澳洲茄边碱诱导胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的机制研究

目的 探讨澳洲茄边碱（SM）对胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的影响及作用机制。方法 用SM(0,2,4,6,8μmol/L)处理细胞24 h,即溶剂对照组和SM 1组、2组、3组、4组。采用CCK-8法和克隆形成实验分别检测细胞活力和增殖能力,并计算细胞存活率和克隆形成率;采用Annexin V-FITC/PI双染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况,并计算细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测凋亡相关蛋白表达水平;采用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）和JC-1荧光探针分别检测U251细胞中活性氧水平和线粒体膜电位。结果 与溶剂对照组比较,U251细胞存活率和克隆形成率随SM浓度的增加均呈降低趋势（P <0.05）,细胞凋亡率呈升高趋势（P <0.01）;经SM处理后,细胞剪切多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶、剪切胱天蛋白酶3蛋白表达水平及细胞内活性氧水平均呈升高趋势（P <0.05）,线粒体膜电位呈降低趋势（P <0.01）。结论 SM可能通过激活线粒体介导的细胞凋亡通路,从而抑制胶质母细胞瘤U251细胞活性。     

藜芦胺对人胶质母细胞瘤细胞U251增殖的影响及机制

目的 探究藜芦胺（VTM）对人胶质母细胞瘤（GBM）细胞U251增殖的影响及其潜在机制。方法 借助网络药理学方法，筛选VTM干预GBM的铁死亡相关交集靶点，并进行基因本体、京都基因和基因组百科全书富集分析。以U251细胞为对象，采用CCK-8法、细胞克隆形成实验、细胞形态变化观察、2′，7′-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法、FerroOrange荧光探针法、Western blot实验对VTM抑制U251细胞增殖的作用及可能机制进行验证。结果 共筛选出VTM干预GBM的铁死亡相关交集靶点462个，富集于氧化应激、细胞凋亡等生物学过程，胞质囊泡、线粒体膜等细胞成分，影响二价铁离子（Fe2+）结合、DNA转录过程等分子功能，以及铁死亡、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路等。40、60、80、100、120、140μmol/L的VTM均可显著降低细胞存活率（P<0.01）;40、80、120μmol/L的VTM可使细胞萎缩、细胞核破碎，可显著抑制其克隆形成，显著提高其活性氧（ROS）、Fe2+水平，并可不同程度地上调核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶...