排序方式: 共有6条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1
1.
目的:构建含人神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的重组腺病毒载体,为初步研究NT-3的在体功能做准备。方法:酶切法从已构建好的真核表达载体NT-3-pIRES2-DsRed2质粒中切下含有NT-3和DsRed2(包括连接区域pIRES2)的目的片段,将其插入到腺病毒骨架质粒pAdShuttle-CMV的多克隆位点中,电穿孔法将腺病毒骨架载体pAdShuttle-CMV-NT-3-DsRed2和预转入人肠杆菌BJ5183的穿梭载体pAdEasy-1进行细菌内同源重组。PacⅠ酶切线性化鉴定正确的同源重组载体,脂质体法转染293T细胞,包装形成表达NT-3目的蛋白和红色荧光的腺病毒。通过293T细胞3轮扩增病毒,氯化铯密度梯度离心,获得高滴度的纯化腺病毒。Western blot方法检测蛋白表达情况。结果:同源重组质粒载体的DNA测序证实腺病毒载体中含有NT-3的目的片段,Western blot证实感染重组腺病毒的293T细胞中有相应的NT-3蛋白表达;病毒滴度为109PFU/ml。结论:利用细菌内同源重组的方法可以成功构建同时表达NT-3蛋白和红色荧光的重组腺病毒。 相似文献
2.
目的:探讨电子喉镜在咽喉部异物诊断和治疗的应用。方法回顾性分析咽喉部异物6713例,其中传统方式诊断咽喉部异物3331例,并成功治疗2898例,电子喉镜诊断咽喉部异物1475例,并成功治疗1473例。统计异物在咽喉各部位概率及尖锐异物和非尖锐异物的诊断率。比较电子喉镜和传统方式治疗咽喉各部位异物的成功率。结果电子喉镜相比传统方式可以显著提高咽喉部尖锐异物的诊断率,差异有统计学意义(P<0.05),对非尖锐异物诊断率稍有提高,差异无统计学意义(P>0.05)。咽喉部尖锐异物的诊断率均显著高于非尖锐异物(P<0.05)。传统方式下咽喉部异物成功取出比例为87.00%,电子喉镜下咽喉部异物成功取出比例为99.86%。结论电子喉镜诊断和治疗咽喉部异物比传统方式有明显优势,具有照明充分、定位准确、操作精确的特点,是治疗咽喉部异物方便、快捷、有效的方法。 相似文献
3.
目的观察补肾活血通窍中药复方对庆大霉素(gentamicin,GM)耳中毒小鼠听性脑干反应(ABR)反应阈及耳蜗神经营养因子-3(neurotrophic factor3,NT-3)表达的影响。方法健康昆明小鼠40只,随机分为5组,每组8只(16耳)。空白对照组正常喂养,GM+中药组(补肾活血通窍中药复方分为高、中、低三个浓度组)及GM4-生理盐水组每天腹腔注射GM100mg/kg,连续15天,腹腔注射GM第一天起GM+中药各组分别灌服高、中、低浓度中药复方汤剂,GM+生理盐水组灌服等量生理盐水,连续20天,灌胃结束后测试ABR反应阈,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测各组耳蜗组织中NT-3的表达。结果与空白对照组比较,GM+生理盐水组及GM+低浓度中药组ABR波Ⅲ反应阈显著升高(P〈0.01),耳蜗NT-3蛋白含量下降(P〈0.01);GM+高、中浓度中药组ABR波Ⅲ反应阈升高,耳蜗NT-3蛋白含量下降,但差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论高、中浓度补肾活血通窍中药复方可显著减轻GM所致的小鼠耳蜗NT-3含量降低和ABR反应阈升高的程度(P〈0.01),从而有效减轻GM对小鼠的耳毒性。 相似文献
4.
目的研究携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)腺病毒(Ad-EG-FP)经由小鼠耳后圆窗径路导入内耳的可行性,分析EGFP在耳蜗内的表达特点。方法 19只健康的8~9周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为三组:Ad-EGFP组7只,人工外淋巴液组6只,两组通过耳后切口圆窗径路注射,分别导入Ad-EGFP和人工外淋巴液;空白对照组6只,未予处理。各组均于术前3日和术后7日行听性脑干反应(ABR)检查;术后7日取出耳蜗于荧光显微镜下观察EGFP在内耳的分布并行免疫组化观察EGFP在基底膜的表达。结果 3组动物术前ABR反应阈差异无统计学意义(P〉0.05),术后7日,Ad-EGFP组ABR反应阈为62.86±9.94dBSPL,人工外淋巴液组ABR反应阈为60.83±9.70dBSPL,均较术前(37.86±8.59和34.16±8.04dBSPL)及空白对照组(40.83±8.61dBSPL)高(P值均〈0.05);空白对照组实验前后ABR反应阈无变化,Ad-EGFP组与人工外淋巴液组术后7天ABR反应阈差异无统计学意义(P值均〈0.05)。Ad-EGFP组Ad-EGFP导入后在基底膜上可见EGFP呈广泛表达,人工外淋巴液组和空白对照组基底膜未见荧光表达。结论外源性基因可经内耳圆窗导入并在耳蜗基底膜上广泛表达。 相似文献
5.
目的:探讨鼻中隔穿孔相关危险因素及其相互影响。方法:130只SD大鼠分4组,A、B、C组为实验组,各40只;D组为对照组,10只。实验组以膨胀海绵片(Merocel,3mm×5mm)或明胶海绵团块置入大鼠左侧鼻腔,距离前鼻孔约15mm。运用或不运用金黄色葡萄球菌标准菌株悬浊液左侧鼻腔内灌注。于术后2、3、5、7d分批处死A、B、C组大鼠各10只。直接处死D组大鼠10只。解剖并观察鼻中隔,解剖过程中经内镜采图。术后7d各组取左侧鼻腔分泌物细菌培养。结果:A组膨胀海绵片加金黄色葡萄球菌鼻腔填塞3d后80%以上发生鼻中隔穿孔,显著高于其他各组(P<0.01),细菌培养均获阳性结果。B组无菌膨胀海绵片鼻腔填塞5d后70%以上发生鼻中隔穿孔,与之发生率逐步接近(P>0.05),显著高于其他各组(P<0.05)。解剖见大鼠鼻中隔前下部存在解剖上的膜性薄弱区域。鼻中隔穿孔均发生于该区域,与膨胀海绵填塞部位无重叠。结论:鼻中隔穿孔的发生是多因素相互作用的综合结果,其发生及发生部位主要取决于鼻中隔结构强度,血液循环障碍是导致穿孔的必要条件,而引流障碍和感染可促进鼻中隔穿孔的产生。 相似文献
6.
1