黄芩苷对转化生长因子β1 诱导的A549 细胞自噬作用的影响

目的探讨黄芩苷对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的A549 细胞自噬作用的影响。方法采用不同浓 度TGF-β1（2.5、5、10 ng·mL-1）诱导A549 细胞48 h后,检测其Collagen I基因与自噬相关基因表达水平,以 确定模型复制的最佳条件。在高、中、低剂量（200、100、50 μg·mL-1）黄芩苷对TGF-β1 诱导的A549 细胞模 型干预后,采用RT-qPCR 法检测细胞的肺纤维化标志基因CollagenⅠ及自噬相关基因（ATG3、ATG5、ATG7、 ATG12）的表达;Western Blot 法检测自噬调节标志蛋白p62、LC3B Ⅱ/Ⅰ的表达;通过转染Ad-mCherry-GFPLC3B 双荧光标记腺病毒检测细胞中自噬流的情况。结果使用10 ng·mL-1 TGF-β1 诱导A549 细胞48 h 后, CollagenⅠ基因表达显著上调,ATG3、ATG5、ATG7、ATG12 基因表达明显下调,差异均有统计学意义（P＜ 0.05,P＜0.01）。经黄芩苷干预后,与模型组相比,黄芩苷高剂量组（200 μg·mL-1）A549 细胞的CollagenⅠ基因 表达显著下调（P＜0.01）,ATG3、ATG5、ATG7、ATG12 基因表达明显上调（P＜0.05）;黄芩苷各给药组A549 细胞的p62 蛋白表达显著下调（P＜0.05,P＜0.01）,LC3B Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著上调（P＜0.05,P＜0.01）;黄芩 苷高剂量组的细胞自噬能力明显激活。结论黄芩苷可能在减少TGF-β1 诱导的A549 细胞外基质沉积的同 时,能够增强细胞的自噬水平,可能是治疗肺纤维化的有效成分。     

麦门冬汤抗肺纤维化作用机制的网络药理学研究

目的:采用网络药理学方法探讨麦门冬汤治疗肺纤维化的潜在作用机制.方法:通过中药分子机制的生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)、中医药百科全书数据库(ETCM)获取麦门冬汤的化学成分和潜在作用靶点;通过治疗靶点数据库(TTD)、人类的非线性孟德尔遗传数据库(OMIM)、DRUGBANK数据库获取肺纤维化相关的作用靶...     

基于高内涵细胞成像系统研究黄芩苷对人肺癌A549 细胞上皮间质转化模型的影响

目的基于高内涵细胞成像系统（HCS）探讨黄芩苷（Baicalin）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺癌 A549 细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法体外培养人肺癌A549 细胞,用TGF-β1 诱导A549 细胞发生上 皮间质转化,设立空白对照组（TGF-β1 0 ng·mL-1）、TGF-β1 模型组（TGF-β1 5 ng·mL-1）和黄芩苷干预组 （TGF-β1 5 ng·mL-1 +黄芩苷5、10、20 μmol·L-1）。采用MTT 法检测黄芩苷对A549 细胞活性的影响;以 TGF-β1 诱导人肺癌A549 细胞发生上皮间质转化,并加入不同浓度黄芩苷干预,采用HCS 分析细胞肌动蛋白 应激纤维（F-actin）纹理强度、细胞面积、细胞圆度和细胞长度等形态学变化,以及细胞黏附能力和运动迁移能 力变化;RT-qPCR 法检测上皮间质转化相关标志基因Collagen I、FN1、Vimentin 和E-cadherin 的相对表达 量。结果黄芩苷干预A549 细胞48 h 后半数抑制浓度（IC50）为22.59 μmol·L-1。HCS 分析结果显示,与空白对 照组比较,TGF-β1 模型组细胞形态呈间质细胞样（纺锤形）变化,F-actin 纹理强度增强（P＜0.01）,细胞长度 和细胞面积增大（P＜0.01）,细胞圆度减小（P＜0.01）,黏附率降低（P＜0.01）,迁移率和迁移速度升高（P＜ 0.01）;与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组细胞形态呈上皮细胞样（不规则多边形）变化,F-actin 纹理强度 减弱（P＜0.05,P＜0.01）,细胞长度和细胞面积减小（P＜0.01）,细胞圆度增大（P＜0.01）,黏附率升高（P＜ 0.01）,迁移率和迁移速度降低（P＜0.05,P＜0.01）。RT-qPCR 结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1 模型组 Collagen Ⅰ、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.01）,E-cadherin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.01）;与TGF-β1 模型组比较,黄芩苷干预组Collagen I、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.05,P＜0.01）,E-cadherin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.05,P＜0.01）。结论黄芩苷能够有效阻止 TGF-β1 诱导的人肺癌A549 细胞上皮间质转化进程,提示HCS 是一种多参数系统分析细胞上皮间质转化的有 效工具。     

改进型“瑞士卷”法在小鼠肠道组织切片中的应用

目的为提高小鼠肠管组织石蜡切片的整体质量, 探讨一种改进型"瑞士卷"法在肠道组织病理切片中的应用。方法分别采用常规"瑞士卷"制作方法和改进型"瑞士卷"法脱水包埋小鼠回肠、结直肠组织样本, 制成组织切片。HE染色用于评估组织切片整体形态质量、组织器械性损伤及黏膜下层与肌层分离的情况;免疫组织化学染色LYVE-1标记淋巴管、染色CD31标记血管, 分析黏膜下层结构完整性;采用免疫荧光染色对小鼠回肠潘氏细胞(溶菌酶阳性)及结直肠杯状细胞(MUC2阳性)予以标记。结果 HE染色显示改进型"瑞士卷"组小鼠肠管组织切片整体形态及外观更加规整, 组织未发生器械性损伤, 且极少见黏膜下层与肌层分离的现象;免疫组织化学结果显示, 改进型"瑞士卷"组小鼠肠管组织切片黏膜下层多见完整的淋巴管和血管结构, 计数其黏膜下层完整淋巴管和血管的数量分别为(701.0±46.7)条和(881.6±58.7)条, 显著高于常规方法组(149.5±23.6)条和(122.9±20.2)条(P<0.05);免疫荧光发现, 改进型"瑞士卷"组小鼠回肠潘氏细胞及结直肠杯状细胞定位准确, 极少见细胞结构缺失的情况。结论改进...     

自噬调节与特发性肺纤维化药物治疗研究进展

特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种病因复杂、与年龄相关的肺纤维化疾病，其发病过程表现出进行性与不可逆性，最终导致患者呼吸系统衰竭而死亡。近些年的研究证实自噬参与了IPF的发生发展。本文回顾总结了自噬和IPF相关的临床研究、动物和细胞模型研究以及基于自噬的药物治疗研究，希望对阐明IPF的病理机制和药物研发有所帮助。     

腹腔镜结直肠癌根治术后口服肠内营养对术后康复作用的临床研究

目的:探讨术后早期口服肠内营养(enteral nutrition, EN)对腹腔镜结直肠癌术后患者康复作用的影响。方法:前瞻性分析2021年5月至2022年2月本院拟行腹腔镜结肠癌根治术100例患者的临床资料，采用随机数字表法将患者分为观察组(EN)及对照组(非EN)各50例。观察组从术后第1天给予口服肠内营养，并调整浓度及剂量，逐渐增加至全量；对照组给予口服等量的温开水，待通气后给予流质饮食，并逐步过渡至正常饮食。测定两组患者术后第7天营养、炎症及肠屏障功能等指标，记录两组患者术后排气、排便、下床时间及术后住院时间。结果:本研究100例结直肠癌患者均治愈出院，观察组患者恢复正常饮食时间(t=4.658;P<0.05)和术后住院日(t=6.304;P<0.05)均显著短于对照组；术后第7天，两组患者在血红蛋白及白蛋白等营养指标水平未见显著差异(P>0.05),但观察组外周血白细胞计数(t=4.973;P<0.05)、C反应蛋白(t=5.075;P<0.05)、中性粒细胞计数(t=7.597;P<0.05)水平均显著低于对照组；观察组患者二胺氧化酶(...