表皮生长因子及其对胃肠道黏膜的作用

本文综述了表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)的结构、性质、生理作用、合成部位及消化道内EGF的来源，文中突出地描述了EGF对实验动物上消化道黏膜的保护和对消化性溃疡的治疗作用。人源性EGF的运用已进入临床，预示着EGF将会在消化道溃疡的治疗中发挥重要作用。     

谷胱甘肽-S-转移酶-人表皮生长因子融合蛋白基因的表达及其产物的生物活性

目的　通过融合蛋白的表达使人表皮生长因子(hEGF)易于纯化。方法　构建基于tac启动子的pGEX 4T-1-hEGF原核表达载体,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,以异丙基 1 硫代-β-D半乳糖苷诱导,表达谷胱甘肽 S 转移酶(GST) hEGF融合蛋白。结果　表达产物占细菌总蛋白的3 4%。部分为可溶性的,部分形成包涵体。菌体裂解上清液经GlutathioneSepharose 4B纯化后,SDS PAGE电泳出现一条3 2ku蛋白条带,与GST hEGF融合蛋白的计算分子量相符。菌体裂解液中的可溶性GST hEGF的产率为63mg·L- 1 。将其添加到培养的HEK-2 93细胞中,能明显促进该细胞的分裂和生长。结论　成功地构建并表达了GST-hEGF融合蛋白基因,其表达产物GST hEGF显示良好的促细胞增殖活性     

人表皮生长因子在转基因番茄中成功表达

目的以转基因番茄生产人表皮生长因子(hEGF)。方法构建hEGF基因的表达载体pCAM-35S-hEGF,通过电激法转化到农杆菌菌株C58中,采用叶盘法转化番茄品系cg2002-14。结果子叶经发芽及生根诱导培养后得到了再生植株。PCR分析表明,hEGF基因已整合到番茄的基因组中。放射免疫法(RIA)测得hEGF在果实中平均含量为3.78ng·g-1。结论成功构建了hEGF基因的表达载体,获得了表达hEGF的转基因番茄植株。     

重组人EGF包涵体与37×10^3菌体蛋白的稳定性

大肠杆菌BL21（DE3）是最常用的工程菌株之一,许多外源蛋白得已成功表达^[1-6]。以其作为宿主菌进行外源蛋白表达时,往往形成包涵体^[3-5],包涵体结构复杂,一般含有50％以上的目的重组蛋白,其余为核糖体元件、RNA聚合酶、大肠杆菌的外膜蛋白、质粒DNA以及脂体、脂多糖等。包涵体为大小0．5—1 μm的颗粒状,难溶于水,只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等^[7]。包涵体的形成可抵抗菌体内蛋白酶的降解,得到较高的表达量,给后续的纯化工作带来方便^[8]。