心肌及蛛网膜下腔NGF基因转染对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用

目的 探讨以重组腺相关病毒（rAAV）为载体,评价心肌点注射和蛛网膜下腔注射转导神经生长因子（NGF）基因对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用。方法 全实验包括两个子实验。实验一：将12只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为2组（n=6）：对照组、糖尿病（DM）组,DM组大鼠通过注射链脲佐菌素（STZ）建立1型糖尿病模型,2组大鼠于注射STZ前1 d及后第1、2、4、6、8、9周测甩尾反射潜伏期,并在第9周时通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组织中的NGF、降钙素基因相关肽（CGRP）含量。实验二：24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组（n=6）：糖尿病心脏转染对照组（MC）组、糖尿病心脏转染（ME）组、糖尿病脊髓转染对照（SC）组、糖尿病脊髓转染（SE）组,采用2×2析因设计,4组糖尿病模型建模方法同DM组,成模后第4周,MC组和ME组以心脏点注射分别转染滴度为0.8×1013 μg/L携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组腺相关病毒（rAAV9-GFP）和相同滴度的携带NGF基因的rAAV-GFP（rAAV9-NGF-GFP）,各100 μL;SC组和SE组以蛛网膜下腔注射分别转染滴度为0.8×1012 μg/L的rAAV2-GFP和相同滴度的rAAV2-NGF-GFP,各25 μL。5周后,测各组大鼠心功能指标。取心肌、T1-T5段脊髓及背根神经节组织,荧光显微镜下观察GFP的表达情况;采用ELISA测各组织中的NGF、CGRP含量。结果 实验一中,与对照组相比,DM组的甩尾反射潜伏期在第4周后明显延长（P＜0.05）,心肌组织中的NGF、CGRP明显下调（P＜0.05）。实验二中,心肌点注射法转染rAAV9-NGF-GFP可改善大鼠的各项心功能指标（P＜0.05）,上调心肌组织中NGF、CGRP蛋白含量（P＜0.05）;且实验过程中的转染物与转染途径之间存在交互效应,两者联用改善心功能和上调心肌组织中NGF、CGRP的效果更显著（P＜0.05）。结论 心肌点注射rAAV-NGF-GFP可以更有效地提高1型糖尿病大鼠心肌组织中NGF的表达,产生更有效的心脏保护作用。     

小儿急性乙醇中毒(附八例报告)

小儿因饮酒发生急性中毒国内报道不多,有的家长对酒(含乙醇)的毒性了解不够,放纵小儿饮酒,造成小儿急性中毒,甚至死亡。本院近2年来先后收治急性乙醇中毒患儿8例,其中男6例、女2例,年龄2～13岁,病前皆进食各种含乙醇饮料。临床特征:烦燥、神志恍惚2例,昏睡4例,昏迷1例,惊厥3例;面色苍白4例,面色潮红2例,血压下降1例;呼吸有乙醇味7例,喉中痰鸣2例,肺部出现罗音2例;呕吐7例,吐咖啡样物3例,肝功能损害1例;中毒性脑病2例;脑水肿2例,并发支气管肺炎2例,呼吸衰竭2例;乙醇皮质盲1例,     

右美托咪定通过miR-21/PDCD4通路减轻心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨miR-21/程序性细胞死亡蛋白4 (PDCD4)通路在右美托咪定(Dex)减轻大鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤中的作用。方法 健康雄性SD大鼠24只，随机分为假手术组、模型组、Dex组和Dex+agomiR-21(miR-21抑制剂)组。于制模前14日Dex组腹腔注射给予Dex 50μg·kg^-1,Dex+agomiR-21组腹腔注射Dex 50μg·kg^-1+agomiR-21 65 ng·kg^-1，采用结扎冠状动脉左前降支30 min后恢复灌注120 min制模，假手术组穿线不结扎，采用小动物生物指标监测仪记录缺血前(T₀)、缺血30 min(T₁)、再灌注60 min(T₂)和再灌注末(T₃)时大鼠心功能指标。采用ELISA法测定IR心肌组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。Western blot法...     

尿变形红细胞活体染色检查诊断小儿肾小球疾病

本实验采用1.5％Alcian blue及2.5％Pyroanine液、生理盐水混染方法,对67例小儿尿标本进行了观察,其中44例,有明显镜下血尿,且肾小球性血尿红细胞为变异型者占91.2％,有97％畸形红细胞数>8000/ml;非肾小球性血尿红细胞多为均一型,占90％,仅1例出现畸形红细胞数>8000/ml,准确率为90％。二者之差异有非常显著性(P<0.01光染法较不染色涂片更易观察红细胞形态,该方法有利血尿病儿的早期确诊。