PC12细胞低压性缺氧损伤模型的建立

目的：构建PC12细胞低压性缺氧细胞模型。方法：将PC12细胞依据缺氧条件随机分为正常对照组、常压缺氧组、低压缺氧组;正常对照组以正常条件培养,常压缺氧组和低压缺氧组分别以常压缺氧和低压缺氧条件培养。通过考察氧气浓度、大气压力和低压缺氧时间,应用CCK-8法测定细胞活性,筛选低压缺氧的条件;显微镜下观察各组细胞形态、结构、数目,微板法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,流式细胞仪测定细胞凋亡比例和细胞周期。结果：在1%氧浓度和41?kPa低压缺氧环境下培养24h可建立低压性缺氧细胞模型。与正常对照组和常压缺氧组比较,低压缺氧组LDH活性及细胞MDA含量增加、SOD活性下降,细胞凋亡比例上升（均P<0.05）,细胞周期阻滞发生在G0/G1期。结论：建立了稳定可靠的低压性缺氧损伤PC12细胞模型,可用于高原低压性缺氧神经损伤的体外实验研究。     

7-羟乙基白杨素对PC12细胞的抗氧化作用及机制研究

目的 研究7-羟乙基白杨素对PC12细胞的抗氧化作用，并对其保护机制进行探讨。方法 使用CCK-8试剂盒检测PC12细胞的存活率，筛选出7-羟乙基白杨素作用的最佳浓度进行实验。之后将PC12细胞随机分为4组，分别为对照组、缺氧组、白杨素组和7-羟乙基白杨素组。使用微量酶标法测定细胞培养基中LDH活性，DCFH-DA染色观察细胞内ROS含量，同时使用试剂盒对细胞内MDA、SOD和CAT水平进行测定，提取细胞总蛋白通过Western blotting检测评价Nrf2及其下游蛋白表达量。结果 缺氧后PC12细胞存活率显著下降，经7-羟乙基白杨素预处理后可获得改善；白杨素组和7-羟乙基白杨素组上清液中的LDH和细胞内ROS、MDA含量与缺氧组相比显著降低，SOD和CAT含量与缺氧组相比显著升高，同时发现7-羟乙基白杨素在各个方面的保护作用都明显强于白杨素。缺氧条件会使Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1蛋白表达增加，7-羟乙基白杨素干预后可以进一步提高它们的蛋白表达。结论 7-羟乙基白杨素具有比白杨素更好的保护效果，它可以通过激活Nrf2/ARE通路减轻PC12细胞由于缺氧造成的损伤。