转染增殖细胞核抗原肽表位融合白细胞介素-18基因的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的 观察转染增殖细胞核抗原(PCNA)肽表位、白细胞介素(IL)-18融合基因的树突状细胞(DCs)对T淋巴细胞增殖的诱导作用.方法 实验分为DCs组、空载体组、PCNA肽表位基因转染组、PCNA肽表位融合IL-18基因转染组共4组,分别将空质粒(pIPES-EGFP)、PCNA肽表位质粒[pIPES-EGFP-PCNA(6)]和PCNA肽表位融合IL-18基因质粒[pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18]通过脂质体转染DCs.每组按照DCs∶T淋巴细胞1∶1、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例分为4个浓度梯度,将DCs与T淋巴细胞共培养.采用CCK-8法检测T细胞增殖.结果 各组DCs均能刺激T淋巴细胞增殖,DCs∶T为1∶10时,转染pIPES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激指数为2.62,优于DCs组(1.70)、空载体组(1.78)和pIPES-EGFP-PCNA(6)组(1.93).结论 转染pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激T淋巴细胞增殖的作用最强,DCs:T为1∶10时最佳.

Abstract：

Objective To investigate the proliferation activity of T lymphocytes induced by dendritic cells modified by proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-Epitope and interleukin (IL)-18 genes.Methods The experiment was divided into four groups, including DCs group, empty vector group, PCNAEpitope transfection group and PCNA-Epitope plus IL-18 gene group, and every group was assigned to four EGFP), PCNA-Epitope plasmid [pIRES-EGFP-PCNA(6)] and plasmid loaded PCNA-Epitope and IL-18 gene [pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18] were transfected into peripheral blood-derived dendritic cells, then cocultured with T lymphocytes respectively. T lymphocytes proliferation was determined by CCK-8 assays.Results The index of stimulation of the pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18 group was 2. 62 when the ratio transfection group (1. 93). Conclusion DCs treated with the PCNA-Epitope and IL-18 gene could stimulate T lymphocytes proliferation more effectively,and the optimal rio of DCs:T was 1:10.     

FBXO22对结肠癌细胞侵袭迁移的影响及相关机制

目的： 探讨结肠癌细胞FBXO22基因表达沉默后对细胞侵袭迁移的影响及其相关分子机制。方法：利用siRNA-Ctrl和siRNA-FBXO22小干扰片段转染结肠癌SW620和HCT116细胞,干扰FBXO22基因表达,Western blot 检测细胞转染效率,Transwell细胞迁移实验分析干扰FBXO22对细胞侵袭迁移的影响,Western blot检测细胞侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9和MDM2水平的变化。结果：转染FBXO22 siRNA后,结肠癌SW620和HCT116细胞FBXO22的表达量明显下降、细胞侵袭转移能力降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低,而MDM2蛋白表达水平上调。结论： FBXO22与结肠癌细胞侵袭迁移相关,其机制可能通过调节MMP-2和MMP-9表达而实现。     

KIF4A在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨人结直肠癌组织中染色体驱动蛋白KIF4A的表达及其临床意义。方法：收集110例手术切除的结直肠癌及相应癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织标本,采用免疫组织化学方法检测其中KIF4A的表达情况,并分析KIF4A的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及其预后之间的关系。结果：结直肠癌组织中KIF4A的表达显著高于癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织（P < 0.001）;KIF4A的表达水平与结直肠癌患者的分化程度（P=0.023）、淋巴结转移（P=0.020）、远处转移（P=0.032）、TNM分期（P < 0.001）和血清癌胚抗原（CEA）水平（P=0.014）有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小等无关（P > 0.05）。在随访的110例结直肠癌患者中,Kaplan?Meier生存曲线显示,KIF4A高表达组的5年生存率明显低于KIF4A低表达组（P < 0.05）。单因素生存分析显示,KIF4A表达程度、肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及血清CEA水平与结直肠癌患者术后生存时间相关。多因素COX比例风险回归模型进一步分析显示,KIF4A表达水平、TNM分期、淋巴结转移和远处转移为结直肠癌患者预后的独立危险因素。结论：KIF4A在结直肠癌组织中高表达,并且其高表达与结直肠的侵袭转移密切相关,KIF4A对于术后结直肠癌患者的预后评估具有参考价值。     

虎杖的提取分离和纯化技术研究新进展

虎杖中富含大量的药用有效成分,是当今医学界和医药工业研究和开发的重点中药材之一.本文对虎杖有效成分的提取和分离方法以及相关新技术的应用进行了综述,结合虎杖的研究进展及工业生产现状,分析和预测虎杖的应用和开发前景,旨在提高虎杖的研发深度、增加其工业开发价值.     

KMnO4-Luminol化学发光分析体系的研究及尿中铅的测定

目的建立在最佳条件下利用KMnO4-Luminol发光体系的发光反应的后续发光定量测定微量铅的方法.方法研究KMnO4-Luminol发光体系的发光反应历程.实现流动注射化学发光分析测定尿中铅含量.结果方法的检出限达到0.01μg/ml,检测的线性范围在5.0×10-4～1.0×10-7mol/L.结论干扰试验表明方法具有较好的选择性.     

KMnO4-Luminol化学发光分析体系的研究及尿中铅的测定

目的　建立在最佳条件下利用KMnO4 Luminol发光体系的发光反应的后续发光定量测定微量铅的方法。方法　研究KMnO4 Luminol发光体系的发光反应历程。实现流动注射化学发光分析测定尿中铅含量。结果　方法的检出限达到 0 .0 1μg/ml,检测的线性范围在 5 .0× 10 4～ 1.0× 10 7mol/L。结论　干扰试验表明方法具有较好的选择性。     

RMP与肝细胞癌的发生发展

<正>肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界第六大常见癌症,也是第三大致死的癌症疾病[1],发病率高,发病机制不明确,复发转移早,疗效差,危害大。但是目前世界上相关的治疗手段匮乏,而且治疗效果并不显著。RPB5结合蛋白(RPB5melliating protein,RMP),又名URI,作为一种细胞 更多还原     

抗HER2靶向治疗的耐药机制及治疗新策略

恶性肿瘤的分子靶向治疗一直是临床医师关注的焦点。在这些治疗靶点中,人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)信号通路是肿瘤转化研究中最热门的靶点之一。每年需要接受抗HER2靶向治疗的患者多达5 000万人,部分患者表现出对抗HER2靶向治疗的原发或继发性耐药,且大多数晚期患者不可避免地因耐药问题出现疾病进展而死亡。因此,深入了解抗HER2治疗的原发性和继发性耐药的潜在机制对于开发新的治疗策略至关重要。本文总结了抗HER2靶向治疗的潜在耐药机制,讨论了克服抗HER2治疗耐药策略的应用前景以及用于治疗HER2阳性患者的新型抗HER2治疗方法的发展现状。     

Lin28A基因过表达促进结肠癌细胞的增殖和侵袭

目的:构建Lin28A重组慢病毒表达载体,并探讨Lin28A基因过表达对结肠癌细胞增殖和侵袭的作用及其分子机制。方法:利用慢病毒载体建立Lin28A过表达结肠癌HT-29细胞株,Western blot检测Lin28A、增殖细胞核抗原(PCNA)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白表达水平;噻唑蓝(MTT)法和Transwell侵袭实验检测Lin28A过表达对结肠癌细胞增殖和转移的影响。结果:与对照组和空载组比较,Lin28A蛋白在转染组表达明显升高,细胞增殖和侵袭能力明显提高(P＜0.01),PCNA和MMP-2蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P＜0.01)。结论:Lin28A可以促进结肠癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制可能与上调PCNA和MMP-2等蛋白有关。     

转染增殖细胞核抗原肽表位融合白细胞介素-18基因的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的 观察转染增殖细胞核抗原(PCNA)肽表位、白细胞介素(IL)-18融合基因的树突状细胞(DCs)对T淋巴细胞增殖的诱导作用.方法 实验分为DCs组、空载体组、PCNA肽表位基因转染组、PCNA肽表位融合IL-18基因转染组共4组,分别将空质粒(pIPES-EGFP)、PCNA肽表位质粒[pIPES-EGFP-PCNA(6)]和PCNA肽表位融合IL-18基因质粒[pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18]通过脂质体转染DCs.每组按照DCs∶T淋巴细胞1∶1、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例分为4个浓度梯度,将DCs与T淋巴细胞共培养.采用CCK-8法检测T细胞增殖.结果 各组DCs均能刺激T淋巴细胞增殖,DCs∶T为1∶10时,转染pIPES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激指数为2.62,优于DCs组(1.70)、空载体组(1.78)和pIPES-EGFP-PCNA(6)组(1.93).结论 转染pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激T淋巴细胞增殖的作用最强,DCs:T为1∶10时最佳.