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建立了小鼠脾脏、胸腺细胞体外转化微量培养系统,确定了最佳实验条件.点蜡法充CO_2,简便易行,效果好.RPMI-1640培养基内补充胎牛血清,其浓度确定为在脾细胞培养为10%,在胸腺细胞培养为20%.脾细胞培养最适细胞密度为2~5×10~6/ml,Con A最适量为2~4μg/培养;胸腺细胞培养细胞最适密度为1×10~7/ml,Con A最适量为2~4μg/培养.两种已知免疫活性的药物在脾细胞培养体系有明确肯定的反应. 相似文献
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抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其抗毒效应 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :为制备高毒性的小分子生物毒素河豚毒素 (TTX)的单克隆抗体 (mAb) ,探讨TTX中毒免疫抗毒的可能性。方法 :以TTX为半抗原 ,与中国鲎血蓝蛋白 (TTH)化学偶联制备人工抗原 (TTX_TTH) ;并以其免疫BALB c小鼠。用杂交瘤技术制备抗TTX的mAb ,用竞争抑制酶免疫分析法测定mAb对TTX结合活性 ,以mAb与检测抗原的结合被抑制 5 0 %时的TTX浓度 (IC50 )表示mAb的结合反应性。对小鼠预防注射抗体 ,测试抗体对抗TTX中毒的效果。结果 :建立了 2株对TTX_BSA阳性反应的mAb(1E4和 3C11) ,均属IgG1 亚类 ;具有TTX结合活性 ,其IC50 值分别为 3.2× 10 _6 mol L和 9.9× 10 _7mol L ;亲和力常数 (Kaff)分别为 3.0× 10 6 L mol和 2 .8× 10 6 L mol。小鼠预防给予mAbs ,可对抗 1×LD的TTX攻毒 ,动物存活率 71% ;抗 1.5×LD时 ,1 3存活 ;抗毒效果好于小鼠抗血清对照。结论 :用新的TTX人工抗原成功地制备了抗TTX的mAb ,具有一定的体内预防抗毒效价。 相似文献
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目的 开发河豚毒素 (TTX)的抗毒疫苗。方法 TTX与载体蛋白中国鲎血蓝蛋白 (TTH)、破伤风类毒素 (TT)和牛血清白蛋白 (BSA)化学偶联 ,分别制成免疫抗原TTX TTH和TTX TT ,检测抗原TTX BSA。经腹腔或皮下注射免疫原 (用Freund佐剂 ) ,免疫BALB/c小鼠 ;每组 12只 ;5个月内接受免疫原累计量 375 μg/鼠。定期采集动物血清 ,ELISA法监测血清中抗体质量 (滴度及亲和力 )。经igTTX的生理盐水攻击免疫鼠 ,以检验抗毒效价 ;首次剂量6 30 μg·kg- 1,间隔 2~ 3周后提高剂量再次攻击活存动物 ,观察攻毒实验后症状 ,记录 2 4h存活率及死亡鼠的存活时间。结果 所试两种人工抗原的抗毒效应无明显差异。免疫鼠经ig 6 30 ,80 0 ,12 0 0 ,15 0 0 ,2 0 0 0 μg·kg- 1TTX攻毒时 ,存活率分别为10 0 % ,95 % ,90 % ,70 %和 4 5 % ;测得半数死亡剂量约为 2 0 0 0 μg·kg- 1。免疫鼠经 2~ 5次igTTX重复攻毒 ,86 %动物累积耐受剂量高于 3.5mg·kg- 1;4 3%动物累积耐受剂量高于 5 .5mg·kg- 1。中毒对照动物ig 6 0 0 μg·kg- 1TTX全部死亡。结论 研制的TTX的化学实验疫苗可高效预防TTX口服攻毒 ,免疫预防是对抗TTX中毒很有希望的途径 相似文献
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新型免疫抑制剂环孢素A(CsA)广泛用于防止器官移植排斥反应和治疗自身免疫病,如类风湿性关节炎(RA)、牛皮癣、多发性硬化、炎性肠病等。本文就RA的免疫病理、CsA治疗的作用机理、临床效果、毒副反应及应用前景等研究进展作简要介绍。 相似文献
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建立了新托品的放射免疫测定方法。最小检测值20pg/0.1ml,抗血清滴度1:320,K值1.4×10~9M~(-1)检测方法特异性好,方法简便、经济、快速,可直接测定全血和尿样品。 相似文献
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催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶赵毅民荣康泰徐勤惠(军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850)梭曼是难防难治的有机磷毒剂.为了寻找新的解毒途径,本研究设计并合成了全新化合物1-羟基-1-对胺基苯基甲膦酸单频哪基醇酯.此化合物可竞争性地抑制梭曼水解酶... 相似文献
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徐勤惠 《国外医学(药学分册)》1990,(5)
最近,在法国和美国于1989年8月~10月召开的兴奋性氨基酸会议上的大量报告,反映了这一领域研究的新进展。NMDA 受体NMDA 受体复合物包括内离子通道和三个神经递质(谷氨酸、甘氨酸和多胺)的入坞部位。对这些部位的情况仍有争议,例如人们仍不知多胺部位位于膜的何侧。人们已经知道对马钱子碱不敏感的甘氨酸位点与谷氨酸位点相互作用的事实,但只是在最近,几个实验室才同时描述了两者相互作用的精确情况。Ferkany 等认为:有单个一类NMDA 受体和两个部分重叠的膦酸拮抗剂识 相似文献