基于ABC外排蛋白介导的中药七情配伍的药动学机制研究进展

ABC外排蛋白是一类依赖ATP水解释放的化学能,介导机体多种内源性和外源性外排蛋白底物的跨膜转运。其广泛存在于人体的各种组织器官中,是人体内重要的功能性膜蛋白。药物改变转运蛋白的表达和(或)功能,将会影响该转运蛋白对应底物药物的体内处置过程,产生药动学方面的相互作用。外排蛋白主要由P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein,MRP)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)组成,能够对药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程产生影响。药物对外排蛋白的诱导或抑制作用是中药配伍使用时产生相互作用的重要因素,这种作用可能是七情配伍理论的重要机制之一。该文就七情配伍对ABC外排蛋白的影响进行了简要综述,以揭示外排蛋白在药对配伍中的作用,为中药配伍机制和合理性提供新思路。     

养肺苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:优选养肺苦荞茶的最佳水提取工艺并建立同时测定成品中柚皮苷与芦丁含量测定方法,为该保健茶的开发提供一定的基础依据。方法:以干膏得率与柚皮苷的提取率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对养肺苦荞茶提取工艺的影响,综合评价优选出最佳工艺条件。并采用HPLC测定养肺苦荞茶中柚皮苷与芦丁的含量。Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.5%冰醋酸溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,A为10%～12%;10～15 min,A为12%～17%,15～25 min,A为17%;25～35 min,A为17%～20%;35～37 min,A为20%～24%;37～40 min,A为24%～10%;40～45 min,A为10%～10%;)流速1.0 m L·min~(-1),芦丁检测波长257 nm,柚皮苷检测波长283 nm,柱温30℃。结果:优选出的最佳提取工艺为加10倍量水,回流提取3次,每次提取1 h;干膏得率28.75%,柚皮苷转移率32.81%;养肺苦荞茶所含芦丁含量为0.64 mg/g;柚皮苷含量为17.28 mg/g。结论:建立的HPLC检测成品中柚皮苷与芦丁含量方法准确可靠,优化出的提取工艺稳定,简便可行,可为养肺苦荞茶的制备与生产提供参考。     

养心苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:优选养心苦荞茶的最佳制备工艺并建立其成品中芦丁的含量测定方法,为该保健茶的开发提供一定的基础依据。方法:以干膏得率与甘草酸铵的转移率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对养心苦荞茶中淡竹叶甘草提取工艺的影响,对苦荞吸附淡竹叶、甘草药液比例进行考察,确定养心苦荞茶的最佳制备工艺;并采用HPLC测定养心苦荞茶中芦丁的含量。结果:优选出的最佳提取工艺为加16倍量水,回流提取3次,每次提取1 h;干膏得率20.96%,甘草酸铵转移率68.43%;苦荞与淡竹叶甘草药液的吸附比例为1∶1,养心苦荞茶所含芦丁的平均含量为3.62 mg/g。结论:优化出的提取工艺稳定,简便可行,可为养心苦荞茶的制备与生产提供参考。     

二子益肾苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:研究二子益肾苦荞茶的制备工艺并对其进行含量测定。方法:以干膏得率与鞣花酸转移率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对二子益肾苦荞茶中枸杞子、覆盆子提取工艺的影响,对苦荞吸附枸杞子、覆盆子药液比例进行考察,确定二子益肾苦荞茶的制备方法 ;并采用HPLC测定二子益肾苦荞茶中芦丁、鞣花酸的含量。结果:枸杞子和覆盆子的最佳提取工艺为8倍量水,提取3次,每次2 h,出膏率为47.53%,鞣花酸提取率为97.76%;苦荞与枸杞子、覆盆子提取液的吸附比例为1∶0.5时吸附效果最佳;芦丁和鞣花酸的线性关系良好(r0.999),芦丁和鞣花酸的加样回收率均值分别为103.02%(RSD=1.37%)和102.16%(RSD=1.09%)。结论:该试验研究的最佳提取工艺简单经济;最佳的吸附比例合理,成型工艺可行;该研究建立的含量测定方法简单、准确、灵敏、重复性好,为二子益肾苦荞茶的进一步开发、品质评价和质量控制提供了科学依据。     

基于ABC外排蛋白介导的中药七情配伍的药动学机制研究进展北大核心CSCD

ABC外排蛋白是一类依赖ATP水解释放的化学能,介导机体多种内源性和外源性外排蛋白底物的跨膜转运。其广泛存在于人体的各种组织器官中,是人体内重要的功能性膜蛋白。药物改变转运蛋白的表达和（或）功能,将会影响该转运蛋白对应底物药物的体内处置过程,产生药动学方面的相互作用。外排蛋白主要由P．糖蛋白（P-glyeoprotein,P-gP）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance associated protein,MRP）、乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein,BCRP）组成,能够对药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程产生影响。药物对外排蛋白的诱导或抑制作用是中药配伍使用时产生相互作用的重要因素,这种作用可能是七情配伍理论的重要机制之一。该文就七情配伍对ABC外排蛋白的影响进行了简要综述,以揭示外排蛋白在药对配伍中的作用．为中药配伍机制和合理性提供新思路。     

组分配伍四逆汤抑制ERK/cPLA2信号通路改善大鼠膜性肾病

目的 研究组分配伍四逆汤对大鼠膜性肾病的治疗作用及机制。方法 将45只雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和组分配伍四逆汤组,除对照组外,其余各组尾iv兔抗大鼠Fx1A抗血清制备大鼠膜性肾病模型。造模成功后,组分配伍四逆汤组大鼠ig 9.6 g/kg组分配伍四逆汤,模型组和对照组ig等量蒸馏水,连续给药12周。试剂盒法检测大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）以及白蛋白（Alb）含量;取肾脏检测肾指数,苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织的病理情况;ELISA法检测肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维连接蛋白（FN）以及IV型胶原（Col-IV）含量;采用Western blotting法检测肾脏中ERK1/2和胞浆型磷脂酶（cPLA2）蛋白磷酸化水平。结果 与对照组比较,模型组血清中Scr、BUN水平以及肾指数明显升高（P<0.05、0.01）,血清Alb水平明显降低（P<0.01）,肾组织中TGF-β1、FN和Col-IV含量以及ERK1/2、cPLA2磷酸化蛋白表达均显著升高（P<0.05、0.01）;与模型组比较,组分配伍四逆汤显著降低血清中Scr、BUN水平以及肾指数（P<0.05、0.01）,升高血清中Alb水平（P<0.01）,降低肾组织中TGF-β1、FN、Col-IV含量,减少肾组织中ERK1/2和cPLA2磷酸化蛋白表达（P<0.05、0.01）;HE染色结果显示,组分配伍四逆汤可以改善膜性肾病大鼠肾脏的病理变化。结论 组分配伍四逆汤对膜性肾病大鼠发挥明显治疗作用,其作用机制可能与抑制ERK/cPLA2信号通路激活相关。     

益母草治疗寒凝血瘀型痛经的网络药理学作用机制研究

目的构建益母草Leonurus japonicus化学成分-疾病靶点-代谢信号通路网络,探究益母草多成分-多靶点-多通路治疗寒凝血瘀型痛经的作用机制。方法利用TCMSP数据库与Swiss Target Prediction服务器获取益母草的化学成分与作用靶点,结合DrugBank、DisGeNET、TTD等数据库获取益母草治疗寒凝血瘀型痛经的作用靶点;通过DAVID网站对作用靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路分析,采用Cytoscape 3.6.0构建益母草活性成分-痛经作用靶点-代谢信号通路网络图,探讨益母草治疗寒凝血瘀型痛经的作用机制;并进一步采用Westernblotting实验验证益母草对寒凝血瘀型痛经模型大鼠子宫组织中花生四烯酸代谢通路环氧化酶1(PTGS1)、PTGS2蛋白表达的影响。结果获得益母草潜在活性成分共8个,与痛经相关疾病靶点22个,关键靶点涉及PTGS1、PTGS2、ALOX5、PLAG2A、AKR1C3等。GO功能富集分析共得到GO条目71个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目46个,细胞组成(CC)条目4个,分子功能(MF)条目21个。益母草...     

基于网络药理学的分心木总黄酮抗2型糖尿病作用机制研究及关于AKT/FoxO1信号通路的细胞实验验证

目的 通过网络药理学研究预测分心木总黄酮（TFDJF）的主要活性成分和作用靶点，探讨其多成分-多靶点-多通路的抗2型糖尿病（T2DM）的作用机制；并选取AKT/FoxO1信号通路进行细胞实验验证。方法 基于文献检索构建分心木黄酮类成分的化学成分数据库，并以"类药五原则"筛选潜在的活性成分，采用PharmMapper服务器反向药效团匹配方法预测活性成分可能的作用靶标，并根据TTD、OMIM数据库中与T2DM相关的靶点，筛选分心木黄酮类成分抗T2DM的作用靶标，通过对靶标的基因本体（GO）功能富集分析和KEGG通路分析，构建活性成分-抗T2DM作用靶点-代谢通路网络图，探讨TFDJF抗T2DM的作用机制。采用系统对接网站进行GSK3B和AKT1对山柰酚的分子对接。并进一步采用细胞实验进行验证：选取HepG2细胞，运用高浓度胰岛素诱导胰岛素抵抗（IR）模型，150 μg/mL TFDJF处理细胞36 h，氧化酶法检测各组细胞的葡萄糖消耗量，Western blotting法检测AKT-FoxO信号通路相关蛋白的表达。结果 共获得分心木潜在的黄酮类活性成分10个，预测成分作用靶标共104个，筛选出与抗T2DM相关的关键靶点15个，KEGG通路富集分析发现TFDJF抗T2DM的作用机制可能与胰岛素、FoxO、AMPK和PI3K-AKT等信号通路有关。山柰酚与GSK3B有强烈的结合活性，与AKT1有较好的结合活性。进一步通过细胞实验验证，TFDJF可显著提高HepG2细胞IR模型葡萄糖消耗量（P<0.01），显著升高AKT蛋白磷酸化水平（P<0.01），显著降低FoxO1蛋白表达水平（P<0.01），验证了网络药理学的部分预测结果。结论 TFDJF抗T2DM的作用机制可能与胰岛素、FoxO、AMPK和PI3K-AKT等信号通路有关。     

组分配伍四逆汤对甲状腺功能减退症大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴动态变化的调节作用

目的 动态观察组分配伍四逆汤对甲减大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响。方法 ig 0.1%丙基硫氧嘧啶（PTU）混悬液法分别造模6、11、16、20周,用左甲状腺素钠片（9 μg/kg）及组分配伍四逆汤（生药9.6 g/kg）对模型动物治疗4周,酶联免疫吸附法测定大鼠血清三碘甲状腺原氨酸（T₃）、甲状腺素（T₄）、促甲状腺激素（TSH）、促甲状腺素释放激素（TRH）水平的变化。结果 甲减程度随着造模时间的延长而加重。造模6、11、16周甲减大鼠与对照组比较,模型组大鼠血清T₃、T₄、TRH水平显著降低（P<0.05、0.01）,TSH水平显著升高（P<0.05、0.01）;与模型组比较,左甲状腺素钠片组及组分配伍四逆汤组大鼠血清中T₃、T₄、TRH水平均显著升高（P<0.05、0.01）,TSH水平显著降低（P<0.05、0.01）。造模20周甲减大鼠与对照组比较,模型组大鼠血清T₃、T₄、TRH水平显著降低（P<0.01）,TSH水平明显升高（P<0.01）,左甲状腺素钠片组和组分配伍四逆汤组血清T₃、T₄水平均显著降低（P<0.05、0.01）;与模型组比较,左甲状腺素钠片组及组分配伍四逆汤组大鼠血清T₃、T₄无统计学差异,TRH水平显著升高（P<0.05、0.01）,TSH水平显著降低（P<0.01）。结论 下丘脑-垂体-甲状腺轴在甲减发展过程中整体功能在退化,组分配伍四逆汤的调节作用是动态变化的,应在初期及早给予。