不同神经毒素对神经细胞Caspase-3影响的研究

目的 探讨不同神经毒对N27细胞Caspase-3的影响.方法 使用不同的神经毒素1-甲基4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP )和百草枯(Paraquat,PQ)处理N27细胞,四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazzol-2-y1)-2,5-diphenyl-tetrazdium Bromide,MTT]法检测细胞活性及代谢状态;RT-PCR检测凋亡相关基因Caspase-3的转录.结果 经MPP 、百草枯作用后N27细胞活性下降,且其下降程度与MPP 、百草枯浓度的升高呈线性关系;MPP 、百草枯作用后N27细胞Caspase-3 mRNA表达水平升高.结论 MPP 、百草枯引起N27细胞生长抑制,并可促进N27细胞中Caspase-3的表达和神经细胞凋亡的发生,神经细胞的凋亡可能是引发帕金森病的因素之一.     

SOD类似物阻断百草枯诱导的N27细胞凋亡的作用

目的探讨在离体培养的细胞中,SOD类似物[manganese(Ⅲ)meso-tetrakis(N,N′-diethylimidazolium-2-yl)porphyrin,MnTDM]阻断百草枯诱导的N27细胞凋亡的作用。方法以N27细胞为多巴胺能神经元的细胞模型,检测不同浓度的MnTDM对百草枯诱导的N27细胞凋亡的保护作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态;电镜观察凋亡形态;免疫细胞化学染色法观察凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果经百草枯作用后N27细胞活性下降,且其下降程度与百草枯浓度的升高呈线性关系,MnTDM明显阻断百草枯诱导的细胞活性下降(P<0.05),且该阻断作用与MnTDM的浓度成正相关;MnTDM预处理后,电镜观察到细胞凋亡形态好转,凋亡相关蛋白Bcl-2表达升高,Bax表达降低,Bcl-2/Bax值升高。结论MnTDM对百草枯介导的凋亡有一定的保护作用,提示其可能对帕金森病患者的临床防治有一定作用。