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目的建立基于报告基因法的高通量筛选细胞模型,用来发现PXR、FXR和LXRα受体激动剂。方法利用Real-time定量PCR方法比较HEK293、Hep G2和LS174T细胞中内源性核受体PXR、FXR和LXRα的表达量,将p SG5-h PXR和p GL3-XREM-CYP3A4、p EGFP-N3-h FXR和EcRETK-Luc、p CMX-FLAG-h LXRα和p GL3-XREM-CYP3A4等质粒分别共转染到工具细胞中,优化共转染比例,并考察阳性药与萤光素酶报告基因表达强度的量效关系、模型特异性和稳定性。结果 1根据Real-time定量PCR结果,模型选用低表达PXR、FXR和LXRα的HEK293细胞作为工具细胞;2根据不同共转染比例对报告基因活性的结果,PXR、FXR和LXRα报告基因药物筛选模型的报告基因和过表达质粒比例,最终分别选择1∶1、2∶1和2∶1;3模型中,报告基因活性均与相应阳性药物(PXR/Rif、FXR/CDCA和LXRα/T0901317)呈剂量依赖性增长;4仅PXR激动剂Rif、FXR激动剂CDCA和LXRα激动剂T0901317可分别明显增加相应筛选模型的报告基因活性,分别重复5次试验后,计算得Z'值分别为0.58、0.66和0.63。结论该研究建立的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型,具有良好的特异性和稳定性,适用于对PXR、FXR和LXRα受体激动剂的筛选,进而开发以核受体作为药物靶点的药物。 相似文献
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超声诊断男性尿道纵膈1例茂名市人民医院超声室曾石江,曾行,邓华琼患者男,25岁。诉述自幼排尿不畅,排尿时有两股尿流同时射出,要求检查。超声检查:使用U-4实时超声显像仪,探头频率5.0MHz,膀胱充盈下见双肾形态,大小正常,未见结石及积水。双侧输尿管... 相似文献
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曾行 《中国临床医药研究杂志》2003,(88):8617-8618
本文通过经超声检查率先发现的成人肠套叠47例的临床经过与手术及最终病理诊断对照,术前超声诊断符合率达93.8%(46/47),充显示超声诊断成年人肠套叠其病因的首选意义。本组47例中术后诊断为肠肿瘤致肠套叠36例,肠息肉致肠套叠2列,术前超声均能正确提示,超声检查显示肠内肿物呈环形或半环形突人肠腔,造成肠腔狭窄,以致端漏斗状扩张,形成肠套叠的病理基础,此前国内文献未见报道。 相似文献
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目的 探讨虎杖提取物2- 甲氧基-6- 乙酰基-7- 甲基胡桃醌(2-Methoxy-6-acetyl-7-methyljuglone,MAM)对人乳腺癌细胞MAD-MB-231 体外增殖的影响及可能机制。方法 体外培养正常人肝细胞LO2、人乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-468 细胞,采用Cell Counting Kit-8(CCK8)法检测MAM 对细胞增殖的影响,采用Hoechst33258 染色检测MAM 对MDA-MB-231 细胞凋亡的影响,采用流式细胞术检测MAM 对MDA-MB-231 细胞周期的影响,western blot 分析相关蛋白表达的变化。结果 MAM 对人乳腺癌MDA-MB-231 细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。MAM 作用24 h 可诱导MDA-MB-231 细胞发生典型的凋亡形态学改变,抑制MDAMB-231 细胞周期在G2/M 期,同时显著下调细胞内Cdk1 和CyclinB1 蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平(P<0.05)。结论 MAM 能够通过抑制Cdk1-CyclinB1 复合物的形成,使细胞周期阻滞在G2/M 期,干扰细胞周期进程,从而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖。 相似文献
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纳滤膜在污水处理和海水淡化等方面具有独特的优势,因而一直是膜研究领域的热点。氧化石墨烯(GO)因自身特殊的分子层结构及表面电荷性质,可应用于复合纳滤膜的制备中。采用改进Hummers法制备得到氧化程度较高的GO,再通过压力辅助自组装法制得氧化石墨烯-聚偏氟乙烯(GO-PVDF)复合纳滤膜。通过对NaCl和Na2SO4进行脱除测试,研究负载量、盐溶液质量浓度等因素对GO-PVDF复合纳滤膜截留率和渗透通量的影响。实验结果表明,增大GO负载量有助于获得较好的脱盐效果。在相同条件下,GO-PVDF复合纳滤膜对Na2SO4的截留率高于对NaCl的截留率,且对低浓度盐溶液的脱除率更高。纳滤膜长周期稳定性测试表明,GO-PVDF复合纳滤膜的渗透通量和截留率基本保持稳定,经过12 h后其对NaCl和Na2SO4的截留率分别可达58.9%和76.6%。 相似文献
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