ICP-MS测定13种糖尿病药膳常用中药中的微量元素

目的：从微量元素角度探讨川贝母Fritillaria cirrhosa等13种糖尿病药膳常用中药的铬(Cr),锰(Mn),铜(Cu),锌(Zn),硒(Se)和钒(V)6 种微量元素含量,为药膳或中药治疗糖尿病提供实验依据。方法：样品经微波消解,使用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)同时测定上述6种微量元素的含量。结果：在设定的测试条件下,标准曲线的线性关系良好,相关系数>0.999,加标回收率为88.72%～110.00%,相对标准偏差(RSD)≤6.98%。测定结果显示,被测的元素含量因不同药材而存在较大差异,各元素的变动范围Cr 0～11.82 μg·g^-1,Mn 4.36～564.30 μg·g^-1,Cu 0.55～13.34 μg·g^-1,Zn 3.19～86.23 μg·g^-1,Se 0～0.39 μg·g^-1,V 0.05～12.04 μg·g^-1。结论：被测元素含量与糖尿病药膳治疗功效之间具有一定关系。     

胚胎干细胞用于药物及其他化合物筛选的研究进展

胚胎干细胞 (Em bryonic stem cell,ES cell)用于药物及其他化合物的体外筛选 ,称为胚胎干细胞体外测试 (Embryonic stem cell test,EST) ,通过 EST可以把药物等化合物分为三类 :无毒性、弱毒性和强毒性。与其他方法相比 ,EST具有很大优点 :(1)无须牺牲大量怀孕动物。(2 )不用担心对动物或人体的巨大副作用。(3)由于胚胎干细胞在体外分化成多种细胞的潜能 ,EST可用于分化过程中药物或其他化合物对发育过程造成的毒理学研究。(4)可与计算机等分析方法结合 ,因而具有更高的准确率和敏感性。 (5 )可以进行分子水平的定量研究。这些都使得EST在药物筛选中显示出巨大的发展前景。本文综述了 EST的发展、研究方法、现状及其展望。     

尿酸氧化酶的表达纯化及活性形式鉴定

目的:在大肠杆菌内表达具有活性的黄曲霉尿酸氧化酶。方法:用重叠PCR从黄曲霉(Aspergillusflavus)3.1398中钓取了尿酸氧化酶(urateoxidase,UO,EC1.7.3.3)基因,克隆到原核表达载体pET22b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选到高表达的重组转化子菌株。经乳糖诱导目的蛋白表达,阴离子交换柱纯化,获得纯品。SDS PAGE分析样品纯度。用尿酸缓冲液测定酶活性,用戊二醛交联结合质谱法测定相对分子质量。结果:目的蛋白为胞内可溶性表达,表达量达菌体总蛋白的35%,纯化后的样品纯度达99%,其酶比活力可达35U/mg。经质谱测定重组UO单体的相对分子质量为34×103。交联后相对分子质量为160×103。结论:黄曲霉尿酸氧化酶可在大肠杆菌中可溶表达,并具有活性,其活性形式为四聚体。     

甘草酸人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析

目的制备中药甘草的活性成分甘草酸(GA)的人工抗原及抗血清,为制备GA的单克隆抗体、并建立快速检测GA的酶联免疫吸附测定(ELISA)提供技术基础。方法将GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量,用此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过间接ELISA法和竞争ELISA法检测其抗体效价和特异性。结果合成的人工抗原GA-BSA中GA与BSA的结合比约为7∶1;免疫小鼠得到特异针对GA的多抗血清,GA抗体的效价为1∶8000。结论成功地合成了GA的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性,可应用于建立GA的免疫分析方法。     

骨保护素的研究进展

骨保护素(osteoprotegerin，OPG)是1997年发现的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)受体家族的新成员，也称破骨细胞抑制因子(osteoclast inhibitory factor，OCIF)或称为树枝状细胞受体1(dendritic cell derived receptor-1，FDCR-1)，它是骨代谢一个重要的负调控因子。OPG是核因子KB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL)、