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目的探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据。方法①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成。②细胞实验:4-ABP 100～800μmol.L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检测5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861对5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用。4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol.L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,最大保护率分别为58.1%和21.7%。结论 4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达。5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一。 相似文献
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脂氧合酶是一类广泛存在于动植物中的非血红素铁蛋白,其对内源性多不饱和脂肪酸双加氧作用产生的白三烯等生物活性因子和对外源化学物协同氧化酶活性的氧化活化产物,与人体的肿瘤、炎症、哮喘、动脉硬化等疾病以及化学物的毒作用密切相关.脂氧合酶抑制剂有异羟肟酸类、去甲二氢愈创木酸类、黄酮类和脂氧合酶激活蛋白抑制剂,他们均能有效地抑制脂氧合酶的代谢活性;研究证明这些抑制剂能抑制有关活性因子和毒性产物的产生,临床应用能防治有关疾病,保护人体健康. 相似文献
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