酸敏感离子通道在大鼠全脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨酸敏感离子通道(ASICs)在大鼠全脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,体重250～310 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、生理盐水组(NS组)和ASICs阻断剂组(A组).I/R组、NS组和A组采用阻断双侧颈总动脉和基底动脉10 min的方法制备全脑缺血再灌注模型,NS组和A组于再灌注前即刻 分别静脉注射生理盐水6 ml/kg和ASICs阻断剂阿米洛利0.3 mg/kg.各组取6只大鼠,分别于缺血前(基础状态)、缺血即刻及再灌注20 min期间每隔10 min收集一次海马CA1区微透析液,测定微透析液中乳酸浓度.再灌注8 h时各组取另外6只大鼠,进行方格爬行实验和斜板实验,以评价神经行为学;然后取脑组织,计算脑含水量,并在光镜及电镜下观察大脑皮质的病理学结果.结果 与S组比较,I/R组和NS组微透析液中乳酸浓度和脑含水量升高,发生神经行为学障碍(P＜0.05);与I/R组比较,A组微透析液中乳酸浓度和脑含水量降低,神经行为学改善(P＜0.05),NS组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).A组脑组织损伤程度轻于I/R组.结论 ASICs参与了大鼠全脑缺血再灌注损伤的发生.

Abstract：

Objective To investigate the role of acid-sensing ion channels (ASICs) in global cerebral ischemia-reperfusion (I/R) injury in rats. Methods Forty-eight adult male Sprague-Dawley rats weighing 250-310 g were randomly divided into 4 groups ( n = 12 each): sham operation group (group S); global cerebral I/R group (group I/R); normal saline group (group NS) and specific ASIC blocker amiloride group (group A). Global cerebral I/R was produced by occlusion of 3 vessels ( 10 min occlusion of the bilateral common carotid arteries and basilar artery) followed by reperfusion. In group NS and A, NS 6 ml/kg and amiloride 0.6 mg/kg were injected through femoral vein immediately before reperfusion respectively. Six rats in each group were selected, the dialysate in CA1 area was collected before ischemia (baseline), immediately after ischemia and during 20 min reperfusion (once every 10 min) for determination of lactate concentrations. The left 6 rats in each group were elected at 8 h of reperfusion and the open field test and inclined plane test were peeformed to assess neurological behavior.The rats were then sacrificed and brain tissues taken for microscopic examination and brain water content was calculated. Results Compared with group S, the concentration of lactate in the dialysate and brain water content were significantly increased and neurological deficits developed in group I/R and NS (P ＜ 0.05). Compared with group I/R, the concentration of lactate in the dialysate and brain water content were significantly decreased and neurological deficits were improved in group A ( P ＜ 0.05 ), but no significant change in the parameters mentioned above was found in group NS ( P ＞ 0.05). Microscopic examination showed that the damage to the brain tissues was attenuated in group A compared with group I/R. Conclusion ASICs are involved in the development of global cerebral I/R injury in rats.     

线粒体ATP敏感性钾通道在头部浅低温减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价线粒体ATP敏感性钾通道在头部浅低温减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、全脑缺血再灌注组(I/R组)、头部浅低温组(H组)和5-羟基葵酸钠组(5-HD组).采用三血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型.S组仅分离血管,不阻断;I/R组制备大鼠全脑缺血再灌注模型;H组于再灌注前即刻实施头部浅低温(使鼓膜温度在1 min内降至32～34℃),维持3 h后复温;5-HD组于缺血前30 min腹腔注射5-羟基葵酸钠10 mg/kg,于再灌注前即刻实施头部浅低温.于再灌注12 h时评估大鼠神经行为学(跨格次数和转体时间),采用EIJSA法测定血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的浓度,电镜下观察额叶皮质神经元的超微结构.结果 与S组比较,I/R组、H组和5-HD组跨格次数减少,转体时间延长,I/R组和5-HD组血清NSE浓度升高(P<0.05),H组血清NSE浓度差异无统计学意义(P0.05);与I/R组比较,H组跨格次数增多,转体时间缩短,血清NSE浓度降低,5-HD组转体时间缩短(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P0.05);与H组比较,5-HD组跨格次数减少,转体时间延长,血清NSE浓度升高(P<0.05).H组额叶皮质神经元病理学改变较I/R组和5-HD组减轻,5-HD组与I/R组损伤程度相似.结论 头部浅低温减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤可能与开放线粒体ATP敏感性钾通道有关.     

胸段硬膜外阻滞对油酸诱发猪急性肺损伤时炎性反应的影响

目的 观察胸段硬膜外阻滞对油酸诱发猪急性肺损伤(ALI)时炎性反应的影响.方法 家猪14只,体重30～35kg,随机分为2组(n=7):对照组(C组)及硬膜外阻滞组(TEB组).于T3,4硬膜外置管后,采用静脉输注油酸的方法 制备ALI模型.ALI模型制备成功后,TEB组硬膜外注射0.25%罗哌卡因5ml,随后以2ml/h速率持续输注4 h,C组给予等容量生理盐水.分别于输注油酸前即刻、ALI模型制备成功后即刻、硬膜外给药1、2、3和4 h时测定PaO2.于硬膜外给药4 h时处死动物,行右侧支气管肺泡灌洗,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数,计算中性粒细胞(PMN)百分比及PMN凋亡率;取左肺组织,测定总肺水量(TLW)及血管外肺水量(EVLW),并观察肺组织病理学结果 .结果 与C组比较,TEB组BALF中细胞总数、PMN百分比、TLW及EVLW均降低,PaO2和PMN凋亡率升高(P＜0.05或0.01).TEB组肺组织病理学损伤程度较C组减轻.结论 胸段硬膜外阻滞可减轻猪ALI时肺组织的炎性反应.     

胸段硬膜外阻滞对油酸致猪急性肺损伤时肺泡毛细血管膜通透性的影响

目的 观察胸段硬膜外阻滞对油酸致猪急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时肺泡毛细血管膜通透性的影响.方法 16只健康家猪,体质量30～35 kg,随机分为2组(n=8),生理盐水组(S组)及罗哌卡因组(R组).麻醉后气管插管机械通气,吸入氧浓度(fractional concentration of inspired oxygen,FiO2)100%,于T3,4行硬膜外穿刺、置管,经颈内静脉持续输注油酸,PaO2/FiO2＜200为ALI模型制备成功的标志.ALI成功后即刻R组经T3,4硬膜外导管注入0.25%罗哌卡因5 mL,随后以2 mL/h的速率持续输注4 h,S组给予等量生理盐水.2组动物分别于各项操作完成后稳定30 min(基础值)、ALI模型制备成功后即刻(T0)、硬膜外腔输注罗哌卡因(或生理盐水)1、2、3、4 h记录平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和动脉血氧分压(partial pressure of oxygen in artery,PaO2),并测定血红蛋白和血浆白蛋白水平.实验结束时行右支气管肺泡灌洗,测定并计算肺通透指数,测定肺组织髓过氧化物酶活性,总肺水量(total lung water,TLW)和血管外肺水量(extravascular lung water,EVLW),并在光镜和电镜下进行肺组织病理学观察.结果 与基础值比较,ALI后两组PaO2均降低(P＜0.01),MAP变化无显著性差异(P＞0.05).硬膜外给罗哌卡因或生理盐水后各时间点两组PaO2均降低,R组MAP明显降低(P＜0.01).组间比较,给药后各时间点R组PaO2均高于S组,MAP均低于S组(P＜0.05或0.01).R组肺通透指数、髓过氧化物酶活性、TLW、EVLW均较S组降低,差异有统计学意义(P＜0.05或0.01).光镜和电镜观察结果显示,R组肺组织损伤程度较S组明显减轻.结论 胸段硬膜外阻滞可降低油酸致猪急性肺损伤时肺毛细血管膜通透性,减轻肺组织水肿的程度,具有肺组织保护作用.     

美托洛尔预处理对老年非心脏手术患者围术期心肌缺血的影响

目的 研究美托洛尔对老年非心脏手术患者围术期心肌缺血的预防作用.方法 60例择期非心脏手术的老年患者随机分为观察组和对照组,每组30例,观察组在麻醉诱导前静脉注射美托洛尔0.04 mg/kg,术后继续应用3 d,对照组则给予相同容量的安慰剂.围术期监测:(1)动态心电图监测围术期ST段的变化情况:ST段抬高≥2 mm或压低≥1 mm持续超过1 min被确定为心肌缺血;(2)酶联免疫法测定cTnⅠ的浓度:测定术前、术后2 h及术后1～3 d的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的浓度.结果 (1)心电Holter显示两组患者术前及术中组间相比,心肌缺血无显著性差异(P＞0.05),术后观察组明显低于对照组(P＜0.05);(2)cTnⅠ的浓度测定表明,术毕及术后观察组心肌缺血损伤程度低于对照组(P＜0.05).结论 美托洛尔能够有效预防老年非心脏手术患者围术期心肌缺血的发生,并可有效减轻术中及术后心肌的缺血性损伤.     

异丙酚对肢体缺血/再灌注大鼠肺损伤的影响

目的观察异丙酚对肢体缺血/再灌注大鼠肺损伤的影响。方法健康Wistar大鼠36只,体重300-350g,随机分为3组:假手术组(Sham组,n=12),只进行手术操作不做其他处理;肢体缺血/再灌注组(I/R组,n=12),双后肢缺血4h、再灌注6h;异丙酚组(P组,n=12)于开放前10min静脉注射异丙酚5mg·kg-1随后以10mg·kg-1·h-1的速率输注,I/R、Sham组输注等量生理盐水。实验结束,颈动脉放血处死大鼠,测定肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及肺组织含水率,光镜和电镜下观察肺组织形态学改变及肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果肺含水率:I/R、P组均较Sham组增加,但P组低于I/R组(P<0.05或0.01);肺组织MDA含量:I/R组较Sham组升高,P组低于I/R组(P<0.01),且与Sham组相比差异无统计学意义(P>0.05);肺组织SOD活性:I/R、P组均较Sham组降低,但P组高于I/R组(P<0.01或0.05)。光镜观察,I/R组肺间隔增厚,间质中有大量中性粒细胞浸润,局部肺出现不张、肺泡水肿;电镜观察,I/R组部分肺泡上皮细胞缺损,Ⅰ型上皮细胞肿胀,Ⅱ型上皮细胞微绒毛稀疏、板层小体排空,P组肺组织病变明显改善。P组肺组织iNOS、ICAM-1表达较I/R组明显减少。结论异丙酚对肢体缺血,再灌注大鼠肺损伤具有一定程度的保护作用,其机制可能与减轻肢体缺血/再灌注后肺组织的氧化损伤及下调损伤肺组织iNOS、ICAM-1表达有关。     

胸段硬膜外阻滞转复慢性房颤1例

患者,男,70岁,体重70 kg。因间断无痛性全程血尿1个月以“左肾占位性病变”收入院,拟行左肾肿瘤切除术。既往有高血压病史10余年、心房纤颤10年,虽经药物治疗仍未得到有效控制,一直为房颤心律,且近期未服用任何针对性治疗用药。术前ECG诊断为:“心房纤颤,左室肥厚劳损,ST-T异     

胸段硬膜外阻滞对油酸致猪急性肺损伤时呼吸力学的影响

目的观察胸段硬膜外阻滞对油酸致猪急性肺损伤（ALI）时呼吸力学的影响。方法选健康家猪14只,肌内注射氯胺酮20mg／kg、阿托品0．05mg／kg,动物入睡后,建立耳缘静脉液路,静脉注射2．5％硫贲妥钠10mg／kg,经口气管插管,机械控制呼吸,维持正常的PaCO2。将油酸0．1ml／kg用0．9％氯化钠溶液稀释至20ml,经颈内静脉以40ml／h的速率持续静脉输注造模。造模成功后,将动物随机分S组（n=7）：向硬膜外腔注入0．9％氯化钠溶液5ml;R组（n=7）：向硬膜外腔注入0．25％罗哌卡因5ml。随后2组均持续泵入0．9％氯化钠溶液或0．25％罗哌卡因,观察4h。通过麻醉机气道压监测系统连续监测吸气峰压（PIP）、平均气道压（MPaw）、内源性呼吸末正压（PEEPi）作为基础值,并分别于ALI成功时（T0）及给罗哌卡因或0．9％氯化钠溶液1h（T1）、2h（T2）、3h（T3）、4h（T4）测定上述值。实验结束后,取肺组织,在光镜下观察肺组织病理变化。结果与基础值比较,ALI模型建立时2组PIP、Mpaw、PEEPi均升高（P〈0．05）,DLC降低（P〈0．05）。2组基础及ALI模型建立时PIP、Mpaw、PEEPi和DLC差异无统计学意义（P〉0．05）,给药后各时间点R组PIP、Mpaw、PEEPi低于S组,DLC高于S组（P〈0．05或〈0．01）。光镜观察,R组肺组织病理学较S组明显减轻。结论胸段硬膜外阻滞可降低肺气道阻力,增加肺动态顺应性,改善肺组织的通气功能,对肺损伤有一定的保护作用。     

罗哌卡因胸段硬膜外阻滞对油酸致猪急性肺损伤时PMN及ICAM-1的影响

目的观察胸段硬膜外阻滞对油酸所至猪急性肺损伤（ALI）时肺组织嗜中性粒细胞（PMN）数量及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法选择14只体重为30~35 kg的健康幼猪,麻醉后经颈内静脉持续输注油酸,直至PaO2＆lt;200 mm Hg。随机分为0.9%氯化钠溶液组（S组）及罗哌卡因组（R组）。S组经胸段硬膜外持续输注0.9%氯化钠溶液,R组经硬膜外持续输注罗哌卡因。模型建立后4 h开胸,行支气管肺泡灌洗,测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数,PMN百分比,并取小块肺组织观察ICAM-1的表达。结果与S组比较,R组BALF中细胞总数,PMN百分比显著性降低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）,R组ICAM-1表达阳性的细胞较S组明显减少。结论胸段硬膜外阻滞可减少PMN在肺内的聚集和ICAM-1表达,对ALI有一定的保护作用。