骨形态构建蛋白 2型受体下调单核细胞趋化蛋白 1/CC类趋化因子受体 2通路对哮喘小鼠气道炎症和 Th1/Th2平衡的影响

目的探究骨形态构建蛋白 2型受体( BMPR2)对小鼠哮喘模型气道炎症和 Th1/Th2平衡的影响及其机制。方法2021年 9月至 2022年 11月选用 24只 C57BL/6小鼠尾静脉注射 BMPR2腺病毒,随后卵清蛋白( OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠于模型;采用随机数字表法分为对照组(生理盐水替代 OVA造模)、 OVA模型组( OVA诱导小鼠哮喘模型)、 OVA+载体( Vector)组(空载慢病毒处理的 OVA哮喘模型小鼠)OVA+BMPR2组( BMPR2过表达慢病毒处理的 OVA哮喘模型小鼠),每组 6只。收集支气管肺泡灌洗液( BALF)和肺组织。免疫、组织化学检测肺组织 BMPR2表达水平;苏木精 -伊红染色观察肺组织病理学改变;瑞氏染色后计数 BALF中各类炎症细胞数目;酶联免疫吸附测定( ELISA)试剂盒检测 BALF中白细胞介素( IL)-4,IL-5和 IL-13炎症因子水平;蛋白质印迹法检测肺组织和气道上皮细胞 16HBE中 BMPR2、单核细胞趋化蛋白 -1(MCP1)及其受体 CC类趋化因子受体 2(CCR2)蛋白表达水平。免疫共沉淀实验检测 BMPR2与 MCP1相互作用。结果与对照组相比, OVA模型组肺组织 BMPR2(0.36±0.05比 1.04±0.04)显著降低(P<0.01);小鼠肺泡破坏程度严重,肺组织有大量的淋巴细胞浸润; BALF中炎症细胞总数［(93.25±9.32)×104个/毫升比( 4.79±0.41)×104个/毫升, P<0.001］、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均升高; Th1相关炎症因子 γ干扰素( IFN-γ)水平降低, Th2相关炎症因子 IL-4,IL-5和 IL-13水平升高。过表达 BMPR2可降低肺泡破坏程度和淋巴细胞浸润程度。与 OVA+Vector组相比, OVA+BMPR2组 BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均降低; ELISA结果表明, OVA+BMPR2组 BALF中 IFN-γ水平升高, IL-4,IL-5和 IL-13水平降低,提示过表达 BMPR2可上调 Th1百分比,下调 Th2细胞百分比。进一步研究表明, BMPR2过表达显著下调了 MCP1及其受体 CCR2的表达水平,且 BMPR2与MCP1存在相互作用。结论 BMPR2可通过下调 MCP1/CCR2通路降低哮喘小鼠气道炎症,并调节 Th1/Th2平衡。