

目的 建立松龄血脉康胶囊中葛根及马尾松鲜松叶的UPLC指纹图谱分析方法,为其质量评价累积数据.方法 采用RP-HPLC法,以Agilent Eelipse Plus C18 RRHD色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为0.1％甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱时间60 min;检测波长250 nm;体积流量0.2 mL· min-1;柱温30℃;进样量1μL,进行指纹图谱研究.同时通过液相色谱-电喷雾离子阱质谱分析方法鉴别部分成分.结果 建立了松龄血脉康胶囊的指纹图谱,以葛根素为参照峰,确定了28个共有峰,测定了32批样品,样品指纹图谱相似度均大于99％,共鉴别出25个相关成分.结论 所建方法操作简便,分离效果好、稳定性高、重复性好,UPLC法使缩短了检测时间,可应用于松龄血脉康胶囊的质量控制及真伪品鉴别.     

舒肝解郁胶囊的UPLC-MS指纹图谱研究

目的建立舒肝解郁胶囊的UPLC-MS指纹图谱分析方法,为其质量评价积累数据。方法以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱60 min,使用Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm)进行指纹图谱研究,同时通过高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱分析方法鉴定部分成分。结果对其中22个共有峰进行了成分鉴定,对34批舒肝解郁胶囊进行了指纹图谱检测和相似度评价,34批样品的相似度均大于0.960,确立了指纹图谱中的12个特征吸收峰。结论所建立的舒肝解郁胶囊的指纹图谱特征性和专属性强,该方法可用于舒肝解郁胶囊的质量控制。     

马尾松鲜松叶与干松叶的HPLC特征图谱比较

目的 比较马尾松鲜松叶与不同处理方式下的干松叶的成分差异,为松龄血脉康胶囊的君药马尾松松叶的处理方式提供依据,并为马尾松松叶成分的药理药效研究提供参考.方法 采用RP-HPLC法测定;通过液相色谱-电喷雾离子阱质谱分析方法鉴别部分成分.结果 鲜松叶与两种烘干的松叶成分差异较大,两种烘干方式的松叶成分间无明显差异,而烘干松叶较鲜松叶色谱特征峰减少,某些成分含量有降低.结论 鲜松叶中成分明显多于烘干松叶,证实了鲜松叶入药的合理性.     

HPLC法同时测定舒肝解郁胶囊中金丝桃苷和芦丁的含量

目的:建立同时测定舒肝解郁胶囊中金丝桃苷、芦丁含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇(90∶10,V/V)-50 mmol/L磷酸盐缓冲液(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为360 nm,柱温为室温。结果:金丝桃苷和芦丁的进样量分别在1.272¹27.240、1.393127.240、1.393¹39.350μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);二者精密度、稳定性、重复性的RSD<2%;平均加样回收率分别为96.9%、98.6%(n均为9)。结论:该方法快速、准确,重复性好,可用于舒肝解郁胶囊的质量控制。